[發明專利]CENPE基因的用途

無效

• 申請號: 201110436904.5
• 申請日: 2011-12-22
• 公開（公告）號: CN103173526A
• 公開（公告）日: 2013-06-26
• 發明（設計）人: 黃健;劉星
• 申請（專利權）人: 上海生物芯片有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;G01N33/574
• 代理公司: 上海序倫律師事務所 31276
• 代理人: 周東萍

技術領域

本發明涉及生物工程技術領域，尤其涉及一種CENPE基因的用途。

背景技術

細胞周期是指細胞從第一次分裂結束產生新細胞到第二次分裂結束所經歷的全過程，包括間期和分裂期。細胞分裂期時發生遺傳物質的復制和分配，即染色質DNA的復制與有絲分裂期姐妹染色體的分離，這些事件的開始都受到精確的調控，并且事件執行過程中的錯誤可以被修正。有絲分裂過程中染色體的運動和分離是由定位于染色體著絲粒部位的動點復合物與動態的微管的相互作用來調節的。CENPE基因編碼中心體相關蛋白E(CENPE，又名KIF10，NM_001813)，分子量約為312KD，其N端具有ATP依賴的動力區段，而尾端則富含卷曲螺旋。CENPE于分裂中前期聚集于中心體上的中心粒區域，發揮驅動蛋白的作用；在與動粒結合后則通過尾部結合微管，在維持穩定的動點—微管連接和執行紡錘體檢查點功能中起到關鍵作用。在多種細胞系中抑制CENPE的表達，顯示細胞分裂中期染色體失去正確排列。CENPE被報道在有絲分裂過程中被Cdk1、MAPK、Mps1與Aurora激酶家族成員等多種激酶磷酸化，而上述作用與這些磷酸化有著緊密聯系。

細胞正常的分裂、增殖、分化與衰老維持著機體自身的穩定，細胞周期的異常會導致這一系列過程的紊亂，從而產生包括腫瘤在內的多種疾病。由CENPE參與調控的有絲分裂中期/后期交界處是重要的細胞周期調控點，其失控易導致腫瘤的發生，提示CENPE與腫瘤的發生發展可能存在密切聯系。一些研究顯示CENPE在耐藥性卵巢癌、垂體腺瘤中上調表達，在垂體腺瘤中，CENPE與其它6個基因共同構成標志物譜，作為該疾病的病理分型和預后的分子診斷標志。而CENPE在肝癌中是否有類似作用則尚未見報道。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種CENPE基因的用途，CENPE基因可作為診斷肝癌的分子標志物。

為了解決上述技術問題，本發明通過如下技術方案實現：

在本發明的一個方面，提供了一種CENPE基因的用途，用于制備診斷肝癌的產品。

優選的，所述診斷肝癌的產品包括：用半定量RT-PCR、基因芯片檢測、或免疫檢測診斷肝癌的產品。

所述用半定量RT-PCR診斷肝癌的產品至少包括一對特異擴增CENPE基因的引物。

所述用基因芯片檢測診斷肝癌的產品包括：與CENPE基因的核酸序列雜交的探針。

所述用免疫檢測診斷肝癌的產品包括：與CENPE蛋白特異性結合的抗體。

在本發明的另一方面，還提供了一種用于診斷肝癌的試劑盒，所述試劑盒包含特異性針對CENPE基因的引物或探針，或包含特異性結合CENPE蛋白的抗體。

利用本發明的試劑盒，可以檢測病人CENPE基因的表達情況，從而診斷病人是否患有肝癌。

在本發明中，術語“引物”是指一種寡核苷酸，可以是天然的也可以是合成的，它可以作為在一定條件下誘發DNA合成的起始點，在合適條件下誘發合成與核酸鏈互補的引物擴增產物，即在四種不同的三磷酸脫氧核糖核苷及一種聚合試劑(即DNA聚合酶或逆轉錄酶)存在下，在一種合適的緩沖液中并在合適的溫度下進行擴增反應。優選的引物是單股寡脫氧核糖核苷酸。引物的合適長度取決于該引物的設計用途，但一般在15～25個核苷酸之間。

在本發明中，所述探針可以是DNA、RNA、DNA-RNA嵌合體、PNA或其它衍生物。所述探針的長度沒有限制，只要完成特異性雜交、與目的核苷酸序列特異性結合，任何長度都可以。

在本發明中，可以使用一系列本領域已知的方法來制備針對CENPE蛋白特異的抗體。例如，將提純的人CENPE基因產物或它的抗原片段或人工合成的含有與CENPE蛋白有連續5個相同的氨基酸的多肽片段注射入動物體內以產生多抗體。同樣，表達人CENPE蛋白或它的抗原片段的細胞也可以用來對動物致免疫而產生抗體。根據本發明制備的抗體也可以是單克隆抗體，這些單克隆抗體可用雜交瘤技術制備。

經實驗證明，本發明CENPE基因在肝癌組織中的表達明顯高于癌旁組織，因此CENPE基因可作為診斷肝癌的特異標志基因，使肝癌診斷更加準確、快速。

附圖說明

下面結合附圖和具體實施方式對本發明作進一步詳細的說明。

圖1是本發明實施例1的CENPE基因在人肝癌組織和癌旁組織中差異表達的半定量RT-PCR結果圖。

具體實施方式