[發(fā)明專利]MUC1蛋白核酸適配子、復(fù)合體、組合物及其用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110425169.8
• 申請(qǐng)日: 2011-12-16
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103160513A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-06-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊先達(dá);胡燕
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所
• 主分類號(hào): C12N15/115
• 分類號(hào): C12N15/115;A61K47/48;A61K47/26;A61K49/10;A61P35/00
• 代理公司: 北京戈程知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及MUC1蛋白核酸適配子、復(fù)合、組合物及其用途。

背景技術(shù)

化療是治療腫瘤最主要的手段，尤其是對(duì)于晚期階段的轉(zhuǎn)移性腫瘤。但是，細(xì)胞毒藥物產(chǎn)生的副作用往往限制了化療的效果。細(xì)胞毒藥物最主要的問(wèn)題是它們能同時(shí)損傷腫瘤細(xì)胞和正常組織，引起嚴(yán)重的副反應(yīng)，限制了化療的強(qiáng)度和時(shí)程。因此，細(xì)胞毒藥物很難能夠清除體內(nèi)的腫瘤細(xì)胞，進(jìn)而導(dǎo)致了臨床上治療的失敗和患者預(yù)后的不良。基于這一點(diǎn)，需要研發(fā)新的方法來(lái)降低化療藥物的毒性。靶向治療是實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)的途徑之一。靶向治療是指靶向分子攜帶藥物特異性地到達(dá)腫瘤部位，使藥物更多的富集在腫瘤組織中，而在正常組織中的含量較少。由于藥物被特異性地帶到腫瘤部位，對(duì)腫瘤組織的殺傷增強(qiáng)而對(duì)正常組織殺傷較弱，從而有助于清除體內(nèi)的腫瘤細(xì)胞，并大大降低毒副作用。靶向治療是有希望改善抗腫瘤化療療效的重要方向之一。已有文獻(xiàn)報(bào)道，核酸適配子作為靶向分子的納米載體攜帶順鉑在小鼠腫瘤模型中能夠顯著增強(qiáng)抗前列腺癌的效果(Dhar?S，Gu?FX，Langer?R，F(xiàn)arokhzad?OC，Lippard?SJ(2008)Targeted?delivery?of?cisplatin?to?prostate?cancer?cells?by?aptamer?functionalized?Pt(IV)prodrug-PLGA-PEG?nanoparticles.Proc?Natl?Acad?Sci?U?S?A?105：17356-17361.)。單克隆抗體和藥物共價(jià)連接已經(jīng)用于腫瘤的靶向治療研究。其中，HER2抗體和一種化學(xué)藥物形成的復(fù)合體正在進(jìn)行III期臨床試驗(yàn)(Vogel?CL，Burris?HA，Limentani?S，Borson?R，O′Shaughnessy?J，etal.(2009)A?phase?II?study?of?trastuzumab-DM1(T-DM1)，a?HER2antibody-drug?conjugate(ADC)，in?patients(pts)with?HER2+metastatic?breast?cancer(MBC)：Final?results.Journal?of?Clinical?Oncology?27.)。

靶向藥物傳遞系統(tǒng)通常包括抗腫瘤藥物和靶向分子，靶向分子能夠和表達(dá)在腫瘤細(xì)胞表面的腫瘤標(biāo)志物特異性的結(jié)合。一個(gè)理想的分子靶標(biāo)最好是表達(dá)在腫瘤細(xì)胞膜表面，并且在腫瘤部位高表達(dá)而正常組織低表達(dá)或不表達(dá)。MUC1蛋白是一種廣泛的表達(dá)在多種腫瘤細(xì)胞膜上的糖蛋白，在大多數(shù)腺癌(乳腺癌、肺癌、結(jié)腸癌等)中高表達(dá)，表達(dá)量是正常組織的10倍以上(Taylor-Papadimitriou?J，Burchell?J，MilesDW，Dalziel?M(1999)MUC1and?cancer.BBA-Mol?Basis?Dis?1455：301-313.)，因而是一個(gè)較為理想的靶標(biāo)。MUC1蛋白由肽核心和糖鏈組成，肽核心是一段可變的重復(fù)序列，是具有免疫原性的部分，正常表達(dá)時(shí)，糖鏈的存在使肽核心隱蔽起來(lái)，失去免疫原性，腫瘤組織中異常表達(dá)時(shí)，由于糖鏈的丟失而使肽核心部分暴露了出來(lái)，成為治療的靶點(diǎn)。現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)MUC1蛋白的篩選也是應(yīng)用這段多肽作為靶標(biāo)，這可能是由于很難獲得整個(gè)MUC1蛋白。

靶向治療的實(shí)現(xiàn)還需要合適的靶向分子，理想的靶向分子是能夠和靶標(biāo)特異性結(jié)合，親和力高，在體內(nèi)免疫原性弱，穩(wěn)定性好。最近，一批新的靶向分子例如核酸適配子、短肽和小分子已經(jīng)成為了新一代的靶向分子。核酸適配子(aptamer)是近幾十年發(fā)展起來(lái)的新型核苷酸配體分子，特異性強(qiáng)，親和力高，相比抗體有許多優(yōu)勢(shì)，例如易于大規(guī)模合成，價(jià)格便宜，易于體外修飾，體內(nèi)低免疫原性，易于穿透腫瘤組織等。因此，核酸適配子越來(lái)越廣泛的作為靶向載體工具應(yīng)用到腫瘤的靶向治療研究中。根據(jù)已有的報(bào)道，F(xiàn)erreira小組篩選到了一組MUC1蛋白的適配子，能夠選擇性的和MUC1陽(yáng)性的腫瘤細(xì)胞結(jié)合，并且，篩選出來(lái)的適配子還可在體外選擇性的攜帶光動(dòng)力治療劑到MUC1陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞(Ferreira?CS，Cheung?MC，Missailidis?S，Bisland?S，Gariepy?J(2009)Phototoxic?aptamers?selectively?enter?and?kill?epithelialcancer?cells.Nucleic?Acids?Res?37：866-876.)。