[發明專利]一株產胞外多糖的短乳桿菌及其應用

有效

• 申請號: 201110401343.5
• 申請日: 2011-12-06
• 公開（公告）號: CN102533588A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 艾連中;郭本恒;孫克杰;陳衛;張灝;邵麗;吳正鈞;陳萬義;穆海菠
• 申請（專利權）人: 光明乳業股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C08B37/00;A61K31/715;A61P37/04;A23P1/00;A23C9/123;A23L1/09;A23L1/30;C12R1/24
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 朱水平;沈利

技術領域

本發明涉及微生物技術領域，特別涉及一株產胞外多糖的短乳桿菌(Lactobacillus?brevis)及其在食品中的應用。

背景技術

乳酸菌(Lactic?acid?bacteria，LAB)是一類能利用可發酵性糖產生大量乳酸的細菌總稱，目前在自然界已發現的這類細菌在分類學上至少有23個屬。在食品、醫藥等領域應用較多的乳酸菌主要有乳桿菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬、乳球菌屬、片球菌屬和明串珠菌屬等。乳酸菌是益生菌最主要的來源，許多乳酸菌是人體腸道固有的益生菌，已具有改善人體腸道菌群，調節機體免疫力，抑腫瘤，降低血清膽固醇，調節血壓等重要的生理活性。

人類對乳酸菌在發酵乳制品和微生態制劑中的應用已取得了顯著的進展。目前研究的熱點是如何通過新型微生物發酵劑的開發而賦予發酵乳特定的功能性質。已知的乳酸菌發揮主要功能特性的作用機理，除了定殖、通過主要代謝產物(乳酸等)改善腸道內環境等以外，一些次生代謝產物如細菌素、胞外多糖等也發揮著非常重要的作用。其中具有理論和實際應用價值的乳酸菌胞外多糖(LAB?EPS)引起了國內外許多學者的研究興趣。

乳酸菌胞外多糖是乳酸菌產生并分泌到細胞外的一種多糖。與其他微生物多糖相比，乳酸菌EPS具有自己的特點，如良好的流變學特性，能改善發酵乳的風味、質地和性質，使產品增稠、穩定、乳化、保濕及膠凝，質地細膩均勻，口感潤滑，是一種安全的食品添加劑。EPS還具有良好的生理功能，如增強黏膜吸附作用、抗腫瘤、抗潰瘍、免疫調節、降膽固醇、降血壓等。因此，開展產胞外多糖乳酸菌的研究，對于改善乳制品生產加工、開發具有特定功能性質的乳酸菌發酵乳制品，具有十分重要的研究意義和經濟價值。開發具有益生功能的LAB?EPS成為目前研究的熱點。

發明內容

本發明要解決的技術問題就是針對現有技術中缺乏高產胞外多糖的乳酸菌的不足，提供一株較高產胞外多糖的短乳桿菌(Lactobacillus?brevis)。

本發明的技術方案如下：

本發明技術方案一：一株產胞外多糖的短乳桿菌(Lactobacillus?brevis)，其保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號CGMCC?No.5223。

本發明的技術方案二：一種短乳桿菌CGMCC?No.5223的工作發酵劑，由包括以下步驟(a)或(b)的方法制備而得：

(a)將短乳桿菌CGMCC?No.5223菌種接種于滅菌乳中培養至凝乳，連續培養活化兩代作為母發酵劑；將母發酵劑按3-5％(v/v)接種于滅菌乳中培養至凝乳，即得工作發酵劑；

(b)將短乳桿菌CGMCC?No.5223菌種接種于液體培養基中連續活化兩代，然后將活化培養物按2-4％(v/v)接種于液體培養基中培養16-18h，固液分離得到細胞沉淀，將沉淀用無菌乳懸浮，即得工作發酵劑。

步驟(a)中，培養至凝乳的方法是常規方法，較佳的在37℃條件下培養14-16h。

步驟(b)中，在液體培養基中活化的方法是短乳桿菌的常規活化方法，較佳的在37℃條件下培養12-16h。所用的液體培養基是常規的短乳桿菌液體培養基，較佳的如MRS液體培養基。固液分離的方法是常規的菌體發酵液的固液分離方法，包括離心法、過濾法等，本發明優選離心法，更優選在4℃條件下4000r/min離心15min。

本發明所述的短乳桿菌CGMCC?No.5223的工作發酵劑中，活菌數優選10⁹cfu/mL以上。

本發明技術方案三：短乳桿菌CGMCC?No.5223在發酵食品中的用途。

其中，所述的發酵食品是常規的發酵類食品，優選乳酸菌奶飲料或者發酵乳。

優選的，所述的乳酸菌奶飲料是按照下述步驟制備的：原料乳滅菌后冷卻然后加入短乳桿菌CGMCC?No.5223工作發酵劑混合均勻，使短乳桿菌CGMCC?No.5223濃度達到10⁶cfu/mL以上，即得到含有所述短乳桿菌的乳酸菌奶飲料。

其中，所述的滅菌方法是常規的原料乳滅菌方法，較佳的如超高溫瞬時滅菌，更佳的如在95℃下加熱殺菌20min或在140℃下高溫熱殺菌2s。待滅菌乳冷卻后再加入所述的短乳桿菌工作發酵劑，冷卻溫度常規，較佳的冷卻到40℃。