[發明專利]細交鏈孢菌酮酸的半抗原和抗原及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201110375159.8
• 申請日: 2011-11-23
• 公開（公告）號: CN102516148A
• 公開（公告）日: 2012-06-27
• 發明（設計）人: 王弘;劉細霞;楊星星;沈玉棟;徐振林;孫遠明;楊金易
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C07D207/38
• 分類號: C07D207/38;C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;C07K16/14;G01N33/53
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 楊曉松;裘暉

1.一種可作為細交鏈孢菌酮酸半抗原的化合物，其特征在于：具有如式I所示的結構：

式(I)

其中，R為-NH₂或-NCHCOOH；

當R為-NH₂時，一種可作為細交鏈孢菌酮酸半抗原的化合物是TeAH，TeAH的結構如下所示：

當R為-NCHCOOH時，一種可作為細交鏈孢菌酮酸半抗原的化合物是TeAHGA，TeAHGA的結構如下所示：

2.權利要求1所述的可作為細交鏈孢菌酮酸半抗原的化合物的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

將細交鏈孢菌酮酸溶于三氯甲烷中，20-30℃下滴加過量的水合肼過夜反應得到TeAH；將TeAH用三氯甲烷溶解，然后加入2-5倍TeAH摩爾量的乙醛酸，20-30℃下反應3～12h，然后過濾，沉淀用三氯甲烷洗滌、干燥即得TeAHGA。

3.根據權利要求2所述的可作為細交鏈孢菌酮酸半抗原的化合物的制備方法，其特征在于：所述水合肼的純度為98％。

4.一種細交鏈孢菌酮酸的抗原，其特征在于是由以下方法制備得到：

將TeAH和載體蛋白以摩爾比80∶1混合后溶解于PBS溶液中，向上述混合溶液逐滴滴入戊二醛溶液，20-30℃下攪拌反應3～12h，然后在4℃下用生理鹽水透析3d，得到細交鏈孢菌酮酸的抗原。

5.一種細交鏈孢菌酮酸的抗原，其特征在于是由以下步驟制備得到：

(1)將TeAHGA溶于N，N-二甲基甲酰胺中，攪拌下加入二環已基碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺，4℃下攪拌過夜；離心，取上清液，為A液；其中TeAHGA、二環已基碳二亞胺、N-羥基琥珀酰亞胺三者的摩爾比為1∶1.5～4∶1.5～4；

(2)取載體蛋白溶解于PBS中，攪拌溶解，為B液；

(3)4℃攪拌下將A液滴入B液中，反應8～12h，然后用生理鹽水透析3d，得到細交鏈孢菌酮酸的抗原；其中A液中的TeAHGA與B液中的載體蛋白摩爾比為80∶1。

6.根據權利要求4或5所述的細交鏈孢菌酮酸的抗原，其特征在于：

所述PBS溶液的pH值為8.0；

所述的載體蛋白為牛血清白蛋白、人血清蛋白、血藍蛋白或卵清蛋白中的一種。

7.根據權利要求4或5所述的細交鏈孢菌酮酸的抗原，其特征在于：所述的載體蛋白為牛血清白蛋白。

8.一種細交鏈孢菌酮酸抗體，其特征在于：是由權利要求1所述的可作為細交鏈孢菌酮酸半抗原的化合物或權利要求4-5任一項所述的細交鏈孢菌酮酸的抗原制備得到的。

9.根據權利要求8所述的細交鏈孢菌酮酸抗體，其特征在于：所述的細交鏈孢菌酮酸抗體為多克隆抗體、單克隆抗體或基因工程抗體。

10.一種用于檢測細交鏈孢菌酮酸的制劑，其特征在于：所述的制劑為權利要求1所述的可作為細交鏈孢菌酮酸半抗原的化合物、權利要求4-5任一項所述的細交鏈孢菌酮酸的抗原或權利要求8所述的細交鏈孢菌酮酸抗體中的一種。