[發明專利]用于遞送治療性肽的組合物和方法

無效

• 申請號: 201180035686.2
• 申請日: 2011-05-19
• 公開（公告）號: CN103221420A
• 公開（公告）日: 2013-07-24
• 發明（設計）人: T.R.克萊恩漢默;R.L.格蘭特;G.L.科林;E.杜爾馬斯;M.P.丁科;C.A.沃倫
• 申請（專利權）人: 北卡羅萊納州立大學;弗吉尼亞大學專利基金會
• 主分類號: C07K14/195
• 分類號: C07K14/195;C07K14/315;C07K14/335;C12N1/06;A23C9/00;A23L1/03;A61K35/74;C07K14/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 孔青;林森

發明領域

本發明涉及用于定向遞送生物治療劑的方法和組合物。

聯邦政府資助的研究或開發

本發明在NIH-MARCE授予的U54?AI57168和NIH授予的U01?AI075526的美國政府支持下完成。美國政府在本發明中享有一定權利。

電子提交的序列表的引用

序列表的正式副本作為ASCII格式的序列表以電子形式通過EFS-Web提交，文件名為405777SEQLIST.txt，創建于2011年5月19日，大小為15?KB，并且與本說明書同時提交。該ASCII格式文件所包括的序列表是本說明書的組成部分，并且通過引用以其整體結合到本文中。

發明背景

各種發酵食品和乳制品中的乳酸菌(LAB)被人安全地消費。這些LAB中的許多擁有“公認安全的”?(Generally?Recognized?as?Safe,?GRAS)的地位，并且可在無不良作用的情況下，以接近1萬億個細胞/克食品的水平消費。所選擇的LAB成員是耐酸的，但卻又是膽汁敏感性的，并且通過胃腸道時不能存活。因此，所選LAB的膽汁暴露可導致細胞完整性的破壞、透化和胞內蛋白質的釋放。這類微生物可經口通過胃遞送到小腸，用于在微生物因膽汁引起透化時，定向遞送生物治療性肽。另外，微生物在膽汁透化時死亡，因此在經口遞送后，保持包含在胃腸道內。

嗜熱鏈球菌(Streptococcus?thermophilus)是一種草綠色群(viridans?group)的革蘭氏陽性乳酸菌。嗜熱鏈球菌通常存在于包括酸奶、發酵乳和乳酪在內的發酵乳制品中。包含嗜熱鏈球菌的市售乳制品可用作抗生素相關腹瀉的療法(Hickson，2007，335(7610):80)。

艱難梭菌(Clostridium?difficile,?C.?difficile)是醫院細菌性腹瀉最常見的原因，占抗生素相關腹瀉病例的10-20%。艱難梭菌感染可導致無癥狀攜帶、輕度腹瀉或暴發性假膜性結腸炎。這種厭氧細菌主要通過兩種大的外毒素即毒素A和毒素B的作用引起腸損害。當體內引入腸腔時，經純化的毒素A?(TxA)引起腸分泌、腸上皮破壞和出血性結腸炎。TxA誘導性腸炎的機制涉及毒素與腸細胞受體結合，導致引起腸分泌和腸蠕動增強的感覺神經和腸神經活化、肥大細胞脫粒和粘膜被嗜中性粒細胞浸潤。除其促炎和促分泌活性以外，TxA誘導細胞凋亡和非凋亡性細胞死亡，這可造成腸粘膜破壞。具體地講，已經表明，TxA影響腸粘膜修復過程的重要方面，例如上皮細胞遷移、細胞凋亡和經上皮抗性的發展(Brito等(2005)?Dig?Dis?and?Sci?50(7):?1271-1278)。

谷氨酰胺(Gln)是腸細胞和結腸細胞兩者的主要燃料，并且是在正常和應激兩種狀態下維持腸結構所必需的(Cario等，Eur?J?Clin?Invest.?2000年5月30(5):419429)。研究顯示，谷氨酰胺補充(supplementation)防止絨毛萎縮和細菌移位(bacterial?translocation)?(與標準胃腸外營養有關的病況)?(Van?Der?Hulst等，Lancet?1993?341:1363)。谷氨酰胺在若干代謝途徑中起關鍵作用。已認識到其在組織培養中的重要性，而且它是哺乳動物細胞中核苷酸、氨基糖和氨基酸生物合成的關鍵氮供體。預期當粘膜屏障功能常被破壞時，谷氨酰胺的可用性在持續性腹瀉和營養不良期間將尤其重要。動物研究表明，富含谷氨酰胺的營養可減弱細菌移位、改善營養狀況、減少腸損傷，并在甲氨蝶呤誘發性小腸結腸炎致死模型中導致存活得到改善。

丙氨酰-谷氨酰胺(Ala-Gln)是穩定的谷氨酰胺衍生物，已經表明其在酸性水溶液中穩定得多(例如預期它們可面對患者的胃或腸)，并促使鹽和水的吸收相當于葡萄糖(如果不是更好的話)的吸收(參見美國專利號5,561,111，其公開內容明確結合到本文中)。穩定的谷氨酰胺衍生物不僅僅可用于患腹瀉的營養不良兒童，而且還可用于接受胃腸外(IV)流體或管喂食太長時間的患者或者因感染或化學療法所致腸粘膜受損的患者。

發明概述