[發(fā)明專利]用于診斷和治療過(guò)敏性疾病的蛋白及其制備方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110341841.5
• 申請(qǐng)日: 2011-11-02
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102391371A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-03-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王永昌
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上虞常春生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/47
• 分類號(hào): C07K14/47;C07K1/14;G01N33/68;A61P37/08
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.用于診斷和治療過(guò)敏性疾病的蛋白及其制備方法，其特征在于它的制備方法為：

1)取寵物貓毛前三天內(nèi)不用洗發(fā)液洗寵物，部位不限，取貓毛后剪碎備用。

2)在約50克貓毛，加入2倍體積的丙酮，清洗脫脂2-5小時(shí)；傾倒出丙酮，加入新的丙酮，重復(fù)清洗脫脂2次。

3)三次脫脂后，傾倒出上層丙酮，保留下層固體，于室溫自然吹干，待殘留貓毛末中毫無(wú)丙酮刺激氣味即為丙酮揮干標(biāo)準(zhǔn)。

4)取晾干后的貓毛按照1∶25W/V浸于含0.4％笨酚的碳酸氫鈉鹽水液中(5gNaCl/L；2.75g?NaHCO₃/L；pH＝8.2，Coca’s?Solution)，即每25毫升碳酸氫鈉鹽水液中有1克脫脂后的貓毛，4℃磁力攪拌10小時(shí)；間隔冷浸過(guò)夜，再磁力攪拌，至少72小時(shí)后取上層清夜；離心，除去沉淀，將上清調(diào)節(jié)pH到5.0，加入(NH₄)₂SO₄至80％飽和度，4℃攪拌30-60分鐘，離心，收集沉淀；將沉淀用少量碳酸氫鈉鹽水液重新溶解，并用同樣緩沖液對(duì)樣品進(jìn)行透析，除去(NH₄)₂SO₄，得到貓毛鹽溶蛋白的粗提物；將粗提物先用陰離子交換柱分離純化，再用凝膠柱分離純化；收集活性峰，蒸餾水透析后，得到分子量為40kD的貓毛過(guò)敏原，加50％甘油保存。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于診斷和治療過(guò)敏性疾病的蛋白及其制備方法，其特征在于所述的陰離子交換柱為Resource?Q陰離子交換柱。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于診斷和治療過(guò)敏性疾病的蛋白及其制備方法，其特征在于所述的凝膠柱為Sephacryl?S-200凝膠柱。