[發明專利]篩選與皮膚老化有關的基因和防止皮膚老化的材料的方法

有效

• 申請號: 201180056031.3
• 申請日: 2011-11-25
• 公開（公告）號: CN103249842A
• 公開（公告）日: 2013-08-14
• 發明（設計）人: 孫義東;李真锳;羅勇柱;金惠暻;金知賢;安秀美;金漢坤;鄭振鎬;樸致炫;徐銀英;李玟政;吳仁憬;尹鉉善
• 申請（專利權）人: 株式會社愛茉莉太平洋;首爾大學校產學協力團
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/12
• 代理公司: 北京潤平知識產權代理有限公司 11283
• 代理人: 王崇;劉國平

技術領域

本發明涉及篩選表現出與皮膚老化有關的特性變化的基因的方法以及通過控制這些基因的表達篩選防止皮膚老化的物質的方法。

背景技術

到目前為止，主要在皮膚真皮層（dermal?layer）的變化方面進行了關于皮膚老化的研究，且主要集中于調節膠原蛋白和膠原酶MMP（基質金屬蛋白酶，matrix?metalloproteinase）的生物合成。而且，抗老化化妝品中的唯一活性成分是視黃醇，眾所周知，該活性成分能夠有效地促進膠原蛋白的生物合成。

然而，通過簡單的促進膠原蛋白合成不能充分實現皮膚老化的預防，而且，皮膚老化的癥狀和相關因素隨著導致老化的原因不同而不同。因此，為了下一代功能性化妝品的發展，需要研究全面考慮了各種不同因素的新方法。另外，必需通過綜合分析與皮膚老化有關的特性基因的變化以確定引起皮膚老化的原因和理解皮膚老化的機理，從而開發預防和治療皮膚老化的技術，控制與皮膚老化有關的靶基因的表達。

發明內容

技術問題

相應地，為獲得與防止老化有關的新的靶基因，本發明的發明人利用基因芯片，通過全面篩選顯示出與皮膚老化有關的特性變化的基因而進行了大量的嘗試。

因此，本發明的目的是提供新的與防止老化有關的靶基因。

本發明的另一個目的是提供篩選新物質的方法，所述物質通過控制以上基因的表達而表現出抑制皮膚老化和治療皮膚疾病的效果。

技術方案

為了實現上述目的，本發明提供了一種篩選與皮膚老化有關的基因的方法，該方法包括以下步驟：1）從皮膚組織中提取總RNA，并將提取到的RNA進行微陣列分析；2）利用生物信息學技術（bioinformatics?technique）分析隨老化而改變的基因；3）選擇與皮膚老化有關的候選基因；以及4）通過逆轉錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR）確認所述候選基因。

本發明還提供了一種用于篩選防止皮膚老化的物質的方法，該方法包括以下步驟：1）用控制細胞內基因表達的候選物質處理皮膚細胞樣品；2）將皮膚細胞樣品暴露于具有皮膚老化因子的環境中，以誘導細胞內基因的表達；以及3）測試步驟2）中皮膚老化因子誘導的細胞內基因的表達。

有益效果

根據本發明的篩選方法，可以根據引起皮膚老化的不同原因而篩選與皮膚老化有關的基因。此外，不僅可以研究與UV輻射引起的光老化有關的基因，而且還可以研究引起與更年期相關的自然老化（intrinsic?aging）的基因，而且根據靶基因的不同，可以開發差異化產品（differentiated?products）。因此，可以從根本上防止皮膚老化。

附圖說明

圖1顯示了對年輕人和老年人的皮膚中甘丙肽前體肽源（galanin?prepropeptide）進行的微陣列分析和定量RT-PCR的結果。

圖2和3顯示了通過siRNA方法抑制甘丙肽前體肽源的表達，然后測試抗老化標記（MMP）和炎癥因子的表達中UV誘導的變化，以分析甘丙肽前體肽源的功能而獲得的結果。

圖4顯示了甘丙肽前體肽源和膠原蛋白的表達之間的關系，應用與圖2和3所示的相似方法，通過抑制甘丙肽前體肽源的表達而確定的該關系。

圖5顯示了對年輕人和老年人的皮膚中骨甘氨酸（osteoglycin）進行的微陣列分析和定量RT-PCR的結果。

圖6顯示了甘丙肽前體肽源和膠原蛋白的表達之間的關系，通過抑制骨甘氨酸的表達而確定的該關系。

圖7顯示了16個脂溢性角化病中表達增強的基因。

具體實施方式

盡管皮膚老化是由不同因素引起的，但是將著重從以下方面對本發明進行描述。

1、由于時間推移而引起的自然老化

2、由激素引起的更年期老化

3、脂溢性角化病

本發明提供了一種篩選與皮膚老化有關的基因的方法，該方法包括以下步驟：1）從皮膚組織中提取總RNA，并將提取到的RNA進行微陣列（microarray）分析；2）利用生物信息學技術分析隨老化而改變的基因；3）選擇與皮膚老化有關的候選基因；以及4）通過逆轉錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR）確認所述候選基因。

參與或者不參與皮膚老化的基因、男性或女性中表達增強或減弱的基因，隨引起皮膚老化的原因不同而不同，而且表達改變的基因可被確定為與皮膚老化有關的基因。因此，可以挑選這些基因作為與皮膚老化有關的候選基因。