[發明專利]黃芪中毛蕊異黃酮苷的提取與純化方法

無效

• 申請號: 201110452437.5
• 申請日: 2011-12-29
• 公開（公告）號: CN102532221A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 王碩;袁經權;周小雷;龔小妹;劉振杰
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區藥用植物園
• 主分類號: C07H17/07
• 分類號: C07H17/07;C07H1/08
• 代理公司: 廣西南寧公平專利事務所有限責任公司 45104
• 代理人: 劉小萍

技術領域

本發明涉及一種中藥材對照品制備方法，具體是一種黃芪中毛蕊異黃酮苷的提取與純化方法。

技術背景

2008年我國首次把中藥標準物質研究列入國家科技計劃，建立我國中藥材標準物質、中藥材物質標準、中藥材標準分析方法技術規范和國際上通行的中藥標準是實現中藥現代化的關鍵。黃芪作為非常中藥的一味補氣中藥，具有益氣固表、斂汗固脫、托瘡生肌、利水消腫之功效。臨床上應用非常廣泛，主要用于治療氣虛乏力，中氣下陷，久瀉脫肛，便血崩漏，表虛自汗，癰疽難潰，久潰不斂，血虛萎黃，內熱消渴，慢性腎炎，蛋白尿，糖尿病等病癥。自2010版藥典以來，有關黃芪藥材的質量控制在原有對照品黃芪甲苷的基礎上又引進黃芪毛蕊異黃酮苷作為質量控制的標準，但目前還沒有此對照品制備方法的相關報道。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種高效率、低成本中藥材對照品黃芪中毛蕊異黃酮苷的提取與純化方法。

本發明以如下技術方案解決上述技術問題：

本發明黃芪中毛蕊異黃酮苷的提取與純化方法，包括以下步驟：

(1)稱取黃芪藥材粉末，按每10公斤粉末加入100L的體積濃度為70-85％乙醇提取，過濾，濾液濃縮至無醇味，過大孔樹脂，先用蒸餾水水洗至澄清，再用體積濃度為70-85％的乙醇洗脫，收集含毛蕊異黃酮苷的組份，回收乙醇，在水浴鍋上濃縮得浸膏；

(2)稱取浸膏，用適量甲醇溶解后加入100-200目的硅膠拌樣進行硅膠柱層析，采用體積比為9∶1∶0.05的氯仿-甲醇-水溶液洗脫，收集樣品，點板，合并含有毛蕊異黃酮苷斑點的組分，再將其蒸干；

(3)用適量甲醇溶解后再加入100-200目的硅膠拌樣進行硅膠柱層析，采用體積比為9∶1∶0.05的氯仿-甲醇-水溶液洗脫，收集樣品，點板，合并含有毛蕊異黃酮苷斑點的組分，蒸干得毛蕊異黃酮苷化合物粗品；

(4)粗品用適量甲醇溶解后加入2倍甲醇體積的石油醚萃取，棄去石油醚層，甲醇層有白色沉淀析出，過濾，濾渣依次用石油醚、甲醇洗滌，得米白色沉淀；

(5)米白色沉淀再經100-200目的硅膠拌樣進行硅膠柱層析，采用體積比為9∶1∶0.05的氯仿-甲醇-水溶液洗脫，收集樣品，合并含有毛蕊異黃酮苷的組份，用甲醇重結晶，得到純的毛蕊異黃酮苷，揮干，保存。

采用本發明方法可制取中藥材對照品黃芪毛蕊異黃酮苷，而且效率高、成本低。

附圖說明

圖1是本發明方法的工藝流程圖。

具體實施方式

以下通過具體實施例對本發明的技術方案作進一步說明。

實施例1稱取黃芪藥材粉末(過50目篩)10公斤，加入100L的體積乙醇提取，過濾，濾液濃縮至無醇味，過D-101大孔樹脂(HG2-885-76)，再用體積濃度為70％的乙醇洗脫，收集含毛蕊異黃酮苷的組份濃縮，回收乙醇，在水浴鍋上濃縮得浸膏。稱取浸膏，用適量甲醇溶解后加入100-200目的硅膠拌樣進行硅膠柱層析，采用體積比為9∶1∶0.05的氯仿-甲醇-水溶液進行洗脫，收集合并含有毛蕊異黃酮苷斑點的組分。再用適量甲醇溶解后加入100-200目的硅膠拌樣進行硅膠柱層析，采用體積比為9∶1∶0.05的氯仿-甲醇-水溶液進行洗脫，得粗品毛蕊異黃酮苷。將粗品用適量甲醇溶解后加入石油醚(2倍甲醇體積量)萃取，棄去石油醚層，甲醇層有白色沉淀析出，過濾，濾渣依次用石油醚、甲醇洗滌，得米白色沉淀。此米白色沉淀再經100-200目的硅膠拌樣進行硅膠柱層析，采用體積比為9∶1∶0.05的氯仿-甲醇-水溶液進行洗脫，收集，合并含有毛蕊異黃酮苷的組份，用甲醇重結晶，得到純度為98.8％(HPLC面積-歸一法測定)的毛蕊異黃酮，揮干，保存。