[發明專利]一種黃酮化合物預防或治療炎癥性疾病的用途

有效

• 申請號: 201110398561.8
• 申請日: 2011-12-05
• 公開（公告）號: CN102488675A
• 公開（公告）日: 2012-06-13
• 發明（設計）人: 陳君;李萍;李艷靜;付鈺
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: A61K31/12
• 分類號: A61K31/12;A61P29/00;A61P1/16;A61P19/02;A61P1/00;A61P9/10
• 代理公司: 南京蘇科專利代理有限責任公司 32102
• 代理人: 孫立冰

技術領域

本發明涉及天然藥物領域，具體涉及一種黃酮化合物(I)用于預防或治療炎癥性疾病的用途。

背景技術

炎癥是機體對各種致炎因子引起組織損害而產生的一種基本防御反應，也是許多疾病的重要組成部分，主要表現為組織細胞發生形態結構不同程度的損傷、充血、腫脹、滲出、變性、血管破壞壞死或增生栓塞、局部缺血、缺氧伴有代謝機能改變、循環障礙、血流變異等過程。研究表明，在炎癥發生過程中有多種細胞如成纖維細胞、巨噬細胞、白細胞等參與，在細胞水平主要表現為炎癥細胞趨化、游走、聚集和浸潤以及炎癥細胞等效應細胞活化；在分子水平則主要是炎癥介質或細胞因子基因激活，并合成和釋放大量炎癥介質，包括腫瘤壞死因子(Tumor?necosis?factor?α，TNF-α)、白細胞介素(IL)、干擾素(IFN)等細胞因子，以及誘導iNOS生成，促進合成和釋放一氧化氮(NO)。現代研究日益表明，炎癥反應是現代醫學多系統疾病研究中的熱點環節，參與多種疾病如肝炎、關節炎、炎癥性腸病、動脈粥樣硬化等的發病過程。

在現有的具有抗炎作用的藥物中，化學合成類抗炎藥是臨床中使用最廣泛的一類藥物，但其副作用較常見，主要表現為胃腸道、肝、腎、血液、神經系統等不良反應及過敏反應。尋找藥效強、副作用小的天然抗炎藥物一直是新藥研發的重要方向。

發明內容

本發明公開了一種結構式(I)的黃酮化合物的醫藥用途：

該黃酮化合物的藥學上可接受的鹽也具有與化合物(I)一樣的功效。

藥理試驗證明，本發明化合物(I)具有優異的抗炎功能，可用于治療或預防炎癥性疾病，所述炎癥性疾病優選肝炎、關節炎、炎癥性腸病或動脈粥樣硬化。

本發明對化合物(I)進行了抗炎作用的活性評價試驗。該化合物對脂多糖誘導的巨噬細胞RAW264.7釋放的炎癥因子，均有明顯的抑制作用；利用二甲苯誘發小鼠耳腫脹模型進行了抗炎活性的藥效研究，結果表明該化合物具有良好的抗炎癥作用。因此，可以認為該化合物可通過抑制炎癥反應，達到治療肝炎、關節炎、炎癥性腸病、動脈粥樣硬化等各種炎癥性疾病的作用。

本發明的化合物(I)可通過添加藥學上可接受的載體制備成各種劑型，如錠劑、丸劑、膠囊劑、散劑、顆粒劑等固體制劑，溶液、懸浮液、乳劑等液態制劑。另外，也可采用非口服方式使用靜脈內、肌肉、皮下等的注射劑、栓劑、貼劑等進行。

下面是本發明化合物(I)的部分藥效學試驗及結果：

一、化合物(I)對脂多糖(LPS)活化的巨噬細胞RAW264.7釋放炎癥相關因子的影響

方法：用含10％小牛血清的DMEM培養液于37℃，5％CO₂及飽和濕度條件下培養巨噬細胞RAW264.7。取對數生長期狀態良好的細胞，用0.25％胰蛋白酶消化，制成細胞懸液，調整細胞密度至3.5×10⁵個/mL，每孔400μL細胞懸液接種入96孔板，置于細胞培養箱內培養24小時；小心吸棄孔內培養上清液，加入不同濃度的受試藥物200μL，1小時后加入200μLLPS(1000ng/mL)，培養24h；同時設相應的陰性對照組。每組分別設3個復孔；等量DMSO-EtOH(1∶1，v/v)作為陰性對照，培養體系中有機溶劑濃度不超過1％。收集細胞培養上清液，取樣分析或立即轉移至-70℃凍存，臨用前取出。

1)化合物(I)對細胞活力的影響

每孔加入450μLDMEM，再加入50μLMTT溶液(5mg/mL)，37℃下繼續培養4小時；小心吸棄孔內培養上清液，每孔加入500μL?DMSO，振蕩3min，使結晶充分溶解；每孔吸取50μL轉移至96孔板，選擇570nm波長，在酶聯免疫檢測儀上測定各孔光吸收值(OD值)，取3個復孔OD值平均數，計算細胞活力。實驗結果表明，在給藥劑量下對細胞活力沒有顯著影響。

2)化合物(I)對巨噬細胞RAW264.7生成NO的影響

本實驗以亞硝酸鹽(NO₂^-)含量代表NO生成量。取培養上清液100μL，加入等體積Griess試劑(1.0％對氨基苯磺酰胺，0.1％萘乙二胺鹽酸鹽，二者均溶于5％磷酸，臨用前按1∶1混合)，反應15分鐘，選擇540nm波長，在酶聯免疫檢測儀上測定各孔OD值，取3個復孔OD值平均數。以亞硝酸鈉標準溶液繪制標準曲線，計算培養上清液中生成亞硝酸鹽的量。