[發(fā)明專利]通過蛋白質(zhì)生物質(zhì)發(fā)酵的重組微生物的生物燃料和化學(xué)生產(chǎn)

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201180063915.1
• 申請(qǐng)日: 2011-11-03
• 公開（公告）號(hào): CN103314101A
• 公開（公告）日: 2013-09-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: J·C·廖;趙光命;閆亞軍;霍毅欣
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 加利福尼亞大學(xué)董事會(huì)
• 主分類號(hào): C12N1/21
• 分類號(hào): C12N1/21;C12N1/19;C12N1/15;C12N15/63;C12N15/52;C12P7/00;C12P13/00
• 代理公司: 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 31100
• 代理人: 余穎

1.一種重組微生物，其特性在于相較野生型生物體有增加的酮酸流，并且包含至少一個(gè)編碼酶的多核苷酸，相較野生型生物體在表達(dá)時(shí)引起更高量的化學(xué)產(chǎn)物生成。

2.如權(quán)利要求1所述的重組微生物，其特征在于，所述微生物包含編碼脫氫酶、轉(zhuǎn)氨酶、和/或脫氨酶的異源多核苷酸。

3.如權(quán)利要求2所述的重組微生物，其特征在于，所述脫氫酶選自谷氨酸鹽脫氫酶(E.C.1.4.1.2和E.C.1.4.1.4)、谷氨酸脫氫酶(E.C.1.4.1.3)、纈氨酸脫氫酶(E.C.1.4.1.8)、亮氨酸脫氫酶(E.C.1.4.1.9)和苯丙氨酸脫氫酶(E.C.1.4.1.20)。

4.如權(quán)利要求3所述的重組微生物，其特征在于，所述亮氨酸脫氫酶是LeuDH。

5.如權(quán)利要求4所述的重組微生物，其特征在于，所述亮氨酸脫氫酶LeuDH來自中間型嗜熱放線菌。

6.如權(quán)利要求2所述的重組微生物，其特征在于，所述脫氨酶選自下組：天冬氨酸解氨酶(4.3.1.1)、L-絲氨酸解氨酶(E.C.4.3.1.17)、D-絲氨酸解氨酶(4.3.1.18)、蘇氨酸解氨酶(E.C.4.3.1.19)、酪氨酸解氨酶(E.C.4.3.1.23)、苯丙氨酸解氨酶(E.C.4.3.1.24)、和苯丙氨酸/酪氨酸解氨酶(E.C.4.3.1.25)。

7.如權(quán)利要求6所述的重組微生物，其特征在于，所述脫氨酶是絲氨酸脫氨酶SdaB。

8.如權(quán)利要求7所述的重組微生物，其特征在于，所述絲氨酸脫氨酶SdaB來自大腸桿菌、玫瑰桿菌、白喉棒狀桿菌、腸道沙門氏菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌、或鼻疽伯克霍爾德氏菌。

9.如權(quán)利要求2所述的重組微生物，其特征在于，所述轉(zhuǎn)氨酶是L-α-轉(zhuǎn)氨酶(E.C.2.6.1.X，其中X是任意數(shù)字)。

10.如權(quán)利要求9所述的重組微生物，其特征在于，所述L-α-轉(zhuǎn)氨酶選自L-天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(E.C.2.6.1.1)、L-丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(E.C.2.6.1.12和E.C.2.6.1.47)、L-天冬酰胺轉(zhuǎn)氨酶(E.C.2.6.1.14)、和甘氨酸轉(zhuǎn)氨酶(E.C.2.6.1.35)。

11.如權(quán)利要求10所述的重組微生物，其特征在于，所述L-天冬酰胺轉(zhuǎn)氨酶是AvtA。

12.如權(quán)利要求11所述的重組微生物，其特征在于，所述AvtA來自大腸桿菌、腦膜炎奈瑟球菌、菠蘿泛菌、地中海擬無枝菌酸菌、曼海姆產(chǎn)琥珀酸菌、腸道沙門菌、或鼠疫耶爾森菌。

13.如權(quán)利要求2-12中任一項(xiàng)所述的重組微生物，其特征在于，所述微生物的特征還在于是與野生型生物體相比時(shí)降低的氨再攝取活性、降低的2型自誘導(dǎo)物再攝取活性、降低的谷氨酸脫氫酶活性、降低的谷氨酰胺合成酶活性、降低的谷氨酸合成酶活性、降低的群體感應(yīng)基因活性、和/或降低的整體調(diào)節(jié)劑活性。

14.如權(quán)利要求13所述的重組微生物，其特征在于，所述降低的群體感應(yīng)活性來自基因luxS或lsrA表達(dá)或功能的缺失或降低。

15.如權(quán)利要求13所述的重組微生物，其特征在于，所述降低的氨再攝取活性來自基因gdhA或glnA表達(dá)或功能的缺失或降低。

16.如權(quán)利要求13所述的重組微生物，其特征在于，所述降低的整體調(diào)節(jié)劑活性來自基因CRP、LRP、Fis和/或IHF表達(dá)或功能的缺失或降低。