[發(fā)明專利]鹽芥ThPER42基因的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110430723.1
• 申請日: 2011-12-20
• 公開（公告）號: CN102517325A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 周宜君;高飛;張根發(fā);馮金朝;韋善君;徐小靜;程文靜;耿玉珂;馬亭亭
• 申請（專利權(quán)）人: 中央民族大學(xué)
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;C12N15/84;A01H5/00;C12N15/53;C12N9/08;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/21
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域中鹽芥ThPER42基因的應(yīng)用。

背景技術(shù)

鹽生植物鹽芥為十字花科(Brassicaceae)、鹽芥屬(Thellungiella)植物，生于土壤鹽漬化的農(nóng)田旁、水溝邊和山區(qū)，分布于蒙古、西伯利亞和北美，在我國主要分布于山東、河北、江蘇、新疆、內(nèi)蒙古、吉林、天津和河南等地。

在鹽漬環(huán)境下生長的鹽芥，不僅具有作為模式生物的基本特征，而且與擬南芥近緣。由于擬南芥作為模式植物，其許多方面研究已十分清楚，為進行鹽芥基因水平上的研究提供了有利條件。已有的研究結(jié)果表明，鹽芥在響應(yīng)非生物脅迫中有許多基因所編碼的蛋白質(zhì)的功能未知，對未來的遺傳學(xué)研究來說，它是一種具有豐富遺傳資源的植物。因此，作為一種具有應(yīng)用前景的植物耐鹽模式系統(tǒng)，鹽芥現(xiàn)已被國際、國內(nèi)許多實驗室采納用于植物抗逆生理生化和分子機制的研究。

植物受到環(huán)境脅迫(如高鹽、低溫等)，體內(nèi)存在著活性氧(Reactive?Oxygen?Species，ROS)平衡體系就會受到破壞。活性氧的積累，對活性氧敏感的磷脂膜及脂肪酸首先受損，導(dǎo)致生物膜中脂質(zhì)的過氧化，干擾鑲嵌于生物膜系統(tǒng)上的多種酶的空間構(gòu)型，導(dǎo)致膜的孔隙變大、通透性增加、代謝紊亂，使植物受到傷害，生長抑制，衰老和加速死亡。在長期適應(yīng)進化中，植物體內(nèi)形成了一套有效的ROS清除機制，分為酶促和非酶促兩類。其中酶促保護系統(tǒng)主要有超氧化物歧化酶(Superoxide?Dismutase，SOD)、過氧化氫酶(Catalase，CAT)、抗壞血酸過氧化物酶(Ascorbate?Peroxidase，APX)、過氧化物酶(Peroxidase，POD)和谷胱甘肽過氧化物酶(Glutathione?Peroxidase，GPX)等。

高等植物中過氧化物酶Class?III(POD)屬于大家族，在水稻中有138個成員，在擬南芥中有73個成員，在應(yīng)答內(nèi)部和外部各種脅迫中，各成員各自表達發(fā)揮特殊的作用，其中有部分編碼POD的基因在正常條件和高鹽脅迫下表達豐度較高，而且在NCBI中登錄的鹽芥的ESTs文庫中也檢索到相關(guān)編碼POD基因。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的一個目的是提供一種培育轉(zhuǎn)基因植物的方法。

本發(fā)明所提供的培育轉(zhuǎn)基因植物的方法，是將序列表中序列2所示蛋白的編碼基因轉(zhuǎn)入出發(fā)植物中，得到耐逆性高于所述出發(fā)植物的轉(zhuǎn)基因植物。

上述方法中，所述蛋白的編碼基因為如下1)-4)中任一所述的基因：

1)其核苷酸序列是序列表中序列1；

2)其編碼序列是序列表中序列1第59-1054位核苷酸所示；

3)在嚴(yán)格條件下與1)或2)的基因雜交且編碼所述蛋白的基因；

4)與1)或2)或3)的基因具有90％以上的同源性且編碼所述蛋白的基因。

上述方法中，所述耐逆性為耐鹽性。

上述方法中，所述蛋白的編碼基因是通過重組表達載體導(dǎo)入出發(fā)植物中；所述重組表達載體為在載體pPZP212的多克隆位點間插入所述蛋白的編碼基因得到的重組表達載體。

上述方法中，所述目的植物為雙子葉植物或單子葉植物；所述雙子葉植物具體為煙草、鹽芥或擬南芥。

含有序列表中序列2所示蛋白的編碼基因的表達盒、重組載體、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌也屬于本發(fā)明的保護范圍。

所述重組載體為在載體pPZP212的多克隆位點間插入序列表中序列2所示蛋白的編碼基因得到的重組表達載體。

所述蛋白的編碼基因為如下1)-4)中任一所述的基因：

1)其核苷酸序列是序列表中序列1；

2)其編碼序列是序列表中序列1第59-1054位所示；

3)在嚴(yán)格條件下與1)或2)的基因雜交且編碼所述蛋白的基因；

4)與1)或2)或3)的基因具有90％以上的同源性且編碼所述蛋白的基因。

序列表中序列2所示蛋白的編碼基因和/或上述的表達盒、重組載體、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌在培育耐逆植物中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護范圍。

上述應(yīng)用中，所述耐逆植物為耐鹽植物；所述植物為雙子葉植物或單子葉植物；所述雙子葉植物具體為煙草、鹽芥或擬南芥。

上述應(yīng)用中，所述蛋白的編碼基因為如下1)-4)中任一所述的基因：

1)其核苷酸序列是序列表中序列1；

2)其編碼序列是序列表中序列1第59-1054位所示；

3)在嚴(yán)格條件下與1)或2)的基因雜交且編碼所述蛋白的基因；