[發明專利]從千層塔中提取分離石杉堿甲和石杉堿乙的方法

無效

• 申請號: 201110449262.2
• 申請日: 2011-12-29
• 公開（公告）號: CN102432535A
• 公開（公告）日: 2012-05-02
• 發明（設計）人: 趙勇彪;祝利;楊再江;向廷軍;何全慧
• 申請（專利權）人: 重慶市秀山紅星中藥材開發有限公司
• 主分類號: C07D221/22
• 分類號: C07D221/22;C07D471/08
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技術領域

本發明涉及一種生物堿的提取方法，特別是一種從千層塔中提取分離石杉堿甲和石杉堿乙的方法。

背景技術

千層塔為石杉科石杉屬蕨類植物，又名蛇足石杉、救命王。主布東北、長江流域和閩、粵、桂、滇、黔等省區。民間常將全草入藥，有毒，用于退熱、止血、消腫散毒、跌打損傷等。千層塔中含有的生物堿，特別是石杉堿甲(HupA)和石杉堿乙(HupB)是具有低毒、高效、可逆和高選擇性等優點的乙酰膽堿酯酶抑制劑，對于治療重癥肌無力、中老年癡呆及提高記憶力具有良好的療效，并對抑制有機磷酸中毒有一定的作用。由于其獨特的藥用價值，千層塔及其提取物正日益受到國內外市場的廣泛重視。

目前的千層塔提取物主要集中在石杉堿甲，而石杉堿乙在提取過程中被作為廢渣棄去，嚴重浪費了有效資源。

如專利號200710018515.4“一種從千層塔中提取分離石杉堿甲的方法”，專利申請號200910014866.7“一種從千層塔中提取分離高純度石杉堿甲的新方法”等只是獲得了石杉堿甲，而丟棄了石杉堿乙。專利號200610128322.x，公布了“從植物藥材千層塔中提取石杉堿乙的工藝”只是獲得了石杉堿乙，而丟棄了石杉堿甲。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種可以同時提取并分離石杉堿甲和石杉堿乙的方法，以提高有限資源的利用率。

為解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案包括石杉總堿的提取、提純、石杉堿甲和石杉堿乙的分離、濃縮結晶和重結晶，具體步驟如下。

⑴粉碎：凈選千層塔藥材，粉碎，粒度為10-20目，過篩。

⑵綜合提取：連續兩次提取，第一次提取是將千層塔粉粒用0.8%的鹽酸溶液按照固液比為1：20-25的標準浸泡60min，再用600W功率的超聲波提取15min，然后再浸泡60min，接著將提取液離心，取上清液；第二次提取是將濾渣用0.8%的鹽酸溶液按照固液比為1：18-22的標準浸泡45min，再用600W功率的超聲波提取10min，然后再浸泡45min，接著將提取液離心，取上清液，最后將兩次上清液合并。

⑶脫色：在合并液中加入活性炭，攪拌脫色4h，濾去活性炭，留取濾液，活性炭的加入量為提取上清液體積的5‰。

⑷洗脫：將所得濾液上陽離子交換樹脂進行吸附，吸附30min后，用等體積蒸餾水洗滌樹脂，再用等體積1%鹽酸洗脫，減壓濃縮洗脫液至原材料重量的10-12倍體積。

⑸反相色譜分離：將洗脫濃縮液上反相C18色譜柱，用2倍20%乙醇溶液溶解10h，再用等量35%-45%乙醇溶液進行洗脫，減壓濃縮洗脫液至原材料重量的10-12倍體積。

⑹分離：將洗脫濃縮液上反相硅膠色譜柱，用2倍20%-30%的甲醇溶液溶解，再用等量30%-40%的甲醇溶液進行洗脫，同時紫外在線檢測，收集石杉堿甲所在洗脫峰的洗脫液；再用等量60%-70%甲醇溶液進行洗脫，同時紫外在線檢測，收集石杉堿乙在洗脫峰的洗脫液。

⑺濃縮結晶：將得到的石杉堿甲洗脫液和石杉堿乙洗脫液分別減壓濃縮，直至有結晶析出，過濾得石杉堿甲粗結晶和石杉堿乙粗結晶。

⑻重結晶：分別將石杉堿甲粗結晶和石杉堿乙粗結晶放入100-150倍體積的85%-90%乙醇溶液中，加熱充分溶解然后濃縮至結晶原體積的10-12倍，然后放置析晶，析出白色針狀結晶，過濾得石杉堿甲結晶和石杉堿乙結晶。

⑼干燥：分別將石杉堿甲結晶和石杉堿乙結晶放入真空干燥器中干燥，得到石杉堿甲產品和石杉堿乙產品。

本發明的有益效果是，用酸液浸泡，超聲波提取，可充分析出千層塔中的石杉總堿，然后利用活性炭和陽離子交換樹脂清除雜質，再利用反相色譜柱可以分離石杉堿甲和石杉堿乙，然后分別通過萃取、結晶和重結晶可以提高石杉堿甲和石杉堿乙的純度，這樣有效的利用了自然資源，提高了經濟效益。

附圖說明

圖1為本發明從千層塔中提取分離石杉堿甲和石杉堿乙的方法流程示意圖。

圖2為本發明實施例1石杉堿甲的高效液相色譜圖。

圖3為本發明實施例1石杉堿乙的高效液相色譜圖。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明作進一步說明。

實施例1。