[發明專利]甘五酸在制備防治肝炎病毒藥物中的應用

有效

• 申請號: 201210013269.4
• 申請日: 2012-01-17
• 公開（公告）號: CN102552285A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 陳海生;趙平;杜景伶;朱勇喆;金永生;戚中田;錢汐晶
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第二軍醫大學
• 主分類號: A61K31/575
• 分類號: A61K31/575;A61P1/16;A61P31/20;A61P31/14;A23L1/30
• 代理公司: 上海卓陽知識產權代理事務所(普通合伙) 31262
• 代理人: 金重慶

技術領域

本發明涉及一種化合物的用途，具體地說，是甘五酸在制備防治肝炎病毒藥物中的應用。

背景技術

甘五酸的化學結構如下：

。

甘五酸（schizandronic?acid,?ganwuweizic?acid）是華中五味子(?Schisandra?sphenanthera?Rehd.et.?)和北五味子（Schisandra?chinensis）等果實中分離得到的四環三萜類化合物（詳見：都姣嬌，穆淑珍。華中五味子化學成分研究，首都醫藥，2011；18（18）：52-54；Li,?L.?N.?and?Xue,?H.,?Planta?Med.,?1986；52，492－493；王麗薇，周長新，Bernd，等。北五味子化學成分研究，中國現代應用藥學2006；23（5）：363-365）。

中國專利公開號CN1327859C公開了一種五味子提取物和制備方法及其用途，涉及一種含至少50%總木脂素的五味子提取物，其制備方法，以及該提取物在制備治療肝炎、神經衰弱、抗衰老等藥物中的應用。中國專利公開號CN101057887A公開了一種北五味子藤莖或藤莖皮提取物及其制備方法，以及該提取物在制備治療神經衰弱、胃腸炎或潰瘍、肝炎，或抗衰老等藥物中的應用，其特征在于，該提取物至少含30%五味子藤莖總木脂素。但是關于華中五味子和北五味子等果實中分離得到的四環三萜類化合物甘五酸具有抗乙型肝炎和丙型肝炎的病毒作用目前還未見報道。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術中的不足，提供甘五酸在制備防治肝炎病毒藥物中的應用。

本發明的再一的目的是，提供甘五酸在制備保肝的食品和保健品中的應用。

為實現上述目的，本發明采取的技術方案是：甘五酸在制備防治肝炎病毒藥物中的應用，所述的甘五酸為四環三萜類化合物，化學結構式如下：

。

所述的甘五酸在制備抗乙型肝炎病毒藥物中的應用。

所述的甘五酸在制備抗丙型肝炎病毒藥物中的應用。

為實現上述第二個目的，本發明采取的技術方案是：甘五酸在制備保肝的食品和保健品中的應用。

本發明優點在于：

本發明為四環三萜類化合物甘五酸提供一種制備抗乙型肝炎病毒（HBV）和丙型肝炎病毒（HCV）藥物的用途，試驗結果發現，該化合物具有顯著的抗HBV和抗HCV活性，尤其能抑制HCV入侵靶細胞，可用于制備抗乙肝病毒和抗丙肝病毒的藥物。本發明為尋找抗乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒藥物提供了新的來源。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明提供的具體實施方式作詳細說明。

實施例1??甘五酸抗乙肝病毒試驗：

一、實驗藥物、試劑及材料

1.?化合物：甘五酸。

2.?立可讀HBsAg診斷試劑盒（上?？迫A生物技術有限公司）。

3.?立可讀HBeAg診斷試劑盒（上?？迫A生物技術有限公司）。

4.?細胞培養液，配制，其含10%胎牛血清，0.03%谷氨酰胺，G418?390μg/ml，卡那霉素50U/ml，調pH至7.2。

5.?細胞消化液，配制，其含0.25%胰蛋白酶，用磷酸緩沖液配制。

6.?細胞系HepG?2.2.15，為?HBV-DNA克隆轉染人肝癌細胞的2.2.15細胞系。

二、實驗方法：按試劑盒的說明書操作

取處于對數生長期的HepG?2.2.15細胞，調整細胞濃度為2×10⁵個/ml，取100μl種96孔板；藥物不同濃度稀釋培養24小時后加藥，8天后取上清測表面抗原（HBsAg）和核心抗原（HBeAg）。

（1）每孔加入待測標本50μl，設陰、陽性對照各2孔，每孔加入陰性對照（或陽性對照）各一滴，并設空白對照一孔；

（2）每孔加入酶結合物1滴（空白對照孔除外），充分混勻，封板，置37?C孵育30分鐘；

（3）棄去孔內液體，洗滌液注滿各孔，靜置5秒，甩干，重復五次后拍干；

（4）每孔加顯色劑A液、B液各1滴，充分混勻，封板，置37?C孵育15分鐘；

（5）每孔加入終止液1滴，混勻；

（6）用酶標儀讀數，取波長450nm，參考波長630nm，讀取各孔讀數。

三、實驗結果

結果見表1、表2。

表1?甘五酸對乙肝核心抗原（HBsAg）抑制活性(%)