[發明專利]膽木莖皮和葉中總生物堿的提取方法

無效

• 申請號: 201210027344.2
• 申請日: 2012-02-08
• 公開（公告）號: CN102526277A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 蒲含林;李秀峰;賴潛;李爭光
• 申請（專利權）人: 海南制藥廠有限公司
• 主分類號: A61K36/74
• 分類號: A61K36/74;A61P11/00;A61P11/04;A61P27/02;A61K127/00;A61K135/00
• 代理公司: 海口翔翔專利事務有限公司 46001
• 代理人: 李勇;劉清蓮

1.膽木莖皮和葉中總生物堿的提取方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）用醇的酸性水溶液滲濾提取

?將膽木莖皮和葉粉碎成粗粉后，用醇的酸性水溶液浸泡提取，其中醇的質量百分比濃度35~75%，酸性水溶液的質量百分比濃度1～3%，第一遍滲濾液直接濃縮，第二遍以后的滲濾液視浸出物濃度反復使用于新的藥材粉，循環浸泡提取至膽木莖皮和葉粉中的生物堿浸提取干凈為止，采用薄層層析法以異長春花苷內酰胺在365nm紫外光燈下的顯色斑點為標準；

（2）總生物堿濃縮液制備

?于50~60℃真空減壓回收醇至水溶液無醇味后，加堿水中和至pH6.5~7.0，繼續濃縮至密度1.16~1.17，4℃放置過夜，過濾得到總生物堿濃縮液；

（3）總生物堿干粉或干浸膏的制備

?將（1）中得到的提取液回收醇至水溶液無醇味后，加堿水中和至pH6.5~7.0，繼續濃縮至密度1.16~1.17噴霧干燥或真空濃縮后再真空干燥得到總生物堿干粉或干浸膏；

（4）總生物堿含量的測定

?精密稱取異長春花苷內酰胺1.00mg置100ml量瓶中加甲醇溶解后稀釋至刻度，精密量取0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml用甲醇分別稀釋到2ml,?用紫外可見分光光度計測定206nm處的吸光度值，制作標準曲線；取上述總生物堿濃縮液1ml加入100ml容量瓶中，用甲醇稀釋到刻度，取總生物堿干粉或浸膏0.2g于100ml容量瓶中用甲醇溶解稀釋至刻度，測定該甲醇液在206nm處的吸光度值，將該吸光度值與標準曲線對照即可確定濃縮液、干粉或浸膏中總生物堿的含量。

2.根據權利要求1所述的膽木莖皮和葉中生物堿的提取方法，其特征在于：所述步驟（1）中膽木莖皮和葉粉是30～60目的膽木莖皮粉。

3.根據權利要求1所述的膽木莖皮和葉中生物堿的提取方法，其特征在于：所述步驟（1）中醇的酸性水溶液，其中醇是甲醇或乙醇；其中的酸是鹽酸、醋酸或硫酸。

4.根據權利要求1所述的膽木莖皮和葉中生物堿的提取方法，其特征在于：所述步驟（2）中提取液的濃縮采用真空減壓濃縮的方法，濃縮時的溫度范圍為50~60℃；用于中和酸的堿水是濃氨水、氫氧化鈉或氫氧化。

5.根據權利要求1所述的膽木莖皮和葉中生物堿的提取方法，其特征在于：所述步驟（3）中濃縮液應減壓濃縮至濃縮液的密度為1.16~1.17，真空干燥的溫度為50~60℃。

6.根據權利要求1所述的膽木莖皮和葉中生物堿的提取方法，其特征在于：所述膽木濃縮液、膽木總堿干粉中總生物堿的含量測定采用異長春花苷內酰胺為標準品做標準曲線作為對照。

7.根據權利要求1所述的膽木莖皮和葉中生物堿的提取方法，其特征在于：所述步驟（1）中所用的薄層層析條件為，用GF₂₅₄熒光硅膠或硅膠G為載體，制備薄層層析板，以氯仿：甲醇：乙酸乙酯等于9：1：3為展開劑，在365nm紫外光燈下顯色觀察。

8.根據權利要求1所述的膽木莖皮和葉中生物堿的提取方法，其特征在于：所述總生物堿含量測定中所用的紫外吸收波長范圍是203~210nm。