[發明專利]一種從芒果果皮中分離純化芒果苷的方法

有效

• 申請號: 201210053385.9
• 申請日: 2012-03-03
• 公開（公告）號: CN102617669A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發明（設計）人: 李鮮;孫崇德;羅豐雷;陳昆松
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C07H17/04
• 分類號: C07H17/04;C07H1/08
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 張法高;趙杭麗

技術領域

本發明屬于天然化合物的提取分離純化技術領域，具體涉及以芒果果皮為原料，采用液液萃取，大孔樹脂和HSCCC的聯用技術分離純化芒果苷的方法。

背景技術

芒果苷（mangiferin），?別名芒果素，莞知母寧，分子式：C₁₉H₁₈O₁₁，分子量：422.34，CAS號：4773-96-0，是一種四羥基吡啶的碳糖苷，屬于雙苯吡酮類化合物。芒果苷存在于漆樹科植物芒果（Mangifera?indica?L.）的果實、葉、樹皮，百合科植物知母（Anemarrhena?asphodeloides?Bge.）的根莖、地上部分，鳶尾科植物射干[Belamcanda?chinensis（L.）DC.]的花、葉等植物中。芒果苷結構式如下：

近年研究表明，芒果苷具有較強的抗氧化，消炎，抑菌，免疫調節，抑制腫瘤以及降血糖等活性，受到人們的廣泛關注?，F有提取純化芒果苷的原料大多集中于藥材和芒果葉中，技術手段多采用堿液提取或一定濃度的醇提取結合結晶獲取芒果苷，但這些工藝比較粗放，得到的芒果苷產品純度不能保證。

近年來，大孔樹脂結合高速逆流色譜技術提取純化高純度天然產物已在很多方面取得成功，但利用芒果果皮采用大孔樹脂和高速逆流色譜聯用技術純化獲得高純度芒果苷（98%以上）的研究未見報道。芒果作為一種美味的熱帶水果深受人們喜愛，然而，芒果果皮占果實10%左右（重量），在果實加工或鮮食過程中都成為廢棄物，研究從芒果果皮中提取高純度的芒果苷不僅可以變廢為寶，在一定程度上還可以給芒果的深加工提供思路，并可為芒果苷藥理作用及其相關功能活性的研究提供技術支撐和工作基礎，最大程度地提高芒果的附加值。

發明內容

本發明的目的是提供一種從芒果果皮分離純化芒果苷的方法，通過以下步驟實現：

（1）粗提物的準備：一定質量干燥的芒果果皮粉末，用石油醚（固液比1:20）浸泡2?h，超聲30?min，過濾去掉石油醚，濾渣45℃減壓蒸干石油醚后再用提取液（甲醇：乙醇：丙酮1:1:1,?v/v/v）超聲提取兩次（固液比1:20），過濾，合并兩次濾液，濃縮蒸干得浸膏，然后溶于ddH₂O中；

（2）乙酸乙酯萃取：將步驟（1）得到的粗提水溶液經過乙酸乙酯等體積萃取兩次，上相合并后再經水等體積萃取一次后，合并下相溶液45℃減壓蒸出溶液中殘留的乙酸乙酯；

（3）將（2）步驟得到的提取液上樣HPD100大孔樹脂，上樣流速2?ml/min。上樣后的HPD100大孔樹脂先用水和5%乙醇各10?BV（柱床體積）洗脫以去掉極性較高的雜質，然后用10?BV?30%乙醇洗脫芒果苷，洗脫流速為2?ml/min，收集30%洗脫液，在旋轉蒸發儀上45℃蒸干得大孔樹脂粗提物粉末；

（4）分離純化芒果苷：配制乙酸乙酯-正丁醇-水（4:1:5）溶劑體系，充分搖勻過夜后，將上下相分開，超聲脫氣，上相為固定相，下相為流動相，將固定相以20?ml/min流速泵入高速逆流色譜儀（HSCCC），穩定后，調節逆流色譜儀轉速800?rpm，同時流動相以2?ml/min流速泵入HSCCC，待流出液分層后進樣大孔樹脂粗提物粉末，根據HSCCC圖譜收集出峰處各組分（每管1.8?ml），并對各管樣品進行HPLC檢測，合并含有單一芒果苷的各管樣品，在旋轉蒸發儀上蒸干即得到高純度的芒果苷，回收率≥70%，產品純度均≥98%。本發明純化得到的芒果苷經過高效液相色譜（HPLC）和質譜（MS）鑒定，與文獻報道一致。

現有提取純化芒果苷的原料大多集中于藥材和芒果葉中，且技術手段多采用堿液提取或一定濃度的醇提取大孔樹脂純化后結晶獲取的芒果苷，利用芒果果皮采用大孔樹脂和高速逆流色譜聯用技術純化獲得高純度芒果苷（98%以上）的研究未見報道。本發明采用液液萃取，大孔樹脂和HSCCC的聯用技術，以芒果果皮干燥粉末為原料分離純化得到高純度的芒果苷。本發明相對于過去的工藝有如下優點：（1）生產流程安全易操作；（2）生產周期短；（3）純化產物回收率高，純度高；（4）整個純化過程通過HPLC進行精確定量，準確度高；（5）HSCCC所用的溶劑可回收后重復利用，成本較低。

附圖說明

圖1為本發明的工藝流程圖。

圖2為‘綠皮芒’果皮粗提液HPLC色譜圖。

圖3為乙酸乙酯萃取后下相HPLC色譜圖。

圖4為HPD100大孔樹脂純化所得樣品的HPLC色譜圖。