[發明專利]一種檢測黃曲霉毒素M1的試劑盒

無效

• 申請號: 201110381283.5
• 申請日: 2011-11-26
• 公開（公告）號: CN103134923A
• 公開（公告）日: 2013-06-05
• 發明（設計）人: 趙春城;趙黎明;王曉東;單金蓮;錢汝文
• 申請（專利權）人: 無錫艾科瑞思產品設計與研究有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

一種檢測黃曲霉毒素M₁的試劑盒，屬于酶聯免疫吸附分析?(ELISA)技術領域，用于對乳制品中黃曲霉毒素M₁（簡稱AFM₁）含量的檢測。

背景技術

黃曲霉毒素（AFM₁)是真菌黃曲霉Hspergillus?flavus和寄生曲霉A.parasilicus?菌株產生的一組強毐性的次生代謝產物，黃曲霉毒素（AFT)目前已發現20余種，其中黃曲霉毒素?B1為毒性及致癌性最強的物質。黃曲霉毒素Ml是黃曲霉毒素B1的羥基化代謝產物，也是一種強致癌物質。當哺乳動物攝入AFB₁污染的飼料后，在體內經羥基化會將AFM₁分泌于乳汁當中。奶牛經攝入黃曲霉毒素B₁污染的飼料后產出的牛奶中便含有黃曲霉毒素M₁。由?于黃曲霉毒素M₁相當穩定，巴氏滅菌法也無法將其殺滅，所以檢測黃曲霉毒素M₁不僅要檢?測動物飼料原料，而且要檢測最終產品。為此世界各國都規定了牛乳及其制品中黃曲霉毒素M₁的最大允許含量并將其作為強制性標準，如中國政府規定牛乳及其制品（消毒牛奶、新鮮生牛乳、全脂牛奶粉、淡煉乳、甜煉乳、奶油）中黃曲霉毒素M₁的最高允許含量為0.?5μg/ml。

現有技術中常用的黃曲霉毒素檢測技術主要有薄層層析法（TLC)、高效液相色譜?法（HPLC)、免疫學分析法。前兩者具有樣品前處理步驟繁瑣，耗時費力，儀器價格昂貴，需要?專業人員操作等的缺點，而免疫學分析法具有特異性強、樣品前處理簡單、成本低、對實驗?人員和環境的污染危害小等優點。最常用的免疫學分析法有酶聯免疫吸附法、納米金免疫層析法等。

發明內容

本發明的目的在于提供一種檢測AFM₁的試劑盒，用于對乳制品中AFM₁含量的檢測。

本發明解決其技術問題所采用的技術方案是：一種檢測黃曲霉毒素M₁的試劑盒，包括盒體和盒內的一塊24孔AFM₁包被反應板，一個反應蓋板，12瓶試劑和放試劑的下凹瓶位，一個冰袋，一個框架，一份說明書，一包吸水紙，2支一次性滴管和一份質檢報告，其特征在于：包被反應板是采用24孔試劑板作為固相載體，12瓶試劑分別6瓶AFM₁標準品溶液、酶標抗原、酶標抗原稀釋緩沖液、濃縮洗滌液、底物液、顯色液、終止液，下凹瓶位共16個。

盒體是硬紙盒；24孔的AFM₁包被反應板，放于真空鋁箔袋內；框架為白色48孔塑料框架，框架孔大小與AFM₁包被反應板微孔大小相配；反應蓋板是塑料硬蓋，大小與框架大小相配；AFM₁標準品溶液均用黑色帽的棕色玻璃瓶，酶標抗原用白色帽的棕色玻璃瓶，酶標抗原稀釋緩沖液用綠色帽的白色PE塑料瓶，濃縮洗滌液用白色帽的白色PE塑料瓶，底物液用藍色帽的白色PE塑料瓶，顯色液用黑色帽的黑色PE塑料瓶，終止液用黃色帽的白色PE塑料瓶；下凹瓶位由塑料泡沫制成。

本發明的有益效果是：該試劑盒結構簡單，使用方便、廉價、靈敏度高，可以達?到0.lng/ml以上。

附圖說明

圖1是本發明的外觀示意圖。

具體實施方式

下面結合附圖，進一步說明本發明的具體實施方式：

先將樣品進行處理：

牛奶

將含脂牛奶降溫至10℃以下，3500轉/min下離心10min，用吸管棄去上層脂肪層，下層牛奶液即為待測樣液。（脫脂牛奶直接測定）。

奶粉

稱取5g奶粉于100ml三角瓶中，加入40ml蒸餾水，振搖5min，使其完全溶解（脫脂牛奶制成奶粉的固化比例為每40ml脫脂牛奶制成5克奶粉）。以下步驟同上述牛奶處理方法。

實驗準備

1、?濃縮洗滌液用蒸餾水稀釋20倍，使用前稀釋。（例如：3ml濃縮洗滌液+57ml蒸餾水，足夠24孔使用）

2、AFM₁酶標抗原工作溶液配制方法：在使用前，取1瓶AFM₁酶標抗原，準確加入1.5ml酶標抗原稀釋液，混勻，配制成實驗用AFM₁酶標抗原工作溶液，夠24孔反應板使用。

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實驗步驟