[發(fā)明專利]基于農(nóng)藥介入后轉(zhuǎn)Bt基因水稻對(duì)褐飛虱生態(tài)安全性評(píng)價(jià)的方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210034556.3
• 申請(qǐng)日: 2012-02-16
• 公開（公告）號(hào): CN102577897A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊國(guó)慶;石朝鵬;杜尚根
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 揚(yáng)州大學(xué)
• 主分類號(hào): A01G16/00
• 分類號(hào): A01G16/00;A01G7/00
• 代理公司: 南京知識(shí)律師事務(wù)所 32207
• 代理人: 盧亞麗

1.基于農(nóng)藥介入后轉(zhuǎn)Bt基因水稻對(duì)褐飛虱安全性評(píng)價(jià)的方法，其特征在于：

1）農(nóng)藥的選擇：三唑磷和井岡霉素原藥，濃度設(shè)置：三唑磷10、20、40、80ppm；井岡霉素100、200、400、800ppm；

2）處理方法：采用盆栽水稻接蟲法，噴霧法施藥；

3）噴藥：在分蘗期噴灑盆栽水稻，噴灑時(shí)按農(nóng)藥濃度由低到高的順序噴施，噴霧處理水稻葉片和莖干部分；處理后的盆栽水稻覆蓋網(wǎng)罩，每個(gè)處理和對(duì)照均設(shè)置5個(gè)重復(fù)，以噴水作為對(duì)照代表未用農(nóng)藥處理；

4）安全性考察：

①褐飛虱種群生命參數(shù)：轉(zhuǎn)Bt基因水稻和親本對(duì)照水稻同時(shí)分別噴藥24h后，采集長(zhǎng)勢(shì)一致的水稻中下部莖桿，置于玻璃杯內(nèi)，兩株水稻/杯，后每杯接初孵褐飛虱若蟲10頭，在光照培養(yǎng)箱內(nèi)培育，每個(gè)處理5次重復(fù)；采用褐飛虱室內(nèi)種群生命表法，記錄處理過程中褐飛虱種群的生命參數(shù)―各齡期存活率及齡期、成蟲羽化率、雌雄比、長(zhǎng)短翅型比、雌蟲壽命，計(jì)算種群趨勢(shì)指數(shù)；

②水稻受害級(jí)別：在噴藥24h后用80目紗網(wǎng)罩住盆栽水稻，每穴水稻接入100頭3齡若蟲，每盆300頭，對(duì)照用水噴灑，所有供試水稻在自然田間下生長(zhǎng)，每個(gè)對(duì)照和處理20次重復(fù)，每24小時(shí)檢查一次若蟲的存活情況，并作相應(yīng)的若蟲補(bǔ)充；分別在水稻接蟲后7d和14d觀察受害級(jí)別；

③水稻植株草酸：采用三氯化鈦顯色法測(cè)定草酸含量，取農(nóng)藥處理后7天的水稻植株，稱重后用組織搗碎機(jī)破碎后過濾取汁，加入活性炭，加入量為原汁體積的1/4，在常溫下脫色30min，然后用80-2型離心機(jī)分離活性炭，離心機(jī)轉(zhuǎn)速為3000?r/min，溶液呈無色或呈乳白色后，取3ml稻汁加入0.15ml濃度為1%三氯化鈦溶）顯色，在分光光度計(jì)上于400?nm下測(cè)定吸光值，用草酸配制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出回歸方程，由此求出草酸的含量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于農(nóng)藥介入后轉(zhuǎn)Bt基因水稻對(duì)褐飛虱安全性評(píng)價(jià)的方法，其特征在于模擬田間噴霧法施藥方法，所用施藥工具為裝有一個(gè)直徑1mm的錐形噴嘴,壓力45?psi,流量300mL/min的手提便攜式噴霧器，簡(jiǎn)易適用設(shè)備。

3.轉(zhuǎn)Cry2A基因水稻上對(duì)褐飛虱發(fā)生為害安全的三唑磷接觸濃度為20ppm。