[發明專利]一種多噬伯克霍爾德氏菌及其在促進松樹生長中的應用

有效

• 申請號: 201210026711.7
• 申請日: 2012-02-07
• 公開（公告）號: CN102604860A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發明（設計）人: 吳小芹;侯亮;葉建仁;李冠喜
• 申請（專利權）人: 南京林業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C05F11/08;A01N63/00;A01P21/00;A01P3/00;C12R1/01
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 邱興天

技術領域

本發明屬于微生物技術領域，具體涉及一種松樹根際高效解磷細菌多噬伯克霍爾德氏菌及其在促進松樹生長中的應用。

背景技術

磷素是植物營養三大要素之一，是植物體內核酸及多種酶、輔酶等的重要組成成分，同時又以多種方式參與植物體內的各種生理生化過程，對促進植物的生長發育和新陳代謝起著重要作用，缺磷會導致植物生長發育停滯，根系發育不良，植物矮小，生物量嚴重下降。因此，磷元素是植物必不可缺的營養元素。

土壤中含有大量儲備磷，可分為無機態磷和有機態磷，但主要以非溶態存在。土壤中的磷主要通過吸附、沉淀、生物固持三種方式固定，土壤中95％以上的磷素與土壤中Ca²⁺、Fe²⁺、Fe³⁺、Al³⁺等金屬離子結合而喪失其有效性。施入土壤中的磷肥大部分會發生專性吸附和化學沉淀被固定，以植物難以吸收利用的難溶性的磷酸鹽形式在土壤中積累起來，利用率很低；而且大量施用磷肥既耗竭有限的磷礦資源又加劇環境的富營養化。因此，通過生物技術途徑來解決這一問題越來越受到人們的重視。

解磷細菌(Phosphobacteria)是土壤磷循環中的主要微生物類群，其對改善植物磷素吸收和生長具有重要作用。解磷細菌能夠促進植物對各種營養元素的吸收，促進植株根系的生長，提高植物對磷的利用率，改善植物的營養條件，提高植株的產量，增加植株抗病能力，另外還可以改善土壤結構，提高有機質含量，改良鹽堿地對培育和充分發揮土壤生態肥力、保持農林業生態環境的平衡等均具有極其重要的作用。

松樹分布很廣，是我國山地、荒漠造林、溝壑治理，庭園綠化的主要造林樹種之一，具有巨大的生態和經濟價值。但松樹一般種植在貧瘠的土壤中，人工育苗成活率不高，生長緩慢，生物量低。其中，磷素供應不足是突出而具普遍性的問題，造成了我國大部分地區的松樹生長不良，抗逆性下降。松樹根際高效解磷細菌能夠提高土壤中難溶性磷的植物有效性和磷肥利用率，改善松樹人工林生產中的磷素供應不足的矛盾、促進松樹的生長發育。目前，有關松樹根際高效解磷細菌的篩選及應用研究鮮見報道。

發明內容

發明目的：針對現有技術中存在的不足，本發明的目的是提供一種用于松樹根際高效溶解難溶性無機磷及有機磷的多噬伯克霍爾德氏菌。本發明的另一目的是提供上述多噬伯克霍爾德氏菌在促進松樹生長中用途。

技術方案：為了實現上述發明目的，本發明采用的技術方案為：

一種多噬伯克霍爾德氏菌，其分類命名為多噬伯克霍爾德氏菌(Burkholderia?multivorans)WS-FJ9，已保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號是CCTCCNO：M2011435，保藏日期：2011年12月1日。

上述多噬伯克霍爾德氏菌WS-FJ9的基因型為基因型II。

多噬伯克霍爾德氏菌WS-FJ9，從福建省沙縣官莊林場28年生濕地松純林根際土壤中篩選獲得，主要生物學特征包括：在牛肉膏蛋白胨培養基平板上，菌落較小，顏色黃白，圓形、邊緣整齊；菌體短桿狀，革蘭氏染色陰性，無芽孢，好氧，氧化酶反應陰性，接觸酶試驗陽性，淀粉水解試驗陰性，M.R.試驗陰性，V.P.試驗陽性，明膠水解試驗陰性，硝酸還原試驗陽性，產氨試驗陽性，硫化氫試驗陰性，檸檬酸鹽生長試驗陽性。

采用接種洋蔥、煙草(用于判斷菌株對植物的致病性)以及接種苜蓿(用于判斷菌株對動物的致病性)等方法對屬于Bcc基因型II的多噬伯克霍爾德氏菌(Burkholderia?multivorans)WS-FJ9菌株進行安全性測定，結果表明該菌株對洋蔥和苜蓿沒有致病性，對煙草有微弱毒性，但無致病性。

WS-FJ9菌株的16SrDNA基因序列，見氨基酸或核苷酸序列表1。將所測16SrDNA序列與GenBank數據庫中的序列進行BLAST比對。結果表明，WS-FJ9菌株與伯克霍爾德氏菌屬(Burkholderia)同源性都很高，其中與Burkholderia?multivorans的相似度為98％。通過利用Biolog系統自動分析鑒定，與Burkholderia?multivorans的Biolog相似性PROB?99％，相似值SIM0.551，結合形態、生理生化特征及16SrDNA序列分析，鑒定為多噬伯克霍爾德氏菌(Burkholderia?multivorans)。

上述多噬伯克霍爾德氏菌WS-FJ9在促進松樹生長中的應用。

上述的多噬伯克霍爾德氏菌WS-FJ9在解磷中的應用。