[發(fā)明專利]一種東北山核桃楸種仁蛋白質(zhì)提取的工藝條件

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110442706.X
• 申請(qǐng)日: 2011-12-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103183721A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-07-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 包怡紅;于陽(yáng)陽(yáng);劉爽
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 東北林業(yè)大學(xué);包怡紅;于陽(yáng)陽(yáng);劉爽
• 主分類號(hào): C07K1/30
• 分類號(hào): C07K1/30;C07K1/14
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種提取東北山核桃楸種仁蛋白質(zhì)的工藝條件。?

背景技術(shù)

山核桃楸(Juglans?Mandshurica?Maxim)產(chǎn)自黑龍江小興安嶺海拔500-800m以下，及東部山區(qū)、吉林、遼寧、內(nèi)蒙古東部、河北、山西等地。山核桃在木材、食用、醫(yī)藥方面都有很大的使用價(jià)值。山核桃楸作為一種營(yíng)養(yǎng)豐富的堅(jiān)果，除了味道香美、風(fēng)味獨(dú)特外，更有獨(dú)特的營(yíng)養(yǎng)成分和功能作用。種仁中含有豐富的蛋白質(zhì)、多種人體必需脂肪酸及對(duì)人體有必要作用的鈣、鎂、磷、鋅、鐵等22種礦物元素。其蛋白質(zhì)消化率達(dá)87.2％，18種氨基酸齊全，且人體所需的8種必需氨基酸含量比例適合，對(duì)人體生理有重要功能的谷氨酸、天門冬氨酸、精氨酸的含量均較高，故核桃蛋白是一種良好的蛋白源。核桃油脂中包括棕櫚酸、亞油酸、亞麻酸等不飽和脂肪酸，對(duì)高血壓、心腦血管疾病有明顯的預(yù)防和治療作用。中醫(yī)歷來(lái)認(rèn)為核桃仁性溫、味甘，功能健腦補(bǔ)腎益胃補(bǔ)血。東北山核桃屬純天然野生果類，具有潤(rùn)肺、強(qiáng)腎、降低血脂、預(yù)防冠心病的功能，長(zhǎng)期食用能夠益壽養(yǎng)顏、抗衰老，孕婦食用對(duì)胎兒智力發(fā)育有神奇功效。?

目前對(duì)于蛋白質(zhì)的粗分離提取方法多采用沉淀分離，包括鹽析沉淀、有機(jī)溶劑沉淀、等電點(diǎn)沉淀等。利用等電點(diǎn)沉淀法來(lái)提取核桃蛋白是研究者較為廣泛采取的方法，并在此法的基礎(chǔ)上采用超聲波法、酶法來(lái)輔助提取以提高蛋白質(zhì)的提取率。對(duì)提取出來(lái)的蛋白可進(jìn)行下一步的功能特性研究，以及水解制得功能性多肽。張宏，姚順等人將核桃打漿后提取蛋白質(zhì)，在核桃仁濃度為4％，pH9.0下堿溶，在pH5.0酸沉，核桃蛋白質(zhì)得率最高，為70.0％左右。王豐俊等人利用單因素實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面法對(duì)核桃餅中核桃蛋白的提取工藝進(jìn)行研究，并確定其較優(yōu)工藝條件為：提取溫度65℃，提取時(shí)間4h，pH9.0，液料比12∶1。在該條件下，核桃蛋白的提取率達(dá)到93.86％，核桃蛋白中粗蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)為86.31％。杜蕾蕾，郭濤等人對(duì)傳統(tǒng)的堿溶酸沉法制備核桃蛋白的工藝進(jìn)行改進(jìn)，提高了核桃蛋白的純度；研究結(jié)果表明，通過(guò)對(duì)堿溶分離的上層清液加1％α-淀粉酶酶解，對(duì)酸沉?分離的沉淀于40℃下水洗2次，核桃蛋白純度可達(dá)93.5％。姜莉以核桃渣為原料，采用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)，得出核桃蛋白最適提取條件是：超聲波1小時(shí)，料液比1∶20，溫度55℃，堿溶pH8.5，蛋白質(zhì)提取率可達(dá)到70％左右。酸沉淀pH在4.0-5.0范圍內(nèi)為佳，蛋白質(zhì)得率可達(dá)到95％以上。?

而對(duì)于東北山核桃楸蛋白提取的研究卻很少見(jiàn)。天然山核桃楸的蛋白質(zhì)含量豐富，利用脫脂后的山核桃渣來(lái)提取其蛋白，能有效開(kāi)發(fā)利用其使用價(jià)值。?

發(fā)明內(nèi)容

技術(shù)問(wèn)題?

本發(fā)明的目的在于提供一種東北山核桃楸種仁蛋白質(zhì)的提取方法。該方法是一種較為較為安全高產(chǎn)，且方便可行的方法。?

技術(shù)方案?

1.本發(fā)明是一種東北山核桃楸種仁蛋白質(zhì)提取的工藝條件，是以東北山核桃楸種仁為原料，經(jīng)過(guò)去除種衣、粉碎、超臨界CO₂反復(fù)脫脂3次后得到脫脂核桃楸種仁渣。用一定濃度的NaOH溶液對(duì)脫脂核桃楸種仁渣進(jìn)行蛋白質(zhì)的提取，提取液離心取上清液得到山核桃楸蛋白溶液。上清液調(diào)pH至4.5使得蛋白質(zhì)充分沉淀，離心留沉淀并將沉淀物調(diào)節(jié)至pH7后，采用透析除鹽36h，將透析物冷凍干燥后得到東北山核桃楸種仁蛋白質(zhì)的工藝。包括如下步驟：?

(1)篩選出優(yōu)質(zhì)東北山核桃楸種仁后，將其用熱堿液浸泡一定時(shí)間后，對(duì)種仁進(jìn)行輕度搓擦的同時(shí)沖澆自來(lái)水，使其脫皮，25℃鼓風(fēng)吹干備用；?

(2)將干燥后的東北山核桃楸種仁粉碎過(guò)20-40目篩后，備用；?

(3)將粉碎后的東北山核桃楸種仁渣進(jìn)行超臨界CO₂脫脂，重復(fù)2次，充分除油后，備用；?

(4)將脫脂山核桃楸種仁加入一定體積的提取液，一定溫度下，攪拌提取2次，離心后合并提取液；?

(5)將提取液調(diào)pH4.5，充分?jǐn)嚢枋沟玫鞍踪|(zhì)沉淀完全，離心取沉淀；?

(6)沉淀物再調(diào)pH至7，采用透析除鹽36小時(shí)；?

(7)將透析除鹽后的沉淀物冷凍干燥，制得山核桃楸種仁蛋白質(zhì)。?

2.本發(fā)明步驟(1)所述的熱堿液濃度為1％的NaOH，溫度65℃，浸泡時(shí)間為5-10分鐘。自來(lái)水沖洗至種仁恢復(fù)本色，且無(wú)滑膩感。?

3.本發(fā)明步驟(3)所述的超臨界CO2脫脂條件為壓力35MPa，溫度40℃，時(shí)間2.5小時(shí)。?