[發明專利]一種用于檢測VKORC1和CYP2C9基因多態性的試劑盒

有效

• 申請號: 201110328422.8
• 申請日: 2011-10-26
• 公開（公告）號: CN102329885A
• 公開（公告）日: 2012-01-25
• 發明（設計）人: 李艷;童永清
• 申請（專利權）人: 李艷;童永清
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42222
• 代理人: 張火春

1.一種用于檢測VKORC1和CYP2C9基因多態性的引物，其包括以下引物對：

1）VKORC1第3外顯子基因

上游引物序列為：5′-?CAGTGCCTGAAGCCCACA?-3?′，

下游引物序列為：?5′-?CTCACATGCCAAAGCAAAGC?-3?′?；

2）CYP2C9第3外顯子基因

上游引物序列為：5′-?GCTGTTAAGGGAATTTGTAGG?-3’，

下游引物序列為：5′-?ATATTCACCCCAAGGCTGTCT?-3’；

3）CYP2C9第7外顯子基因

上游引物序列為：5′-?GTGCCATTTTTCTCCTTTTCC?-3’，

下游引物序列為：5′-?AATGTCACAGGTCACTGCATG?-3’。

2.一種利用基因測序方法檢測VKORC1和CYP2C9基因多態性的試劑盒，其包括權利要求1所述的引物。

3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于還包括以下試劑中的一種或多種：PCR反應液、陰性對照、陽性對照、PCR測序反應液、人外周血基因組提取試劑。

4.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述PCR反應液包括：10×PCR緩沖液、2.5~4.0?mM的MgCl₂、2U的Taq酶、0.2~0.4?mM的dNTPs、0.3~0.6?mM?dUTP，所述引物溶于PCR反應液中，濃度為0.25?pmol/μl。

5.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述陰性對照為去離子水。

6.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述陽性對照為已知多態性人基因組DNA樣品。

7.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述PCR測序反應液包括：4?μl測序Buffer，1?μl作為測序引物的權利要求1所述引物。

8.根據權利要求3~7任一項所述的試劑盒，其特征在于，所述人外周血基因組提取試劑包括：去離子水，6M?NaI，氯仿/異戊醇混合液，異丙醇和無水乙醇。