[發明專利]磺胺二甲基嘧啶親和膜及其在抗體分離純化中的應用有效
| 申請號: | 201110449444.X | 申請日: | 2011-12-29 |
| 公開(公告)號: | CN102553467A | 公開(公告)日: | 2012-07-11 |
| 發明(設計)人: | 應國清;朱麗;易喻;梅建鳳;王鴻;陳建澍 | 申請(專利權)人: | 浙江工業大學 |
| 主分類號: | B01D71/82 | 分類號: | B01D71/82;B01D71/16;B01D67/00;C07K1/22 |
| 代理公司: | 杭州天正專利事務所有限公司 33201 | 代理人: | 黃美娟;俞慧 |
| 地址: | 310014 浙江省*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 磺胺 甲基 嘧啶 親和 及其 抗體 分離 純化 中的 應用 | ||
1.一種磺胺二甲基嘧啶親和膜,其特征在于:所述磺胺二甲基嘧啶親和膜的制備方法包括如下步驟:
(1)取醋酸纖維素膜,先在堿性條件下充分水解,然后加入環氧氯丙烷進行環氧活化,反應結束后在抽濾條件下用去離子水洗至中性,得到環氧活化后的膜;
(2)將磺胺二甲基嘧啶溶解于pH?10~12的堿性緩沖溶液中,然后將步驟(1)獲得的環氧活化后的膜分散在上述溶液中,在50~65℃反應24h~36h,在抽濾條件下用去離子水洗至濾出液在280nm處的紫外吸收接近于0,干燥后即得磺胺二甲基嘧啶親和膜。
2.如權利要求1所述的磺胺二甲基嘧啶親和膜,其特征在于:所述醋酸纖維素膜的水解在1.5~2mol/L?NaOH溶液中進行,水解溫度為60~80℃,水解時間為1.5~2.5h。
3.如權利要求2所述的磺胺二甲基嘧啶親和膜,其特征在于:環氧活化溫度為40~60℃,環氧活化時間為4~6h。
4.如權利要求3所述的磺胺二甲基嘧啶親和膜,其特征在于:所述環氧氯丙烷的加入體積為水解后反應體系體積的15%~20%。
5.如權利要求1~4之一所述的磺胺二甲基嘧啶親和膜,其特征在于:所述磺胺二甲基嘧啶的加入質量為環氧活化后的膜質量的10%~20%。
6.如權利要求1~4之一所述的磺胺二甲基嘧啶親和膜,其特征在于:所述的pH?10~12的堿性緩沖溶液為pH?10~12的PBS緩沖溶液或碳酸鹽緩沖液。
7.如權利要求1所述的磺胺二甲基嘧啶親和膜在抗體分離純化中的應用,其特征在于:所述的應用在pH5.5~7.5的條件下進行。
8.如權利要求7所述的磺胺二甲基嘧啶親和膜在抗體分離純化中的應用,其特征在于:所述的應用在pH?5.5~6.0的條件下進行。
9.如權利要求7或8所述的磺胺二甲基嘧啶親和膜在抗體分離純化中的應用,其特征在于:所述的抗體為免疫球蛋白IgG。
10.如權利要求7所述的磺胺二甲基嘧啶親和膜在抗體分離純化中的應用,其特征在于:所述的分離純化按照如下步驟進行:取磺胺二甲基嘧啶親和膜裝入膜杯中,將用pH5.5~6.0的PBS緩沖溶液稀釋后的腹水用蠕動泵裝入膜杯中讓其與磺胺二甲基嘧啶親和膜上的配基充分吸附,然后用蠕動泵泵入去離子水直至濾出液在280nm處的紫外吸收接近為0,再用蠕動泵泵入含有1.5~2.0mol/L?NaCl的pH5.5~6.0的PBS緩沖液洗脫,收集洗脫液,即得從腹水中分離純化后的抗體。
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