[發明專利]SAA1β/β純合子基因型在肝硬化預后診斷及肝硬化診斷中的應用

有效

• 申請號: 201110418882.X
• 申請日: 2011-12-15
• 公開（公告）號: CN103160575A
• 公開（公告）日: 2013-06-19
• 發明（設計）人: 王榮芳;吳峻;張艷;錢震斌
• 申請（專利權）人: 王榮芳;吳峻;張艷;錢震斌
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 上海麥其知識產權代理事務所(普通合伙) 31257
• 代理人: 董紅曼

技術領域

本發明涉及肝硬化預后診斷及肝硬化診斷，具體地涉及了血清淀粉樣蛋白A1(SAA1)SAA1β/β純合子基因型作為肝硬化的危險因子在肝硬化預后診斷中的應用和作為肝硬化的生物標記物在肝硬化診斷中的應用。

背景技術

肝硬化(Cirrhosis)是臨床常見的慢性進行性肝病，由一種或多種病因長期或反復而作用形成的彌漫性肝損害。肝硬化是肝細胞發生壞死及炎癥刺激時，肝臟內纖維結締組織異常增生的病理過程；過度纖維化使肝臟萎縮變硬，最終引起肝硬化失代償或肝功能衰竭而導致患者死亡。

早在2002年，WHO統計數據即顯示全球每年死于肝硬化的人數近8萬例。至2010年，肝硬化已經是公認的導致人類死亡的前10大疾病。因此，肝硬化已成為全球性的公共健康問題，發病率之高，危害之重，不容忽視。由于導致肝硬化最常見的病因為乙肝(HBV)或丙肝病毒(HCV)感染，世界人口總數的約1/3(20億)感染過或正在感染乙肝病毒，其中有3.5億人為終身感染者。而我國的HBV感染率已經高達10％。因此，由HBV和HCV感染導致的肝硬化在我國的發病逐年增加。據不完全統計，我國慢性乙型肝炎病人約為2000萬人，其中近25～30萬慢性乙肝病人可發展為肝硬化，其中5～20萬可能發展為肝癌。而我國每年死于肝硬化的人數高達20萬。因此，如果能夠發現易感人群并進行早期診斷和干預，則會大大降低肝硬化乃至肝癌的發病率，降低患者死亡率、減少醫療費用并提高患者的生活質量；同時，肝硬化易感人群的發現對于了解其發病機理并尋找干預手段也有重要科學意義和臨床應用價值，這將對人類最終攻克這一頑疾有重要意義。

人類血清淀粉樣蛋白A1(Serum?Amyloid?A1，SAA1)是一種由104個氨基酸組成的急性期反應蛋白。其在天然狀態時的分子量大約為12-14kDa，其編碼基因位于人類第11號染色體。早期的研究認為SAA1是一種急性炎性蛋白，因為在急性炎癥中，SAA1可由肝臟活化的巨噬細胞和纖維母細胞合成，濃度達正常水平的100-1000倍(正常值一般為910±270微克/升)。此外，SAA1在生理狀態下可與高密度脂蛋白(HDL)結合，在炎癥期間通過調節高密度脂蛋白代謝而使其水平升高。但是，近年來大量研究表明：SAA1已經不僅是傳統意義上的急性期炎癥蛋白，而是作為天然固有免疫的調理素，SAA1可與IL-6、TNF-a等炎癥性細胞因子相互作用，參與調節機體的固有免疫和獲得性免疫。如已經發現SAA1在糖尿病、冠心病、類風濕性關節炎(RA)等慢性炎癥疾病和自身免疫病的發生、發展中扮演了重要的角色。

在肝臟疾病發生中，香港大學He博士等發現，在由肝炎引起的肝硬化及肝癌病人的肝組織中，SAA1蛋白明顯增高。眾所周知，乙肝病毒感染后有著“肝炎-肝硬化-肝癌”三部曲表現，其中肝硬化是基于病毒侵犯肝臟后導致肝細胞長期慢性炎癥、肝細胞死亡并由肝臟纖維組織增生發展而來。其中，SAA1是否參與上述病變至今未見報道。但是法國巴斯德研究所的研究表明：SAA1蛋白與肝炎病毒的感染有著密切的關系，乙肝病毒X基因(該基因與肝硬化及肝癌形成有關)轉基因小鼠的肝組織中SAA1蛋白表達明顯受抑，提示SAA1可能與HBV感染和后續病變有關。因此，本發明提出SAA1蛋白與乙肝引起的肝硬化相關、通過SAA1蛋白變化檢測或判斷肝硬化發病、診斷和干預的新的應用方法。

基因多態性(Polymorphism)是指在一個生物群體中，同時存在兩種或多種不連續的變異型或基因型或等位基因，亦稱遺傳多態性(Genetic?Polymorphism)或基因多態性。基因單核苷酸多態性(Single?Nuclear?Ploymorphism，SNP)是指基因序列內的單個堿基的不同，包括單個堿基的缺失，插入和置換。人類基因多態性與疾病發生和診斷與治療有密切的關系，多態性的變化不僅在闡明機體對疾病、毒物的易感性與耐受性、疾病臨床表現的多樣性，以及對藥物治療的反應性和預測轉歸上都起著重要的作用。通過基因多態性的研究，可從基因水平揭示個體間生物活性物質的功能及效應存在著差異的本質。因此，基因多態性研究已經成為臨床醫學及預防醫學研究的新領域。

由于基因多態性有明顯的種族差異，在不同種族之間可能表現出很大差異。所以，開展我國人群中與肝硬化相關的基因多態性研究具有重要的意義。通過對于肝硬化易感基因多態性研究，建立對易感性生物標志物的分析方法，將某些攜帶敏感基因型的人甄別開來，便于采取針對性預防、在HBV感染人群中早期診斷肝硬化、對于接受治療的肝硬化患者通過多態性分析預測其治療效果和預后轉歸等都有重要價值。