[發明專利]聚乙二醇綴合的艾塞那肽的合成及應用

無效

• 申請號: 201110435506.1
• 申請日: 2011-12-22
• 公開（公告）號: CN102532303A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 賴文;陸明;王寶利
• 申請（專利權）人: 江蘇弘和藥物研發有限公司
• 主分類號: C07K14/575
• 分類號: C07K14/575;C07K1/20;C07K1/107;A61K38/22;A61K47/48;A61P3/10
• 代理公司: 北京中恒高博知識產權代理有限公司 11249
• 代理人: 高松

1.一種聚乙二醇綴合的艾塞那肽，由結構通式（Ⅰ）表示：

（Ⅰ）

式中，mPEG表示甲氧基聚乙二醇的殘基；

n取值為0-3；

R表示去除一個氨基的艾塞那肽分子，其中，所述氨基為艾塞那肽分子中賴氨酸殘基的氨基或N末端組氨酸殘基的氨基；

所述聚乙二醇綴合的艾塞那肽的分子量為9800-110000。

2.根據權利要求1所述的聚乙二醇綴合的艾塞那肽，其特征在于n取值為1。

3.根據權利要求1所述的聚乙二醇綴合的艾塞那肽，其特征在于聚乙二醇綴合的艾塞那肽的分子量為9800-15000。

4.權利要求1-3任意一項所述的聚乙二醇綴合的艾塞那肽的制備方法，包括以下反應：

具體地，反應過程包括以下步驟：

（1）將艾塞那肽（Ⅲ）用Tris-HCl緩沖液溶解，調節其pH為6.5-8.5；

（2）加入活化的化合物（Ⅱ），其中，艾塞那肽（Ⅲ）與化合物（Ⅱ）的摩爾比為?1：0.1-100，反應時間為20-240分鐘，反應的溫度為0-37℃；

（3）反應完畢，加入超過反應物摩爾量100倍以上的甘氨酸終止反應，制得聚乙二醇綴合的艾塞那肽（Ⅰ）。

5.根據權利要求4所述的聚乙二醇綴合的艾塞那肽的制備方法，其特征在于，步驟（3）中所述聚乙二醇綴合的艾塞那肽（Ⅰ）的分離純化和分析，包括以下步驟：

（1）聚乙二醇綴合的艾塞那肽（Ⅰ）的分離純化：

將最終反應液過濾，以反相高效液相色譜進行純化，色譜條件如下：

色譜柱：?10um，20?x?250mm

流動相：?A：?0.1%?三氟乙酸

??????????????B：?乙腈

??????????????35%B?等度洗脫

流速：?20ml/min

檢測波長：210nm

以上述條件運行，通過峰值進行分離純化；

（2）聚乙二醇綴合的艾塞那肽（Ⅰ）的分析：

將上步分離純化以后的目標產物用高效液相色譜進行分析，色譜條件如下：

色譜柱：?5um，4.6?x?250mm

流動相：?A：?0.1%的三氟乙酸

??????????????B：?乙腈

??????????????30%-40%B?10分鐘內梯度洗脫，然后用95%B沖洗

流速：1ml/min

檢測波長：210nm

柱溫：35℃

以上述條件運行，通過峰值進行分析。

6.根據權利要求4所述的聚乙二醇綴合的艾塞那肽的制備方法，其特征在于，化合物（Ⅱ）為丙酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亞胺酯1000、丙酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亞胺酯2000、丙酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亞胺酯5000、丙酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亞胺酯10000、丙酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亞胺酯20000、丙酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亞胺酯30000、丁酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亞胺酯1000、丁酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亞胺酯2000、丁酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亞胺酯5000、丁酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亞胺酯10000、丁酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亞胺酯20000或丁酸甲氧基聚乙二醇琥珀酰亞胺酯30000中的一種。

7.根據權利要求4所述的聚乙二醇綴合的艾塞那肽的制備方法，其特征在于，步驟（1）所述pH為?6.5-7.5；步驟（2）所述摩爾比為1：8-10，所述反應時間為20-30分鐘，所述反應溫度為20-25℃。

8.權利要求1-3任意一項所述的聚乙二醇綴合的艾塞那肽在制備治療2型糖尿病的藥物中的應用。