[發(fā)明專利]一種藥物的指紋圖譜及其測(cè)定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110422716.7
• 申請(qǐng)日: 2011-12-16
• 公開（公告）號(hào): CN103163260A
• 公開（公告）日: 2013-06-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄔智剛;朱小蘭;柯瀟
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 成都康弘制藥有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種藥物指紋圖譜的測(cè)定方法，其特征在于包含

(a)供試品溶液的制備：取中藥提取物，精密稱量，置于容量瓶中，加乙醇溶解、定容、過濾即得供試品；

(b)色譜條件：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料；采用梯度洗脫，流動(dòng)相A：乙腈；流動(dòng)相B：0.1％甲酸和20mM醋酸銨水溶液；檢測(cè)波長為254nm；

(c)測(cè)定：精密吸取供試品溶液注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測(cè)定，得到指紋圖譜；

其中所述的藥物為大黃提取物、黃連提取物、黃芩提取物或上述三種提取物組成的中藥制劑。

2.根據(jù)權(quán)利要求1任一項(xiàng)所述藥物指紋圖譜的測(cè)定方法，其特征在于所述供試品溶液的制備方法如下：精密稱量藥物置于50ml量瓶中，加入75％乙醇約40ml，超聲40min，加75％乙醇至刻度，搖勻，取適量溶液過0.45um濾膜，取續(xù)濾液，即得供試品；其中所述藥物為黃連提取物0.09g、大黃提取物0.27g、黃芩提取物0.14g或中藥制劑0.5g的一種。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物指紋圖譜的測(cè)定方法，其特征在于所述中藥制劑的制備方法為黃連660g、大黃2000g、黃芩1000g；制法為：以上三味藥材，分別加水煎煮兩次，第一次1.5小時(shí)，第二次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液分別減壓濃縮，噴霧干燥，制得黃芩浸膏粉及大黃、黃連的混合浸膏粉。兩種浸膏粉分別制顆粒，干燥，粉碎，加入淀粉、滑石粉和硬脂酸鎂適量，混勻，裝入膠囊，制成1000粒，即得。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述藥物指紋圖譜的測(cè)定方法，其特征在于所述高效液相色譜儀的紫外檢測(cè)器出來的溶液經(jīng)過分流，進(jìn)入質(zhì)譜儀進(jìn)行物質(zhì)測(cè)定。

5.根據(jù)權(quán)利要求5所述藥物指紋圖譜的測(cè)定方法，其特征在于所述質(zhì)譜儀檢測(cè)條件如下：電噴霧電離，正離子模式和負(fù)離子模式檢測(cè)，氮?dú)庾鳛榍蕷狻⑤o助氣和吹掃氣；全掃描質(zhì)量范圍：100-1000amu；二級(jí)質(zhì)譜用數(shù)據(jù)依賴模式采集，全掃描圖譜中響度強(qiáng)度最高的2個(gè)峰用于二級(jí)質(zhì)譜分析，高純氦氣用作碰撞氣，碰撞能量為35ev。

6.根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物指紋圖譜的測(cè)定方法，其特征在于所述正離子模式檢測(cè)條件：噴霧電壓4.5kV：鞘氣為20arb，輔助氣為5arb，吹掃氣為2arb；毛細(xì)管溫度：275℃，毛細(xì)管電壓為25V；所述負(fù)離子模式檢測(cè)條件：噴霧電壓4.5kV：鞘氣為20arb，輔助氣為5arb，吹掃氣為2arb；毛細(xì)管溫度：275℃，毛細(xì)管電壓為25V。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物指紋圖譜的測(cè)定方法，其特征在于所述的色譜柱為安捷倫的Eclipse?Plus?C18。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的藥物指紋圖譜的測(cè)定方法，其特征在于所述梯度洗脫的程序如下：其中下述比例為體積比

0min時(shí)，流動(dòng)相A∶流動(dòng)相B＝5∶95

5min時(shí)，流動(dòng)相A∶流動(dòng)相B＝14∶86

25min時(shí)，流動(dòng)相A∶流動(dòng)相B＝20∶80

50min時(shí)，流動(dòng)相A∶流動(dòng)相B＝25∶75

80min時(shí)，流動(dòng)相A∶流動(dòng)相B＝60∶40

85min時(shí)，流動(dòng)相A∶流動(dòng)相B＝80∶20

91min時(shí)，流動(dòng)相A∶流動(dòng)相B＝80∶20

92min時(shí)，流動(dòng)相A∶流動(dòng)相B＝5∶95

100min時(shí)，流動(dòng)相A∶流動(dòng)相B＝5∶95；

其中柱溫為25-30℃，流速為1.0ml/min。