[發明專利]用于確定鈷60輻照滅活動物源性生物材料病毒的方法

無效

• 申請號: 201110393574.6
• 申請日: 2011-12-01
• 公開（公告）號: CN102399908A
• 公開（公告）日: 2012-04-04
• 發明（設計）人: 錢垂文;王一飛
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12R1/93
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 裘暉

技術領域

本發明屬于生物醫學工程領域，具體涉及一種用于確定鈷60輻照滅活動物源性生物材料病毒的方法。

背景技術

醫療器械種類廣泛，其中包括各種動物組織材料。動物組織和其衍生物在特性方面要優于無生命體材料如金屬、塑料或者紡織品。

動物組織材料的數量和品種也是多樣的。動物組織材料可以作為醫療器械的主要組成(如豬、牛的心臟，羊腸縫合線、止血材料等)，或者是醫療器械產品外結構或者鞏固體(如肝磷脂、凝膠、膠原等)，或者用于生產加工過程(如動物脂)。所以，動物源性醫療器械產品在所有醫療器械產品中占有重要比例。

目前國內市場上的動物源性醫療器械根據國家食品藥品監督管理局2002年發布的醫療器械產品分類目錄分為三類，三類醫療器械是：植入材料，如：異種皮質骨、人工骨，骨修復材料、骨填充材料，心臟或組織修補材料，如：牛或豬心包生物瓣膜、心臟補片；眼內充填材料，如：醫用透明質酸鈉等；接觸式人工器官，如：人工皮膚、異體脫細胞真皮；醫用衛生材料及敷料中可吸收性止血、防粘性材料，如：生物蛋白膠、醫用膠原膜、透明質酸；醫用縫合材料中：醫用可吸收膠原縫合線、羊腸線等，部分含異種動物血清的體外診斷試劑，如：高密度脂蛋白膽固醇試劑盒等。

對于動物來源的要求，必須是非疫區國家。根據國藥監械2002[112]號文件規定，禁止來自疫區的牛羊組織細胞等醫療器械產品進入中國。歐盟中只有瑞典是唯一未發生過BSE的國家。

為了提高動物源性生物材料使用的安全性，盡量消除人獸共患病以及相關的潛在風險(如：瘋牛病，口蹄疫，禽流感等)，因此必須對動物源性生物材料制備過程中的病毒滅活(去除)工藝進行驗證(評價)。但到目前為止，國家尚未有相關的技術標準出臺，因此為相關企業提供有效的病毒滅活/去除的技術指導方案尤為迫切。

發明內容

針對目前缺乏動物源性生物材料病毒滅活效果技術標準的現狀，本發明的目的在于提供一種用于確定鈷60輻照滅活動物源性生物材料病毒的方法。

本發明的目的通過下述技術方案實現：

一種用于確定鈷60輻照滅活動物源性生物材料病毒的方法，包括以下步驟：

(1)用指示病毒感染動物源性生物材料，然后測定動物源性生物材料中的病毒滴度值；

(2)將受指示病毒感染的動物源性生物材料進行一定劑量的鈷60輻照處理，測定處理后材料的病毒滴度值；

(3)若輻照處理前后動物源性生物材料中的病毒滴度差值大于4LgTCID50/0.1ml，則采用該輻照劑量是有效的；若滅活處理前后動物源性生物材料中的病毒滴度差值小于或等于4LgTCID50/0.1ml，則需要增大輻照劑量。

所述的指示病毒可以是RNA病毒或DNA病毒，可以是有包膜病毒或無包膜病毒；

所述的指示病毒優選豬偽狂犬病毒、豬細小病毒、科薩奇病毒3型或合胞病毒；當指示病毒為上述4種病毒時，本發明的評價方法更加準確。

所述的動物源性生物材料為骨松骨。

本發明相對于現有技術具有如下的優點及效果：

1、本發明選用指示病毒對動物源性生物材料制備過程中滅活(去除)病毒工藝進行有效評價(驗證)，從而為動物源性生物材料的使用提供安全保證，消除潛在的病毒感染風險。

2、本發明的評價方法具有操作方法簡便，評價結果可靠性高等優點。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明作進一步詳細的描述，但本發明的實施方式不限于此。

實施例1

骨松骨鈷60輻照滅活柯薩奇3型病毒效果驗證，包括以下步驟：

(1)取0.9g骨松骨(由廣東冠吳生物科技股份有限公司提供；下同)，放入9ml柯薩奇3型病毒CVB3(購自武漢病毒研究所)液(病毒滴度為5.75LgTCID50/0.1ml)中，于4℃浸泡吸附16小時，取出；將0.9g吸附了柯薩奇3型病毒CVB3的骨松骨分為3份，每份0.3g，取其中一份加入3ml無牛血清培養液研磨成10％懸液，于4000r/min離心15分鐘，吸取上清，除菌過濾，測定其中柯薩奇3型病毒CVB3的滴度值(滴度測定采用96孔細胞病變法，計算按Karber法；下同)，為對照樣本病毒滴度值；

(2)取步驟(1)中另外2份受柯薩奇3型病毒CVB3感染的骨松骨進行鈷60輻照處理，輻照劑量為20kGy；然后用3ml無牛血清培養液研磨成10％懸液，于4000r/min離心15分鐘，吸取上清，除菌過濾，測定其病毒滴度；

以上試驗重復3個批次。