[發明專利]一種DNA分子及重組質粒和大腸桿菌

有效

• 申請號: 201110460217.7
• 申請日: 2011-12-31
• 公開（公告）號: CN102517300A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發明（設計）人: 李巖;宮衛波;王秋巖;王靜波;胡炎華
• 申請（專利權）人: 梅花生物科技集團股份有限公司
• 主分類號: C12N15/31
• 分類號: C12N15/31;C12N15/70;C12N15/66;C12N1/21;C12P13/08;C12R1/19;C12R1/01
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 逯長明

1.一種DNA分子，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO：1所示。

2.一種重組質粒pKR-D，其特征在于，由質粒pKK223-3在其Sma?I和HindIII酶切位點間插入如SEQ?ID?NO：1所示核苷酸序列的DNA分子獲得。

3.一種重組質粒pKTR-D，其特征在于，由以下方法制備：

以重組質粒pKR-D為模板，用核苷酸序列如SEQ?ID?NO：2所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ?ID?NO：3所示的下游引物擴增，BamHI/SphI雙酶切擴增產物，獲得由Tac啟動子、SEQ?ID?NO：1所示核苷酸序列的DNA分子、rrnB?T1?Terminator終止子、rrnB?Terminator終止子組成的片段，然后與經過BamHI/SphI雙酶切的質粒pKK223-3-ThrA’BC連接即得；

其中，所述Tac啟動子、rrnB?T1?Terminator終止子位于片段兩端，SEQ?IDNO：1所示核苷酸序列的DNA分子位于Tac啟動子、rrnB?Terminator終止子之間，rrnB?Terminator終止子位于SEQ?ID?NO：1所示核苷酸序列的DNA分子和rrnB?T1?Terminator終止子之間。

4.一種大腸桿菌，其保藏編號為CGMCC?No：5665，由重組質粒pKR-D轉化大腸桿菌W3110獲得。

5.一種大腸桿菌，其保藏編號為CGMCC?No：5666，由重組質粒pKTR-D轉化大腸桿菌W3110獲得。

6.保藏編號為CGMCC?No：5665的大腸桿菌在L-蘇氨酸發酵中的應用。

7.保藏編號為CGMCC?No：5666的大腸桿菌在L-蘇氨酸發酵中的應用。