[發(fā)明專利]C-反應(yīng)蛋白檢測試紙條

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210019219.7
• 申請日: 2012-01-18
• 公開（公告）號: CN103217532A
• 公開（公告）日: 2013-07-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 范飛舟;尹星;陳智周;張昊巖
• 申請（專利權(quán)）人: 北京永瀚星港生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京銀龍知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11243
• 代理人: 鐘晶;於毓楨

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種C-反應(yīng)蛋白檢測試紙條。

背景技術(shù)

C-反應(yīng)蛋白(C-reactive?protein，CRP)是在感染和組織損傷時血漿濃度快速、急劇升高的主要的急性期蛋白。CRP可以激活補(bǔ)體和加強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬而起調(diào)理作用，從而清除入侵機(jī)體的病原微生物和損傷，壞死，凋亡的組織細(xì)胞，在機(jī)體的天然免疫過程中發(fā)揮重要的保護(hù)作用。關(guān)于CRP的研究已經(jīng)有70多年的歷史，傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為CRP是一種非特異的炎癥標(biāo)志物，但近十年的研究揭示了CRP直接參與了炎癥與動脈粥樣硬化等心血管疾病，并且是心血管疾病最強(qiáng)有力的預(yù)示因子與危險(xiǎn)因子。

目前，CRP檢測采用膠體金法進(jìn)行，一般用于細(xì)菌或病毒感染的診斷。CRP膠體金法中，使用一對單克隆抗體，其中一株單克隆抗體用膠體金進(jìn)行標(biāo)記，另一株單克隆抗體包被在硝酸纖維膜上，加入血清后，血清中的CRP與膠體金標(biāo)記的抗體結(jié)合并沿硝酸纖維膜上爬，在遇到硝酸纖維膜上包被的另一株抗體后會在此顯出膠體金的紅色。

CRP檢測作為心腦血管疾病預(yù)報(bào)是十分重要的。2003年美國疾病預(yù)防控制中心(CDC)和美國心臟協(xié)會AHA已經(jīng)發(fā)布文件，對hs-CRP進(jìn)行分級標(biāo)準(zhǔn)為：hs-CRP＜1mg/L(低度危險(xiǎn))，hs-CRP為1-3mg/L(中度危險(xiǎn))，hs-CRP＞3mg/L(高度危險(xiǎn))。然而，由于CRP膠體金法試劑的靈敏度低，達(dá)不到進(jìn)行心血管疾病篩查的目的。如果靈敏度較低，對于hs-CRP為1-3mg/L的部分人群，其檢測結(jié)果可能存在偏差。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種快速測定血清中hs-CRP水平的膠體金法C-反應(yīng)蛋白檢測試紙條。

本發(fā)明所提供的C-反應(yīng)蛋白檢測試紙條，包括底板7以及貼附在底板7上的樣品區(qū)6、金標(biāo)記CRP單克隆抗體I區(qū)、硝酸纖維素膜2和吸水墊1；所述樣品區(qū)6、所述金標(biāo)記CRP單克隆抗體I區(qū)5、所述硝酸纖維素膜2和所述吸水墊1在液體流動方向上順序排列；所述硝酸纖維素膜2上設(shè)有在液體流動方向上順序排列的第一單克隆抗體線9、第二單克隆抗體線8、第三單克隆抗體線4以及質(zhì)控線3；所述第一單克隆抗體線9包含5μg?CRP單克隆抗體II，所述第二單克隆抗體線8包含15μg?CRP單克隆抗體II，所述第三單克隆抗體線4包含5μg?CRP單克隆抗體II；所述CRP單克隆抗體I結(jié)合的抗原表位與所述CRP單克隆抗體II結(jié)合的抗原表位不同。

其中，所述金標(biāo)記CRP單克隆抗體I區(qū)5由吸附有紅色膠體標(biāo)記CRP單克隆抗體I的玻璃纖維制成。

所述第一單克隆抗體線9是將100μg/ml的CRP單克隆抗體II溶液畫到硝酸纖維膜上，然后吹干而制成的。

所述第二單克隆抗體線8和所述第三單克隆抗體線4都是將400μg/ml的CRP單克隆抗體II溶液畫到硝酸纖維膜上，然后吹干而制成。

所述CRP單克隆抗體II溶液為用TBS稀釋液稀釋CRP單克隆抗體II配制而成的，所述TBS稀釋液包含10-100mmol/L?Tris，100-500mmol/L?NaCl，1-30mmol/L?KCl，1-10％(體積百分含量)甘油，0.01-3％(體積百分含量)異丙醇。

本發(fā)明的C-反應(yīng)蛋白檢測試紙條在診斷迅速的同時可以對人群中CRP的含量＜1mg/L，1-3mg/L或＞3mg/L做出區(qū)分，能夠準(zhǔn)確判斷出高危人群。使用本發(fā)明的C-反應(yīng)蛋白檢測試紙條不需要任何儀器，患者在家中即可完成檢測；僅僅需要1滴血，不超過5分鐘即可完成整個檢測。

附圖說明

圖1表示本發(fā)明的C-反應(yīng)蛋白檢測試紙條的結(jié)構(gòu)示意圖。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

(一)制備CRP單克隆抗體II溶液

用TBS稀釋液稀釋CRP單克隆抗體II(OY?MEDIX?BIOCHEMICA?AB：Anti-hCRP?6404)，分別獲得100μg/ml，400μg/ml，400μg/ml的CRP單克隆抗體II溶液，其中TBS稀釋液包含10mmol/L的Tris，100mmol/L的NaCl，1mmol/L的KCl，1％甘油，0.01％異丙醇；或者TBS稀釋液包含100mmol/L的Tris，500mmol/L的NaCl，30mmol/L的KCl，10％甘油，3％異丙醇。

(二)CRP抗原溶液

用TBS溶液將CRP抗原(Scripps?Laboratories，CO125)配制成濃度10μg/ml的CRP抗原溶液。

(三)制備紅色膠體標(biāo)記抗體I：