[發明專利]一種1號染色體替換實驗小鼠品系C57BL/6-Chr1AKR的構建有效
| 申請號： | 201110379644.2 | 申請日： | 2011-11-24 |
| 公開（公告）號： | CN103125446A | 公開（公告）日： | 2013-06-05 |
| 發明（設計）人： | 趙瑩;趙麗亞;劉磊;邢正弘;陳國強;肖君華 | 申請（專利權）人： | 上海西普爾-必凱實驗動物有限公司;東華大學 |
| 主分類號： | A01K67/027 | 分類號： | A01K67/027 |
| 代理公司： | 上海專利商標事務所有限公司 31100 | 代理人： | 陳靜 |
| 地址： | 201203 上*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 染色體 替換 實驗 小鼠 品系 c57bl chr1 sup akr 構建 | ||
1.一種1號染色體替換實驗小鼠品系C57BL/6-Chr1AKR的建立方法，其特征在于，所述方法包括：
(1)以AKR品系小鼠作為母本、C57BL/6品系小鼠作為父本進行雜交，獲得F1代小鼠；
(2)將F1代雄性小鼠與C57BL/6品系雌性小鼠雜交，獲得回交一代小鼠；該回交小鼠中，AKR品系小鼠中的性染色體和線粒體DNA被替換為C57BL/6品系小鼠中的性染色體和線粒體DNA；使用多核苷酸多態性位點鑒定該雄性回交小鼠的1號染色體，選擇1號染色體多核苷酸多態性位點鑒定結果為AKR品系小鼠所特有的雄性回交小鼠；使用短串聯重復序列位點鑒定選擇到的雄性回交小鼠，選擇1號染色體短串聯重復序列位點鑒定結果為AKR品系小鼠所特有的回交小鼠；
(3)將選擇到的雄性回交小鼠與C57BL/6品系雌性小鼠雜交，獲得下一代回交小鼠；
(4)使用多核苷酸多態性位點鑒定雄性回交小鼠的1號染色體，選擇1號染色體多核苷酸多態性位點鑒定結果為AKR品系小鼠所特有的雄性回交小鼠；使用短串聯重復序列位點鑒定選擇到的雄性回交小鼠，選擇1號染色體短串聯重復序列位點鑒定結果為AKR品系小鼠所特有的回交小鼠；
(5)重復步驟(3)～(4)5-50次；從而獲得染色體替代動物品系，其以C57BL/6品系小鼠為背景，且其1號染色體被AKR品系小鼠的1號染色體替換。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的1號染色體的多核苷酸多態性位點包括：
rs30719154，其在1號染色體上所處位置為chr1：3052360；在AKR品系小鼠染色體相應位置的堿基為G，在C57BL/6品系小鼠染色體相應位置的堿基為T；
rs31426703，其在1號染色體上所處位置為chr1：12720994；在AKR品系小鼠染色體相應位置的堿基為C，在C57BL/6品系小鼠染色體相應位置的堿基為T；
rs31928308，其在1號染色體上所處位置為chr1：28659508；在AKR品系小鼠染色體相應位置的堿基為A，在C57BL/6品系小鼠染色體相應位置的堿基為G；
rs32539840，其在1號染色體上所處位置為chr1：35672358；在AKR品系小鼠染色體相應位置的堿基為G，在C57BL/6品系小鼠染色體相應位置的堿基為A；
rs32139742，其在1號染色體上所處位置為chr1：40806614；在AKR品系小鼠染色體相應位置的堿基為G，在C57BL/6品系小鼠染色體相應位置的堿基為A；
rs31336640，其在1號染色體上所處位置為chr1：47136503；在AKR品系小鼠染色體相應位置的堿基為G，在C57BL/6品系小鼠染色體相應位置的堿基為A；
rs32495825，其在1號染色體上所處位置為chr1：124737843；在AKR品系小鼠染色體相應位置的堿基為G，在C57BL/6品系小鼠染色體相應位置的堿基為A；
rs30902647，其在1號染色體上所處位置為chr1：150127783；在AKR品系小鼠染色體相應位置的堿基為T，在C57BL/6品系小鼠染色體相應位置的堿基為C；
rs3678938，其在1號染色體上所處位置為chr1：158391632；在AKR品系小鼠染色體相應位置的堿基為G，在C57BL/6品系小鼠染色體相應位置的堿基為A；
rs6382951，其在1號染色體上所處位置為chr1：175245481；在AKR品系小鼠染色體相應位置的堿基為G，在C57BL/6品系小鼠染色體相應位置的堿基為A；
rs32366433，其在1號染色體上所處位置為chr1：188750111；在AKR品系小鼠染色體相應位置的堿基為C，在C57BL/6品系小鼠染色體相應位置的堿基為T；
rs31145145，其在1號染色體上所處位置為chr1：192018789；在AKR品系小鼠染色體相應位置的堿基為C，在C57BL/6品系小鼠染色體相應位置的堿基為T；
rs6181686，其在1號染色體上所處位置為chr1：195479631；在AKR品系小鼠染色體相應位置的堿基為G，在C57BL/6品系小鼠染色體相應位置的堿基為A。
3.如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，通過SNP位點引物PCR結合連接酶檢測反應來確定1號染色體多核苷酸多態性位點鑒定結果。
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