[發(fā)明專利]一種心肌梗塞納米免疫增強(qiáng)比濁快速檢測試劑盒及使用方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110443032.5
• 申請日: 2011-12-27
• 公開（公告）號(hào): CN103185798A
• 公開（公告）日: 2013-07-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王濱;吳一凡
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州德沃生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;G01N21/82
• 代理公司: 蘇州華博知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32232
• 代理人: 黃珩

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及疾病快速檢測領(lǐng)域，具體涉及一種心肌梗塞快速檢測試劑盒及使用方法。

背景技術(shù)

全球每年有約1700萬人死于心血管疾病，其中有一半以上死于急性心肌梗死。全世界每年有約1000萬例心肌梗死患者，其中約300萬例是ST段抬高的急性心肌梗死。在美國，每年有約90萬人有急性心肌梗塞（AMI），其中約22.5萬人死于入院前，其多數(shù)死亡是心律失常所致。每天有超過2400人死于心梗，比癌癥、慢性呼吸系統(tǒng)疾病、糖尿病及交通事故的綜合還要多。

心肌細(xì)胞損傷后，膜的完整性和通透性改變，細(xì)胞內(nèi)的大分子物質(zhì)得以逸出，最后能在血液循環(huán)中被檢測到。這些大分子物質(zhì)被稱為心肌損傷標(biāo)志物，簡稱心肌標(biāo)志物。肌鈣蛋白-I（Troponin-I）、D-二聚體（D-dimer）、肌紅蛋白（Myoglobin）、超敏C-反應(yīng)蛋白?（hs－CRP）和心肌脂肪酸結(jié)合蛋白（FABP）目前應(yīng)用最廣泛。這5項(xiàng)指標(biāo)的檢測結(jié)果不同程度的升高及變化可以代表心肌梗塞病人不同階段的生理變化，對心肌梗塞的早期診斷、病程監(jiān)測及對藥物的治療監(jiān)測等方面具有重要的臨床意義。

近幾年來，已建立了多種有價(jià)值的心梗各種指標(biāo)的檢測方法，主要包括:乳膠凝集法、酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法、熒光抗體檢測法、免疫金標(biāo)法和膠乳免疫比濁法等。

乳膠凝集法操作簡便、快速，適用于急診檢測，但其只能用于定性或半定量測定，常作為篩查用。酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法精確、定量，有很高的敏感性，但操作要求嚴(yán)格且費(fèi)時(shí)，不適用于急診和臨床病人及時(shí)診斷及治療的需要。熒光抗體檢測法是在ELISA基礎(chǔ)上與熒光檢測相結(jié)合，敏感性高，與ELISA法有很好的一致性，但是儀器價(jià)格昂貴，難以在中小醫(yī)院，特別是在社區(qū)門診等未經(jīng)過專業(yè)化驗(yàn)訓(xùn)練的基層醫(yī)療站點(diǎn)推廣。免疫金標(biāo)法具有乳膠凝集法的操作簡單、快速，又具有ELISA法準(zhǔn)確的特點(diǎn)，但類風(fēng)濕因子、肝素及血脂，定量不準(zhǔn)確是其最大的缺點(diǎn)。膠乳免疫比濁法具有操作簡便、快速、定量準(zhǔn)確、敏感度高、特異等優(yōu)點(diǎn)，可滿足門急診等需要，在臨床研究中應(yīng)用越來越廣泛。但現(xiàn)有市售用此法制備的商品化試劑盒總體靈敏度不高、開瓶后穩(wěn)定性欠佳。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是針對心梗快速近臨床診斷（POCT），提供一種能定量檢測Troponin-I、D-dimer、Myoglobin、hs-CRP、FABP含量，試劑、反應(yīng)裝置一體化的，操作簡單、快速、準(zhǔn)確、敏感度高、特異性強(qiáng)、檢測成本低，適用于門急診/近臨床檢測且儀器適用面廣的檢測/測定試劑一體化的試劑盒及其使用方法。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的技術(shù)方案是，一種心肌梗塞納米免疫增強(qiáng)比濁快速檢測試劑盒，其特征在于，包括反應(yīng)檢測一體裝置和置于反應(yīng)裝置中的檢測試劑盒，在所述檢測試劑盒中包含R1試劑、R2試劑和校準(zhǔn)品；

所述R1試劑包括穩(wěn)定劑、緩沖液、促凝劑和防腐劑;

所述R2試劑包括多株特異性鼠抗人肌鈣蛋白-I（Troponin-I）標(biāo)記的膠乳顆粒或D-二聚體（D-dimer）單克隆抗體膠乳顆粒或多株特異性鼠抗人肌紅蛋白(Myoglobin)標(biāo)記的膠乳顆粒或多株特異性鼠抗人超敏C-反應(yīng)蛋白（hs-CRP）標(biāo)記的膠乳顆粒或多株特異性鼠抗人心肌脂肪酸結(jié)合蛋白（FABP）標(biāo)記的膠乳顆粒、穩(wěn)定劑、緩沖液和防腐劑；

所述校準(zhǔn)品是由純化的重組蛋白肌鈣蛋白－I（tropoinI）或纖維蛋白降解產(chǎn)物D－二聚體（D－dimer）或純化的重組蛋白肌紅蛋白（Myoglobin）或純化的重組蛋白CRP或純化的重組心肌脂肪結(jié)合蛋白（FABP）、穩(wěn)定劑、緩沖液、賦形劑和防腐劑組成。

優(yōu)選的，所述的穩(wěn)定劑是蛋白質(zhì)、無機(jī)鹽、金屬絡(luò)合劑、表面活性劑、助懸劑和抗氧劑中的一種或兩種以上。

優(yōu)選的，所述的穩(wěn)定劑選自蛋白質(zhì)和無機(jī)鹽。

優(yōu)選的，所述的穩(wěn)定劑選自無機(jī)鹽。

優(yōu)選的，所述穩(wěn)定劑中的蛋白質(zhì)選自牛血清白蛋白或明膠。

優(yōu)選的，所述穩(wěn)定劑中的無機(jī)鹽選自氯化鈉、氯化鉀、硫酸鈉和硫酸鉀中的一種。

優(yōu)選的，所述的穩(wěn)定劑為氯化鈉。

優(yōu)選的，所述氯化鈉穩(wěn)定劑的質(zhì)量體積百分比濃度為0.7%~0.9%。

優(yōu)選的，所述穩(wěn)定劑中的金屬絡(luò)合劑選自甘氨酸、絲氨酸、精氨酸和乙二胺四乙酸中的一種或兩種以上。

優(yōu)選的，所述穩(wěn)定劑中的表面活性劑選自吐溫20、吐溫40中的一種或兩種以上。

優(yōu)選的，所述穩(wěn)定劑中的助懸劑選自乙二醇、丙三醇、乳糖和麥芽糖中的一種或兩種以上。