[發(fā)明專利]與I群禽腺病毒免疫相關(guān)融合蛋白及其編碼基因與應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210042147.8
• 申請日: 2012-02-23
• 公開（公告）號: CN102603898A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 謝芝勛;謝麗基;唐熠;謝志勤;龐耀珊;鄧顯文;劉加波;范晴
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西壯族自治區(qū)獸醫(yī)研究所
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;A61K39/235;A61K39/39;A61K48/00;A61P31/20
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種與I群禽腺病毒免疫相關(guān)融合蛋白及其編碼基因與應(yīng)用。

背景技術(shù)

I群禽腺病毒(fowl?adenovirus?group?I，F(xiàn)AVI)包括從雞、火雞、鵝和其他禽類分離的共12個(gè)血清型的病毒，其中比較著名的病毒株有雞胚致死孤兒病毒、鵪鶉支氣管炎病毒、雞包涵體肝炎病毒。近年來，I群禽腺病毒引起了雞只包涵體肝炎、心包積液肝炎綜合征和砂囊糜爛等疾病，雖然I群禽腺病毒常呈陰性感染，但是它與其他病原共同作用于家禽，給養(yǎng)禽業(yè)帶來較大威脅。

相對于傳統(tǒng)疫苗，基因工程疫苗的生產(chǎn)完全在體外進(jìn)行，無需以易感動(dòng)物為載體來獲得病毒制備活疫苗或者滅活苗；同時(shí)，基因工程疫苗不含能引起雞群發(fā)病的成分，因而沒有散毒的危險(xiǎn)。其中，DNA疫苗是將含有編碼抗原基因的質(zhì)粒DNA直接導(dǎo)入體內(nèi)，使抗原基因在體內(nèi)表達(dá)，誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答，包括中和抗體、淋巴細(xì)胞和輔助T細(xì)胞。通過此種疫苗表達(dá)的蛋白能夠以天然抗原形式被免疫系統(tǒng)識別，熱穩(wěn)定性好、免疫力持久。

雞白細(xì)胞介素2(ChIL-2)是輔助T細(xì)胞分泌的淋巴因子，在免疫系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用，可促進(jìn)T細(xì)胞、NK細(xì)胞、B細(xì)胞的分化成熟及激活其生物活性，誘導(dǎo)淋巴因子激活殺傷細(xì)胞活性，促進(jìn)干擾素、腫瘤壞死因子等的合成與釋放以及抗體生成，可大大增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，因此ChIL-2作為DNA疫苗佐劑已經(jīng)被國內(nèi)外廣泛使用。

面對艱難的I群禽腺病毒防治工作，盡快開展相關(guān)疫苗研制顯得非常必要，DNA疫苗是很好的發(fā)展方向。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種與I群禽腺病毒免疫相關(guān)融合蛋白及其編碼基因。

本發(fā)明提供的融合蛋白，包括Hexon蛋白和雞白細(xì)胞介素-2；

所述Hexon蛋白為如下1)或2)所示的蛋白質(zhì)：

1)由序列表中序列6的自N’末端的第1-914位氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

2)將序列6的自N’末端的第1-914位氨基酸序列經(jīng)過一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由1)衍生的蛋白質(zhì)；

所述雞白細(xì)胞介素-2為如下3)或4)所示的蛋白質(zhì)：

3)由序列表中序列6的自N’末端的第933-1075位氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

4)將序列6的自N’末端的第933-1075位氨基酸序列經(jīng)過一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由3)衍生的蛋白質(zhì)。

上述融合蛋白為如下1)或2)中任一所述的蛋白質(zhì)：

1)由序列表中的序列6的氨基酸殘基序列組成的蛋白質(zhì)；

2)將序列表中的序列6氨基酸殘基序列經(jīng)過一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由1)衍生的蛋白質(zhì)。

上述一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加為不超過10個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加。

上述融合蛋白依次由Hexon蛋白、linker和雞白細(xì)胞介素-2蛋白組成；融合蛋白的氨基酸序列為序列表中的序列6，其中，自N’末端第933-1075位氨基酸為雞白細(xì)胞介素-2蛋白，自N’末端第1-914位氨基酸為Hexon蛋白，自N’末端第915-932位氨基酸為Linker接頭。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種DNA分子。

本發(fā)明提供的DNA分子，包括Hexon蛋白的編碼基因和雞白細(xì)胞介素-2的編碼基因；

所述Hexon蛋白的編碼基因?yàn)槿缦?)-3)中任一所述的DNA分子：

1)序列表中序列5自5’末端的第16-2779位核苷酸所示的DNA分子；

2)在嚴(yán)格條件下與1)限定的DNA序列雜交且具有相同功能的DNA分子；

3)與1)限定的DNA序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且具有相同功能的DNA分子；

所述雞白細(xì)胞介素-2的編碼基因?yàn)槿缦?)-6)中任一所述的DNA分子：

4)序列表中序列5自5’末端的第2825-3265的DNA分子；

5)在嚴(yán)格條件下與4)限定的DNA序列雜交且具有相同功能的DNA分子；