[發(fā)明專利]一種對日本血吸蟲病肝纖維化具有治療作用的DNA疫苗及其應(yīng)用無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210011317.6 | 申請日： | 2012-01-13 |
| 公開（公告）號： | CN102526761A | 公開（公告）日： | 2012-07-04 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 汪世平;田智;周云飛;何卓;尹鐵球;張樹菊;馮其梅 | 申請（專利權(quán)）人： | 中南大學(xué) |
| 主分類號： | A61K48/00 | 分類號： | A61K48/00;A61K39/395;A61P33/12;C12N15/62;C12N15/79;A61K38/21 |
| 代理公司： | 長沙市融智專利事務(wù)所 43114 | 代理人： | 袁靖 |
| 地址： | 410083 湖南*** | 國省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 日本 血吸蟲病 纖維化 具有 治療 作用 dna 疫苗 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種對日本血吸蟲病肝纖維化具有治療作用的DNA疫苗，其特征在于，以具有免疫靶向和抗血吸蟲卵胚作用的單鏈抗體scFv與細(xì)胞因子IL-18DNA融合，轉(zhuǎn)入真核表達(dá)載體構(gòu)成，所述的具有免疫靶向和抗血吸蟲卵胚作用的單鏈抗體的核苷酸序列為SEQ?ID?NO：1。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的DNA疫苗，其特征在于：所述的DNA疫苗制備如下：以具有免疫靶向和抗血吸蟲卵胚作用的單鏈抗體scFv和細(xì)胞因子IL-18DNA為模板，同時根據(jù)兩個模板和兩個模板之間45bp的鏈接片段glycine-rich?linker[(Gly4Ser)3]設(shè)計(jì)特異性引物，經(jīng)PCR擴(kuò)增分別得到scFv+linker和lingker+IL-18DNA，隨后經(jīng)重疊PCR擴(kuò)增得到scFv和IL-18融合DNA:scFv-IL18；將其轉(zhuǎn)入真核表達(dá)載體pVAX1即得。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的DNA疫苗，其特征在于：
擴(kuò)增scFv+linker的引物序列為：
SEQ?ID?NO：2：
P1：5’-CGGAATTCAGCATGGCCCAGGTGCAGC-3’
SEQ?ID?NO：3：
P2：5′-CCGTTTGATTTCCA-3′；
擴(kuò)增lingker+IL-18的引物序列為：
SEQ?ID?NO：4：
P3：5′-ATGGCTGCFGAACCAGTAG-3
SEQ?ID?NO：5：
P4：5′-CCGCTCGAGTTAATAGCTAGTCTTCGCTTTG-3′。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的DNA疫苗，其特征在于：所述的DNA疫苗中的scFv和IL-18融合DNA:scFv-IL18的核苷酸序列為SEQ?ID?NO：6。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的DNA疫苗，其特征在于：所述的DNA疫苗中的scFv和IL-18融合DNA:scFv-IL18的氨基酸序列為SEQ?ID?NO：7。
6.權(quán)利要求1-5任意一項(xiàng)所述的DNA疫苗的應(yīng)用方法，其特征在于，用于制備治療日本血吸蟲病肝纖維化藥物。
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