[發(fā)明專利]利用甲基丙烯酸制備的育亨賓的檢測材料和其制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110331067.X
• 申請日: 2011-10-27
• 公開（公告）號: CN102443101A
• 公開（公告）日: 2012-05-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳大友
• 申請（專利權(quán)）人: 成都市龍泉驛區(qū)十陵禽業(yè)合作社
• 主分類號: C08F222/14
• 分類號: C08F222/14;C08F220/06;C08J9/26
• 代理公司: 四川省成都市天策商標(biāo)專利事務(wù)所 51213
• 代理人: 劉興亮

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于食品添加劑檢測領(lǐng)域，特別屬于利用分子印跡技術(shù)檢測育亨賓。

背景技術(shù)

育亨賓(Yohimbine)具有加速肌體能量代謝，增加能量供給的作用。含有育亨賓的產(chǎn)品目前已經(jīng)被捷克共和國農(nóng)業(yè)和食品檢疫局頒布了禁令，禁止用于運(yùn)動(dòng)員的食品和食品添加劑。因此需要對食品或食品添加劑中育亨賓進(jìn)行檢測。

分子印跡技術(shù)是一種制備具有分子識別能力聚合物的技術(shù)。制備分子印跡聚合物一般需要三個(gè)過程：(1)印跡分子(被識別物質(zhì))和功能單體相互作用，形成復(fù)合物；(2)通過交聯(lián)劑，在印跡分子與功能單體復(fù)合物周圍進(jìn)行聚合反應(yīng)，形成具有大孔、網(wǎng)狀的聚合物；(3)選取適當(dāng)?shù)姆椒ǔビ≯E分子就可以得到分子印跡聚合物。這樣制備得到的分子印跡聚合物中存在著和印跡分子在空間結(jié)構(gòu)完全匹配，并含有與印跡分子互補(bǔ)功能基團(tuán)的三維孔穴。

分子印跡聚合物以其優(yōu)良的性能廣泛應(yīng)用于生物、醫(yī)學(xué)、化學(xué)等領(lǐng)域。用茶堿印跡的聚合物測定病人血清中的茶堿含量，所得結(jié)果同酶聯(lián)免疫分析(EMIT)的測定結(jié)果一致。分子印跡傳感器甚至可檢測1～50μmol的印跡分子，可見具有高度的選擇性和靈敏性。理論上分子印跡技術(shù)可對任何物質(zhì)進(jìn)行印跡，因此采用分子印跡技術(shù)檢測飼料中的育亨賓具有很大的潛質(zhì)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于制備一種用于檢測育亨賓的分子印跡聚合物，能夠達(dá)到良好的育亨賓檢測效果。

本發(fā)明提供的育亨賓分子印跡聚合物的制備方法，包括以下步驟：

將功能單體甲基丙烯酸和模板分子育亨賓溶解于二甲亞砜中，室溫混合6-24小時(shí)，然后加入交聯(lián)劑二甲基丙烯酸乙二醇酯和引發(fā)劑，超聲脫氣，通氮?dú)獬酰芊夂鬅嵋l(fā)聚合，清洗除去模板分子。

其中模板分子與功能單體的摩爾比為：1∶1-10，優(yōu)選1∶1-8，更優(yōu)選1∶4-8，最優(yōu)選1∶6。

其中模板分子與交聯(lián)劑的摩爾比為：1∶5-30，優(yōu)選1∶10-25，最優(yōu)選1∶20。

其中功能單體、模板分子和交聯(lián)劑的摩爾比為：6∶1∶20。

其中超聲脫氣時(shí)間至少5分鐘。

其中氧氣除氧時(shí)間至少5分鐘。

采用甲醇和乙酸的混合溶液清洗除去模板分子。

其中甲醇和乙酸的體積比為1∶9。

本發(fā)明提供一種育亨賓分子印跡聚合物，其采用上述方法制備得到。

本發(fā)明達(dá)到的效果：

利用分子印跡技術(shù)的分子識別能力，制備了育亨賓分子印跡聚合物，通過優(yōu)化各種原料比例得到了較好的識別效果。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

準(zhǔn)確稱取功能單體甲基丙烯酸4mmol和模板分子育亨賓1mmol溶解于25ml二甲亞砜(DMSO)中，室溫下混合12h，使功能單體與模板分子充分作用，然后加入交聯(lián)劑二甲基丙烯酸乙二醇酯(EGDMA)25mmol和50mg引發(fā)劑偶氮二異丁腈(AIBN)，超聲脫氣10分鐘，通入氮?dú)?0分鐘，真空下密封，60℃空氣浴中聚合48h得到分子印跡聚合物。

將分子印跡聚合物粉碎后研磨篩分，取400目和500目之間的顆粒(粒度30.8～38.5μm)，用丙酮多次懸浮沉降除去細(xì)粉。將1.5g聚合物分散于乙醇勻漿液中，在28MPa的壓力下，用乙醇作頂替液，采用濕法裝入尺寸為：250mm×Φ4mm的色譜柱中。

將填充好的色譜柱用甲醇∶乙酸＝1∶9(V∶V)的溶液洗脫，用HPLC進(jìn)行分析，UV檢測器波長268nm，至基線走平，認(rèn)為印跡分子進(jìn)本洗脫完全。

實(shí)驗(yàn)中，用乙腈測定死時(shí)間，保留因子k＝(t-t0)/t0，t為分析物的保留時(shí)間，t0為死時(shí)間。選擇性因子α＝k1/k2，k1為育亨賓的保留因子，k2為育亨賓類似物的保留因子。色譜條件：乙腈為流動(dòng)相，柱溫27℃，流速0.3ml/min，以利血平為育亨賓類似物進(jìn)行測試。

實(shí)施例2-9

實(shí)施例2-9與實(shí)施例1的制備方法類似，只是制備時(shí)采用的模版分子與交聯(lián)劑的含量不同，具體結(jié)果見表1。

表1分離效果

??實(shí)施例??功能單體(mmol)??模板分子(mmol)??交聯(lián)劑(mmol)??選擇性因子α??1??4??1??25??1.28??2??1??1??25??1.25??3??2??1??25??1.27??4??6??1??25??1.98??5??8??1??25??1.56??6??6??1??5??1.88??7??6??1??10??1.92??8??6??1??15??2.10??9??6??1??20??2.32