[發明專利]一種液體中非蛋白質氮含量的測定方法

無效

• 申請號: 201110460144.1
• 申請日: 2011-12-30
• 公開（公告）號: CN102519901A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發明（設計）人: 孔浩輝
• 申請（專利權）人: 廣東中煙工業有限責任公司
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 逯長明

技術領域

本發明涉及一種氮的分析測定技術領域，尤其涉及一種液體中非蛋白質氮含量的測定方法。

背景技術

蛋白質是生命的物質基礎，由于蛋白質組成及其性質的復雜性，通常用總氮含量表示蛋白質氮的含量。然而總氮中還包含大量非蛋白質氮成分如氨基酸、核糖核酸、生物堿、硝酸鹽、亞硝酸鹽和氨鹽等，給蛋白質氮的測定帶來較大的誤差。例如對液體營養物質進行測定，用上述總氮含量代替蛋白質氮含量的方法會使得到的蛋白質含量高于實際的蛋白質含量，影響對液體營養物質品質的評價，還給了不法分子以可乘之機，以含氮量高的非蛋白質氮冒充蛋白質氮，因此為了對液體的營養價值做出正確地判斷，還需要對其中的非蛋白質氮的含量進行測定，作為判斷液體中蛋白質氮含量的輔助手段。另外，對于水體富營養化的評價，非蛋白質氮含量是其中的評價指標之一，常被用來作為水體受營養物質污染的程度判定的輔助手段，是環境水檢測的主要項目之一。因此，建立一種快速、簡便、準確的測定液體中非蛋白質氮含量的方法有著重要意義。

對于氮含量的測定，研究者們開展了大量的工作。如鄒琳等采用流動注射分析儀測定了水中的總氮和總磷的含量(鄒琳，周圣東，陳衛.高壓消解/流動注射光度法同時測定水中總氮與總磷.中國給水排水，2009，25(22)：93～97.)，其過程為：在110℃下，將水樣通過堿性過硫酸鉀和硫酸兩次消解，得到的消解產物分別進入流動注射分析儀中的總氮、總磷分析系統，得到水樣中總氮、總磷的含量。在總氮分析系統中，消解產物通過一個鍍銅的鎘圈后，硝酸根被定量還原為亞硝酸根，在酸性條件下，亞硝酸根與磺胺和N-萘基乙二胺鹽酸鹽在45℃恒溫條件下反應生成紫紅色偶氮產物，其最佳吸收波長為550nm，采用分光光度法對得到的紫紅色偶氮產物進行測定，得到水中的總氮含量。

高壓消解對非蛋白質氮中的無機氮消解效果較好，但是對于某些氮雜環化合物、植物堿類的非蛋白質氮，如茶堿等來說，由于其結構較為復雜，采用高壓消解時存在消解不完全、不徹底的現象，從而造成對非蛋白質氮測定的回收率低，導致檢測結果不準確。對于液體樣品來說，尤其是液體營養物質，其中大部分非蛋白質氮為植物堿或氮雜環類化合物，而且液體中還含有還原性物質，如糖類，這些還原性物質會與氧化劑反應，從而影響對含氮組分的消解，采用上述方法對其中的非蛋白質氮含量進行測定時，得到的消解產物不夠完全和徹底，導致測定結果不準確。

發明內容

本發明的目的在于提供一種液體中非蛋白質氮含量的測定方法，本發明提供的方法對非蛋白質氮的測定具有高的回收率，得到的液體中非蛋白質氮含量的結果準確。

本發明提供一種液體中非蛋白質氮含量的測定方法，包括以下步驟：

a)分離液體中的蛋白質氮，得到含有非蛋白質氮的待測試樣；

b)在加熱條件下，向所述待測試樣中加熱過硫酸鉀，得到混合溶液；

c)將所述混合溶液依次經過紫外催化和高溫加熱，得到消解產物；

d)檢測所述消解產物，得到紫外光譜數據；

e)根據所述紫外光譜數據和預定的標準曲線，得到液體中非蛋白質氮含量。

優選的，所述紫外催化為在非硫酸酸性環境中進行紫外催化。

優選的，所述紫外催化的溫度為90℃～110℃。

優選的，所述高溫加熱的溫度為95℃～150℃。

優選的，所述高溫加熱為加壓高溫加熱。

優選的，所述加壓高溫加熱的壓力為5Psi～8Psi。

優選的，所述步驟b)中的加熱溫度為90℃～110℃。

優選的，所述步驟a)具體為：

向液體中加入蛋白質變性試劑，加熱得到的混合物，分離后得到含有非蛋白質氮的待測試樣。

優選的，所述蛋白質變性試劑為有機酸。

優選的，所述步驟b)前還包括：

向所述待測試樣中加入過氧化氫，氧化所述待測試樣中的還原性組分；

和/或向所述待測試樣中加入活性炭，除去所述待測試樣中的無機色素；

和/或向所述待測試樣中加入乙二胺四乙酸二鈉，除去所述待測試樣中的金屬離子。