[發明專利]嗜水氣單胞菌適體及其篩選方法與應用有效
| 申請號: | 201210001777.0 | 申請日: | 2012-01-05 |
| 公開(公告)號: | CN102643821A | 公開(公告)日: | 2012-08-22 |
| 發明(設計)人: | 李元躍;王雷;段博文;陳融斌;黎中寶 | 申請(專利權)人: | 集美大學 |
| 主分類號: | C12N15/115 | 分類號: | C12N15/115;C12N15/10;C12Q1/68;C12R1/01 |
| 代理公司: | 廈門市誠得知識產權代理事務所 35209 | 代理人: | 方惠春 |
| 地址: | 361000 福*** | 國省代碼: | 福建;35 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 水氣 單胞菌適體 及其 篩選 方法 應用 | ||
1.嗜水氣單胞菌適體,其特征在于,其序列如序列表中1-22號所示。
2.如權利要求1所述嗜水氣單胞菌適體的篩選方法,其特征在于,所述篩選方法采用SELEX?篩選,所述SELEX?篩選的步驟包括:
1)構建并合成待篩選的嗜水氣單胞菌適體ssDNA文庫,并設計合成相應的引物;
2)取適量所述ssDNA文庫與嗜水氣單胞菌進行結合;
3)分離獲得與嗜水氣單胞菌結合的ssDNA,以該ssDNA為模板進行PCT擴增,擴增產物再次進行SELEX?篩選直至獲得如權利要求1所述的適體。
3.如權利要求2所述嗜水氣單胞菌適體的篩選方法,其特征在于在步驟1)中,所述ssDNA文庫為::5′-GGG?AGC?TCA?GAA?TAA?ACG?CTC?AA-N35-TT?CGA?CAT?GAG?GCC?CGG?ATC-3′。
4.如權利要求2所述嗜水氣單胞菌適體的篩選方法,其特征在于在步驟1)中,所述引物為:
引物Ⅰ:5′-GGG?AGC?TCA?GAA?TAA?ACG?CTC?AA-3′;
引物Ⅱ:5′-GAT?CCG?GGC?CTC?ATG?TCG?AA-3′;
引物Ⅲ:5′-地高辛-GGG?AGC?TCA?GAA?TAA?ACG?CTC?AA-3′;
引物Ⅳ:5′-生物素-GAT?CCG?GGC?CTC?ATG?TCG?AA-3′。
5.如權利要求2所述嗜水氣單胞菌適體的篩選方法,其特征在于在步驟3)中,所述SELEX?篩選共進行12輪。
6.如權利要求1所述嗜水氣單胞菌適體在檢測述嗜水氣單胞菌中的應用。
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