[實(shí)用新型]干細(xì)胞培養(yǎng)灌流裝置

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201120272956.9
• 申請(qǐng)日: 2011-07-29
• 公開（公告）號(hào): CN202124632U
• 公開（公告）日: 2012-01-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉擁軍;李福彬;龐博;郭瑩
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津和澤干細(xì)胞科技有限公司
• 主分類號(hào): C12M3/00
• 分類號(hào): C12M3/00;C12M1/34;C12M1/12
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本實(shí)用新型涉及一種細(xì)胞培養(yǎng)裝置，特別是涉及一種用于胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)的灌流裝置。

背景技術(shù)

20世紀(jì)50年代，科學(xué)家在畸形胎瘤中首次首次發(fā)現(xiàn)了胚胎干細(xì)(embryonic?stemcell，ES細(xì)胞)，從此開創(chuàng)了干細(xì)胞生物學(xué)研究的歷程。干細(xì)胞的研究與應(yīng)用幾乎涉及所有生命科學(xué)和生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，是當(dāng)今生命科學(xué)領(lǐng)域的熱點(diǎn)和重點(diǎn)。干細(xì)胞能自我更新和多向分化的生物學(xué)特性使得干細(xì)胞研究在動(dòng)物克隆、新型高效藥物的開發(fā)和腫瘤臨床治療等方面有著廣泛的應(yīng)用前景。?

在胚胎干細(xì)胞體外培養(yǎng)中，除了正常的培養(yǎng)基外，需要先培養(yǎng)一層特殊的細(xì)胞(如小鼠胚胎成纖維-mouse?embryonic?fibroblast?MEF細(xì)胞等)，然后再在其上接種要實(shí)驗(yàn)的干細(xì)胞。這些特殊的細(xì)胞就是飼養(yǎng)層細(xì)胞，通常是成纖維類細(xì)胞，這些細(xì)胞可以分泌一些未知的必須生長(zhǎng)因子如白血病抑制因子(leukemia?inhibitoryfactor，LIF)、干細(xì)胞因子(stem?cell?factor，SCF)和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic?Fibroblast?growth?factor，bFGF)等，提供胚胎干細(xì)胞、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞更好的營(yíng)養(yǎng)。這些因子對(duì)干細(xì)胞的存活和增殖是必需的，不僅可以使其數(shù)量增加，而且與干細(xì)胞在體內(nèi)外的分化有關(guān)。實(shí)驗(yàn)證明，飼養(yǎng)層細(xì)胞的作用不僅僅是產(chǎn)生了一些細(xì)胞因子，在大多數(shù)細(xì)胞發(fā)育和分化過(guò)程中，細(xì)胞的黏附作用都發(fā)揮了相當(dāng)重要的作用。ES細(xì)胞不能作為完全獨(dú)立的細(xì)胞而生存，總是與周圍的細(xì)胞相聯(lián)系著，在信號(hào)傳導(dǎo)中的黏附受體調(diào)節(jié)著細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)、增殖和分化。?

通常在胚胎干細(xì)胞/誘導(dǎo)多能干細(xì)胞培養(yǎng)體系下，飼養(yǎng)層細(xì)胞與干細(xì)胞處于共培養(yǎng)狀態(tài)，兩者無(wú)法分離徹底。如果采用飼養(yǎng)層與干細(xì)胞分別靜態(tài)培養(yǎng)的方式，無(wú)法實(shí)時(shí)將飼養(yǎng)層細(xì)胞分泌的因子傳送到干細(xì)胞培養(yǎng)體系內(nèi)，且操作過(guò)程多，大多不被采用。傳統(tǒng)共培養(yǎng)方式影響干細(xì)胞純度，已在干細(xì)胞應(yīng)用等方面起到了很大的限制作用。

中國(guó)專利CN201626960U也提出了一種干細(xì)胞培養(yǎng)灌流裝置，但是其存在有一個(gè)嚴(yán)重的缺陷，就是當(dāng)灌流液流經(jīng)待培養(yǎng)細(xì)胞灌流槽時(shí)，會(huì)將待培養(yǎng)細(xì)胞灌流槽內(nèi)的待培養(yǎng)細(xì)胞一起沖走，幾乎不能實(shí)現(xiàn)其發(fā)明目的。同時(shí)，在該專利中設(shè)置了兩個(gè)蠕動(dòng)泵，增加了成本。

實(shí)用新型內(nèi)容

本實(shí)用新型的目的在于提供一種既可滿足干細(xì)胞的獨(dú)立培養(yǎng)環(huán)境，以保證細(xì)胞純度，又避免參雜飼養(yǎng)層細(xì)胞影響的用于干細(xì)胞培養(yǎng)的灌流裝置以解決現(xiàn)有產(chǎn)品中存在的缺陷等問(wèn)題。

本實(shí)用新型的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的，該干細(xì)胞培養(yǎng)灌流裝置，包括灌流瓶、廢液瓶、飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器、待培養(yǎng)細(xì)胞灌流槽和蠕動(dòng)泵，灌流瓶與飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器之間通過(guò)輸入管連接，待培養(yǎng)細(xì)胞灌流槽和廢液瓶之間通過(guò)輸出管連接；蠕動(dòng)泵分別與第一連通管、第二連通管的一端連接，第一連通管的另一端與飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器連接，第二連通管的另一端與待培養(yǎng)細(xì)胞灌流槽連接。

在灌流瓶上還設(shè)置有第一氣體濾頭、pH計(jì)和溫度計(jì)，在廢液瓶上設(shè)置有第二氣體濾頭。

飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器中設(shè)置有第一嵌入式過(guò)濾膜，輸入管與第一連通管的管口均置于第一嵌入式過(guò)濾膜之上；待培養(yǎng)細(xì)胞灌流槽中設(shè)置有第二嵌入式過(guò)濾膜，第二連通管的管口置于第二嵌入式過(guò)濾膜之下，輸出管的管口置于第二嵌入式過(guò)濾膜之上；在飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器底部還設(shè)置有細(xì)胞培養(yǎng)板。?

由于在飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器中設(shè)置了第一嵌入式過(guò)濾膜，該過(guò)濾膜是半透膜，其具體孔徑大小控制在能阻止飼養(yǎng)層細(xì)胞穿過(guò)但能實(shí)現(xiàn)液體通過(guò)；同樣的，在待培養(yǎng)細(xì)胞灌流槽中設(shè)置的第二嵌入式過(guò)濾膜也是半透膜，其具體孔徑大小也是控制在能阻止待培養(yǎng)干細(xì)胞穿過(guò)但能實(shí)現(xiàn)液體通過(guò)。

本實(shí)用新型的有益效果是：將飼養(yǎng)層細(xì)胞和待培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行分開培養(yǎng)，半透膜的使用使得飼養(yǎng)層細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子等都可以隨同培養(yǎng)液一起進(jìn)入待培養(yǎng)細(xì)胞灌流槽中，同時(shí)又可以阻止飼養(yǎng)層細(xì)胞和其它雜細(xì)胞進(jìn)入待培養(yǎng)細(xì)胞灌流槽中，待培養(yǎng)的干細(xì)胞可以全部留在待培養(yǎng)細(xì)胞灌流槽中，不會(huì)隨培養(yǎng)液一起流入廢液瓶，提高了出產(chǎn)率。并且整體操作相對(duì)簡(jiǎn)便，可重復(fù)性強(qiáng)，較傳統(tǒng)模式減少了較多的操作環(huán)節(jié)，降低了污染和飼養(yǎng)層細(xì)胞參雜的機(jī)會(huì)，利于干細(xì)胞生長(zhǎng)，從而，為干細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)提供參考價(jià)值。

附圖說(shuō)明

下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)一步說(shuō)明。

圖1是本實(shí)用新型的結(jié)構(gòu)圖

圖中

1?灌流瓶

2?第一氣體濾頭

3??pH計(jì)

4?輸入管

5?溫度計(jì)

6?飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器