[發(fā)明專利]一種特異識(shí)別血小板αIIbβ3的抗栓藥物RWR

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110321825.X
• 申請(qǐng)日: 2011-10-21
• 公開（公告）號(hào): CN102351948A
• 公開（公告）日: 2012-02-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊利軍;楊濤;孫海飚;劉海桃;趙海霞;常冰梅;王惠珍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山西醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K7/06
• 分類號(hào): C07K7/06;C07K1/20;C07K1/06;C07K1/04;A61K38/08;A61P7/02
• 代理公司: 北京華科聯(lián)合專利事務(wù)所 11130
• 代理人: 楊厚;王為

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及蛋白質(zhì)多肽領(lǐng)域，具體地講，涉及一種能夠特異識(shí)別血小板表面整合素α_IIbβ₃的多肽及其制備和應(yīng)用。?

背景技術(shù)：

心腦血管疾病如心肌梗死、腦梗塞是一種嚴(yán)重威脅人類健康的重大疾病，全世界每年死于心腦血管疾病的人數(shù)高達(dá)1500萬(wàn)人，居各種死因首位。心腦血管疾病具有發(fā)病率高、致殘率高、死亡率高、復(fù)發(fā)率高，并發(fā)癥多即“四高一多”的特點(diǎn)，已成為人類死亡病因最高的頭號(hào)殺手。即使應(yīng)用目前最先進(jìn)、完善的治療手段，仍有50％以上心腦血管疾病幸存者生活不能自理。?

眾多心腦血管疾病的發(fā)生、發(fā)展都和病理性血栓形成有關(guān)。迄今已用于臨床的血栓抑制劑有很多種。傳統(tǒng)的溶栓抗栓藥物雖具有一定的抑制血栓生成作用，但其局限性不容忽視。例如溶栓藥尿激酶、鏈激酶，TPA等在不同程度上存在著特異性差，需用量大，有出血傾向以及使用后再次栓塞等缺點(diǎn)，抗栓藥阿斯匹林對(duì)高切應(yīng)力所致的血小板活化無(wú)抑制作用，而且當(dāng)冠脈狹窄程度增加時(shí)抗栓效果減弱。而且現(xiàn)有絕大多數(shù)的抗血小板聚集藥，只能阻止血小板活化途徑中的一條通路，當(dāng)某一特定通路被充分抑制時(shí)，血小板仍可通過(guò)其它途徑活化，引起血小板聚集。基于傳統(tǒng)血栓生成抑制劑的局限性，科學(xué)家們?nèi)栽?繼續(xù)研究新的血栓抑制劑，不斷探索療效確切、成本低廉的抗血栓藥。?

血栓形成的共同通路也即關(guān)鍵環(huán)節(jié)是：纖維蛋白α鏈的RGD(Arg-Gly-Asp)模體特異識(shí)別血小板表面α_IIbβ₃受體，介導(dǎo)纖維蛋白與血小板的結(jié)合，該過(guò)程猶如鏈條，把相鄰的血小板連在一起，形成血栓。由于RGD模體具有與α_IIbβ₃受體特異結(jié)合的特性，因此含有RGD序列的多肽即可以競(jìng)爭(zhēng)性抑制纖維蛋白與血小板的結(jié)合，從而抑制血栓形成，即可以阻斷血栓形成的最后通路。?

RGD是精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸組成的三肽。1984年P(guān)ierschbacher和Ruoslahti首次確定了RGD序列為人纖維連接蛋白與其受體結(jié)合位點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn)：RGD廣泛存在于細(xì)胞識(shí)別系統(tǒng)。基質(zhì)蛋白中的RGD是與細(xì)胞表面特異受體相互作用的識(shí)別位點(diǎn)，這些細(xì)胞表面膜蛋白是廣泛分布的超級(jí)家族-粘附受體的成員，稱為整合素。整合素在正常情況下無(wú)活性，一旦在激素，細(xì)胞因子或其它因素的刺激下，其構(gòu)型和親合力發(fā)生改變，整合素受體與特異性配體的RGD結(jié)構(gòu)結(jié)合，引起細(xì)胞內(nèi)一系列生化改變，進(jìn)而影響多種組織細(xì)胞功能的調(diào)控，包括細(xì)胞凋亡，分化，增殖，遷移，粘附，血小板聚集等一系列病理生理過(guò)程。?

國(guó)內(nèi)外對(duì)RGD多肽的生物學(xué)活性進(jìn)行的大量研究，證明了RGD多肽在疾病治療方面具有廣闊的應(yīng)用前景。RGD及類似物對(duì)預(yù)防和治療心腦血管疾病、骨質(zhì)疏松以及由細(xì)胞粘連異常而導(dǎo)致的腫瘤等疾病具有重要作用，人工合成的RGD多肽或化合物也具有類似的生物學(xué)活性，含有RGD多肽已成為醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)。1991年J.Samanen?等合成了一系列含有RGD序列的小肽，經(jīng)過(guò)藥理活性試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)了它們可抑制纖維蛋白原與血小板的結(jié)合，抑制血栓的形成。眾多實(shí)驗(yàn)研究表明，RGD多肽作為α_IIbβ₃受體拮抗劑，可以阻斷血栓形成的最終通路，理論上具有徹底抑制血栓形成的功能。?

目前一些科學(xué)家通過(guò)人工合成一些RGD序列的小肽進(jìn)行基礎(chǔ)及臨床試驗(yàn)，已取得一定的成果。如RGDS，DRGDW，GRGDSPA等都可抑制纖維蛋白與血小板結(jié)合，抑制血栓形成。新近的實(shí)驗(yàn)研究表明，用氨基酸替代法研究RGD與血小板α_IIbβ₃結(jié)構(gòu)和活性的關(guān)系時(shí)發(fā)現(xiàn)，用Val取代Arg將使RGD的活性降低10倍，用Ala取代Gly出現(xiàn)類似結(jié)果，用Glu取代Asp將使其功能完全喪失。逆轉(zhuǎn)RGDS和RGDV序列將使其對(duì)血小板抑制功能完全喪失。另有實(shí)驗(yàn)研究表明，GRGDSP六肽(Gvy-Ay-Gy-Asy-Ser-Pro)可直接抑制纖維蛋白(Fg)與血小板的結(jié)合；Eward等發(fā)現(xiàn)RGDS明顯抑制Fg和ADP激活的血小板結(jié)合；Rote等發(fā)現(xiàn)含RGD序列的SC-4992呈量依賴抑制血栓形成，抑制ADP和花生四烯酸引起的血小板聚集。其中RGD序列是高度保守的，是識(shí)別受體必需的。天然存在的含RGD的多肽和人工合成含RGD的小肽，一般都具有相似的功能，既可以抑制血栓形成、也具有抑制腫瘤轉(zhuǎn)移和骨質(zhì)疏松的功能。因此，RGD類似物作用廣泛但不特異，如何提高其作用的特異性及活性，是研究人員的關(guān)注熱點(diǎn)，也是本課題組多年來(lái)的研究重點(diǎn)。?