[發明專利]奶牛FGF2基因的單核苷酸多態性序列及其檢測方法

無效

• 申請號: 201110460091.3
• 申請日: 2011-12-19
• 公開（公告）號: CN102533774A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 王昕;張智英;張婷婷;李托;趙志東;徐華榮
• 申請（專利權）人: 西北農林科技大學
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.奶牛FGF2基因的單核苷酸多態性序列，其特征在于：所述奶牛FGF2基因的單核苷酸多態性序列包括：

奶牛FGF2基因第一內含子第11646位為A或G的單核苷酸多態性序列。

2.一組檢測權利要求1所述奶牛FGF2基因的單核苷酸多態性序列的引物對，其特征在于：所述引物對的上游引物FGF2-F的序列如序列表3所示，所述引物對的下游引物FGF2-R的序列如序列表4所示。

3.權利要求1所述的奶牛FGF2基因的單核苷酸多態性序列的檢測方法，包括下述步驟：

以奶牛基因組池DNA為模板，以引物對P為引物，PCR擴增奶牛FGF2基因；對純化的PCR產物進行測序，確定奶牛FGF2單核苷酸多態性位點為第11646位A或G；

所述的引物對P的上游引物FGF2-In1的序列如序列表1所示，下游引物FGF2-In2的序列如序列表2所示。

4.根據權利要求3所述的奶牛FGF2基因的單核苷酸多態性序列的檢測方法，其特征在于：所述檢測方法還包括對奶牛FGF2基因單核苷酸多態性序列的鑒定步驟，包括以奶牛基因組為模板，以引物對F為引物，進行PCR擴增，其中引物對F的上游引物FGF2-F的序列如序列表3所示，所述引物對F的下游引物FGF2-R的序列如序列表4所示；PCR產物用Csp6I限制性內切酶進行酶切后用2％瓊脂糖凝膠電泳進行分離鑒定，根據電泳結果鑒定奶牛FGF2基因第11646位的單核苷酸多態性為：A等位基因為207bp，G等位基因為171bp。

5.根據權利要求4所述的奶牛FGF2基因的單核苷酸多態性序列的檢測方法，其特征在于：所述鑒定步驟中的PCR反應過程為：95℃變性5min，然后94℃?45s，退火溫度63℃到50℃?45s，72℃?45s，共32個循環，每個循環降低2℃，然后72℃延伸8min。

6.根據權利要求4或5所述的奶牛FGF2基因的單核苷酸多態性序列的檢測方法，其特征在于：瓊脂糖凝膠的濃度為2％。