[發(fā)明專利]一種細腳擬青霉誘變菌株及其培育方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110427264.1 | 申請日: | 2011-12-20 |
| 公開(公告)號: | CN102533567A | 公開(公告)日: | 2012-07-04 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 滕利榮;杜林娜;宋佳;逯家輝;孟慶繁;孟令軍 | 申請(專利權(quán))人: | 吉林大學(xué) |
| 主分類號: | C12N1/14 | 分類號: | C12N1/14;C12N15/01;C12R1/79 |
| 代理公司: | 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司 22100 | 代理人: | 陳宏偉 |
| 地址: | 130012 吉*** | 國省代碼: | 吉林;22 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 細腳擬 青霉 誘變 菌株 及其 培育 方法 | ||
1.一種細腳擬青霉誘變菌株,其保藏號為:CCTCC?NO:M?2011145。
2.?培養(yǎng)權(quán)利要求1所述細腳擬青霉菌株的方法,包括以下步驟:
1)將細腳擬青霉原始菌株P(guān)aecilomyces?tenuipes?Samson?Pt196,接種于PDA斜面,24-26℃恒溫箱中培養(yǎng)3-7天,向斜面試管中注入無菌生理鹽水,振蕩后用無菌脫脂棉過濾,稀釋成濃度為3×107個/mL的孢子懸液;
2)取制備得到的孢子懸液5mL,轉(zhuǎn)入滅菌包裝袋內(nèi)進行高壓處理;
在溫度26℃、壓力200M?Pa條件下處理30min后;
?取高壓處理后孢子懸液于無菌蒸餾水中逐級稀釋,PDA培養(yǎng)基平板培養(yǎng)3-4天后,將菌株于96孔板保存;
3)利用平板初步篩選生長迅速的菌株;
4)將篩選獲得的菌株在搖瓶中復(fù)蘇,傳代后26℃,150rpm?恒溫搖床中培養(yǎng)4天,得菌絲體,測定菌絲體干重、多糖、甘露醇、以及腺苷含量,篩選高產(chǎn)的細腳擬青霉菌株;
5)獲得的高產(chǎn)細腳擬青霉誘變菌株經(jīng)過連續(xù)傳代,培養(yǎng)條件為26℃,150rpm?恒溫搖床中培養(yǎng)96h,測定菌絲體干重、多糖、甘露醇、以及腺苷含量,考察誘變菌株的遺傳穩(wěn)定性,從而最終確定目的菌株。
3.?培養(yǎng)權(quán)利要求1所述細腳擬青霉菌株的培養(yǎng)基,其特征在于是由以下藥物按重量份數(shù)比制成的:
葡萄糖?40?g/L、?牛肉膏?10?g/L、大豆蛋白胨?10?g/L、?KH2PO4?0.688?g/L、?MgSO4·7H2O?1?g/L、NaCl?0.5?g/L、VB1?0.201?g/L、VB12?0.130?g/L。
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