[發明專利]一種EGFR與HER2聯合多肽表位疫苗

無效

• 申請號: 201110340799.5
• 申請日: 2011-11-02
• 公開（公告）號: CN102357246A
• 公開（公告）日: 2012-02-22
• 發明（設計）人: 胡春萍;曹鵬;盧悟廣;蔡雪婷;王志剛;季夏蕓;胡云龍
• 申請（專利權）人: 江蘇省中醫藥研究院
• 主分類號: A61K39/00
• 分類號: A61K39/00;C12N15/62;C07K19/00;A61P35/00
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 肖明芳

技術領域

本發明屬于醫藥生物技術領域，具體說，涉及一種利用基因工程技術制備EGFR與 HER2聯合多肽表位疫苗。

背景技術

HER家族是一類表皮生長因子受體(EGFR)家族，其家族成員有：EGFR(HER1 或ErbB1)，HER2(neu或ErbB2)，HER3(ErbB3)和HER4(ErbB4)。HER家族普遍表達 于人體的表皮細胞和基質細胞，能夠調節正常細胞的增殖和分化，而其不正常的激酶活 性的活化能導致腫瘤細胞的發生和增值，血管發生和轉移等，因此，在乳腺癌，非小細 胞肺癌、卵巢癌、宮頸癌、前列腺癌等上皮源性腫瘤細胞中，可以檢測到該家族及其突 變體的過表達。鑒于此，眾多研究者將HER家族作為治療腫瘤的靶分子。

HER家族是一類巨大的I型跨膜糖蛋白，都有一個同源性很高的胞外配體結合區， 一個跨膜螺旋區以及一個結構保守但功能不一的胞內酪氨酸激酶結構域。其中，只有 EGFR和ErbB4在配體結合與激酶活性上是功能完全的。ErbB3沒有激酶活性，活化需 要依賴其異二聚體配偶體活性；ErbB2不能與已知的任何一個ErbB配體結合，但能在 形成異二聚體后發揮其潛在的激酶活性，并且在有絲分裂信號中ErbB2和ErbB3是最有 效的異二聚體。HER家族配體可根據其與受體是否直接結合而劃分，與EGFR結合的 配體有：表皮生長因子(EGF)，肝素結合EGF樣生長因子(HBEGF)，轉化生長因子 α(TGFα)，雙向調節蛋白(AR，amPhiregulin)，表皮調節素(EpR)，β-細胞素(BTC，betacellulin) 等，與ErbB3，ErbB4結合的配體是neuregulin(NRG)。

在過去的十幾年里，大部分研究均集中在EGFR和HER2激酶活性的失調引起的腫 瘤發生，近年來，HER3的作用受到了越來越多的重視，由于HER3缺乏酪氨酸激酶活 性，以及依賴于HER3的PI3K/AKT途徑的持續活化，使得腫瘤細胞能夠逃脫凋亡和生 長抑制，且大量證據表明，HER2的直接信號配偶體HER3在HER2介導的腫瘤發生中 發揮著重要作用。

抗HER家族的藥物如：單克隆抗體，小分子抑制劑等，鑒于上述，由于可變ErbB 信號通路的活化，長期使用這些小分子抑制劑會產生抗藥性。而且使用單克隆抗體進行 治療，費用昂貴，而且要達到有效的滴度，被動抗體治療必須長時間重復施藥。因此， 尋求更加有效的抗HER家族藥物成為國內外研究者一直不斷探索的目標。

國內外對HER家族的研究主要集中于以下幾個方面：

1)制備各種針對HER家族的單克隆抗體

如：EGFR的單克隆抗體：cetuximab(IMC-225)；HER2的單克隆抗體： Trastuzumab(Herceptin)。這些單克隆抗體雖然已被FDA批準用于某些癌癥的治療，但 由于其價格昂貴，且被動抗體治療必須長時間重復施藥，很難在市面推廣。

2)尋找有效靶位點制備各種小分子抑制劑

Gefitinib(ZD1839，Ierssa)，是最早進人臨床研究的EGFR酪氨酸激酶抑制劑。由于 長期使用這類小分子抑制劑，導致抗藥性的產生。

3)利用siRNA技術阻斷HER家族受體的表達

Gunamani?Sithanandam等人用HER3siRNA處理A549細胞(該細胞中HER3對其 分裂，存活和遷移等起主要作用)，48h后，細胞數量下降，并且成劑量依賴性，這是因 為siRNA阻斷了細胞周期，引起細胞的編程性死亡和壞死。

4)制備各種針對HER家族的疫苗

關于HER家族的疫苗，國內外已經有諸多報道。Angelika?B.Riemer等用噬菌體展 示技術從循環的十倍體多肽庫中篩選出多肽，該肽模擬了能被cetuximab識別的表位， 從而制備出針對EGFR的表位疫苗，體外實驗證實其產生的抗體與cetuximab生物學特 性相似。但這些疫苗都是單一的，只針對HER家族某一成員作用，對其他HER家族成 員的作用則各有局限。