[發(fā)明專利]利用豬皮制備膠原蛋白抗氧化肽的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110420457.4
• 申請日: 2011-12-15
• 公開（公告）號: CN102517367A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張慧蕓;朱文學(xué);劉麗莉;康懷彬;楊芳寧;莊軍輝
• 申請（專利權(quán)）人: 河南科技大學(xué)
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C12R1/10;C12R1/125
• 代理公司: 洛陽公信知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)所(普通合伙) 41120
• 代理人: 張彬

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種抗氧化肽的制備方法，具體的說是一種利用豬皮制備膠原蛋白抗氧化肽的方法。

背景技術(shù)

我國是一個養(yǎng)豬大國，隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，養(yǎng)豬業(yè)也得到了飛速的發(fā)展，據(jù)資料顯示，我國豬的存欄數(shù)、出欄數(shù)、豬肉產(chǎn)量多年來均位居世界第一位，中國豬肉產(chǎn)量約占世界產(chǎn)量的一半之多，豬肉的產(chǎn)量占我國肉類總產(chǎn)量的69.4%。在生產(chǎn)豬肉的同時會產(chǎn)生大量的副產(chǎn)物，豬皮就是其中之一。動物皮膚最重要的一個應(yīng)用就是制革，但由于豬皮本身質(zhì)地不佳，目前在皮革工業(yè)中已經(jīng)很少采用豬皮，另外，由于豬皮有令人難以接受的特有異味、不良的口感、消化率低、加工不方便等原因常將其扔棄，很少直接使用，造成了豬皮的大量積壓，豬皮的營養(yǎng)價值和功用沒有得到充分的發(fā)揮。

據(jù)報道，豬皮中蛋白質(zhì)的含量高達33%以上，其中膠原蛋白含量為88%左右，其營養(yǎng)價值十分可觀。膠原蛋白由于特殊復(fù)雜的空間結(jié)構(gòu)，其分子量高達300KD，相對于膠原蛋白肽而言很難被人體吸收，因此，通過生物手段把膠原蛋白水解為具有抗氧化、免疫等多種生理調(diào)節(jié)功能小分子的多肽物質(zhì)，是極具發(fā)展前景的功能因子。

目前國內(nèi)外研究者多采用酶法水解膠原蛋白，利用蛋白酶催化活性肽的合成，最明顯的副作用是蛋白酶本身的水解作用，會造成許多不必要的產(chǎn)物生成，此外缺乏適合使用的蛋白酶、產(chǎn)率低等技術(shù)問題也限制酶法的廣泛應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對上述問題的不足，提供利用豬皮制備膠原蛋白抗氧化肽的方法，其工藝簡單，便于操作，提高豬皮的利用價值，增加經(jīng)濟效益。

本發(fā)明中所用的枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌，為一般市售產(chǎn)品，而本發(fā)明中所用的枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌均購買于中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心，枯草芽孢桿菌的保藏編號為（CICC10063），地衣芽孢桿菌的保藏編號為（CICC20197）。

本發(fā)明為解決上述問題所采用的技術(shù)方案是：利用豬皮制備膠原蛋白抗氧化肽的方法，所述的制備方法為：

步驟一、按重量百分比取3—6%的濃度大于90%的豬皮膠原蛋白和94—97%的水，混合均勻，形成豬皮膠原蛋白溶液，利用0.45μm的微孔率膜對豬皮膠原蛋白溶液進行過濾，滅菌，備用；

步驟二、按重量份數(shù)比取2份的枯草芽孢桿菌菌液和1份的地衣芽孢桿菌菌液，混合均勻，形成混合菌液，備用；

步驟三、按重量百分比將3—6%的混合菌液接種到94—97%的步驟一中經(jīng)過滅菌后的豬皮膠原蛋白溶液中，在32—37℃條件下，發(fā)酵培養(yǎng)24—72小時，形成發(fā)酵液，備用；

步驟四、將步驟三中得到的發(fā)酵液送入離心機內(nèi)，以轉(zhuǎn)速為10000轉(zhuǎn)/分鐘，離心30分鐘，取離心后的上清液并經(jīng)過0.45μm的微孔率膜過濾，得到濾液，備用；

步驟五、將步驟四中得到的濾液通過截流分子量為1000—5000的超濾膜過濾，得到產(chǎn)品。

有益效果

本發(fā)明通過豬皮制備豬皮膠原蛋白抗氧化肽的方法，其得到的豬皮膠原蛋白抗氧化肽的分子量為1000Da—5000Da，具有較高的抗脂質(zhì)氧化活性、清除自由基的能力和螯合金屬離子能力。

本發(fā)明的制備方法，工藝簡單，便于操作，制得的抗氧化肽分子量小，更易被消化道直接吸收，且不含有害成分及毒副作用，適合大規(guī)模生產(chǎn)，能夠有效提高豬皮中膠原蛋白資源的利用率，提高豬皮資源的附加值。

豬皮中蛋白質(zhì)的含量高達33%以上，其中膠原蛋白含量為88%左右，膠原蛋白由于特殊復(fù)雜的空間結(jié)構(gòu)，其分子量高達300KD，很難被人體吸收，通過微生物發(fā)酵把膠原蛋白水解為具有抗氧化、免疫等多種生理調(diào)節(jié)功能小分子的多肽物質(zhì)，是極具發(fā)展前景的功能因子，本發(fā)明利用微生物發(fā)酵豬皮膠原蛋白生產(chǎn)膠原蛋白多肽，以產(chǎn)蛋白酶的發(fā)酵菌株代替昂貴的商品酶制劑，降低成本，另外利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)多肽時，微生物可對肽的基團進行修飾、重組，制得的肽無異味，可廣泛用于食品和醫(yī)藥行業(yè)。

本發(fā)明的制備方法，提高經(jīng)濟效益，降低生產(chǎn)成本，減少資源浪費。

具體實施方式

利用豬皮制備膠原蛋白抗氧化肽的方法，所述的制備方法為：

步驟一、按重量百分比取3—6%的濃度大于90%的豬皮膠原蛋白和94—97%的水，混合均勻，形成豬皮膠原蛋白溶液，利用0.45μm的微孔率膜對豬皮膠原蛋白溶液進行過濾，滅菌，備用；

步驟二、按重量份數(shù)比取2份的枯草芽孢桿菌菌液和1份的地衣芽孢桿菌菌液，混合均勻，形成混合菌液，備用；