[發(fā)明專利]一種組織工程纖維束結(jié)構(gòu)體及其制備方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201110321165.5 | 申請(qǐng)日: | 2011-10-20 |
| 公開(公告)號(hào): | CN102505184A | 公開(公告)日: | 2012-06-20 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 熊卓;黎銘峰;張婷;孫偉;張人佶;林峰 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 清華大學(xué) |
| 主分類號(hào): | D01F9/04 | 分類號(hào): | D01F9/04;D01F1/10;D01F11/00;D01F8/18;D01F8/02;D01F11/02;D06M16/00;D06M15/15;C12S11/00;D01D5/06;A61L27/20;A61L27/22;A61L27/24 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 組織 工程 纖維 結(jié)構(gòu) 及其 制備 方法 | ||
1.一種制備水凝膠纖維絲的方法,包括如下步驟:先以水凝膠材料為基質(zhì)與細(xì)胞組分復(fù)合,得到材料-細(xì)胞復(fù)合物,再將所述材料-細(xì)胞復(fù)合物成形為絲狀結(jié)構(gòu)并在所述水凝膠材料對(duì)應(yīng)的交聯(lián)劑中交聯(lián)固化,即得到水凝膠纖維絲。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:
所述水凝膠材料和所述水凝膠材料對(duì)應(yīng)的交聯(lián)劑為如下1)或2):
1)、所述水凝膠材料為海藻酸鈉,其對(duì)應(yīng)的所述交聯(lián)劑為含二價(jià)陽離子的鹽溶液,所述含二價(jià)陽離子的鹽溶液具體為氯化鈣水溶液;
2)、所述水凝膠材料為海藻酸鈉和如下3種中的至少一種:纖維蛋白原、殼聚糖和膠原;所述纖維蛋白原對(duì)應(yīng)的交聯(lián)劑為凝血酶;
所述細(xì)胞組分為如下3種組分中的至少一種:離體細(xì)胞A、細(xì)胞培養(yǎng)液和生長因子。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法,其特征在于:
在所述再將復(fù)合物在所述水凝膠材料對(duì)應(yīng)的交聯(lián)劑中交聯(lián)的步驟后還包括將所述交聯(lián)得到的產(chǎn)物外包裹離體細(xì)胞B或涂覆改性材料的步驟;
所述將所述交聯(lián)得到的產(chǎn)物外包裹離體細(xì)胞B具體為將所述交聯(lián)得到的產(chǎn)物浸泡在含有所述離體細(xì)胞B的懸浮液中;
所述改性材料為膠原蛋白、層連蛋白或纖連蛋白;
所述離體細(xì)胞A和所述離體細(xì)胞B為同一種或者不同種;
所述離體細(xì)胞A具體為離體的功能細(xì)胞,所述離體的功能細(xì)胞具體為離體心肌細(xì)胞、離體肝細(xì)胞、離體神經(jīng)細(xì)胞、離體成纖維細(xì)胞或離體C2C12細(xì)胞;
所述離體細(xì)胞B具體為離體內(nèi)皮細(xì)胞;
所述細(xì)胞培養(yǎng)液為細(xì)胞培養(yǎng)液A或細(xì)胞培養(yǎng)液B;
所述細(xì)胞培養(yǎng)液B為高糖細(xì)胞培養(yǎng)液或普通細(xì)胞培養(yǎng)液,所述高糖細(xì)胞培養(yǎng)液具體為DEME高糖培養(yǎng)液,所述普通細(xì)胞培養(yǎng)液具體為DEME培養(yǎng)液;
所述細(xì)胞培養(yǎng)液A按照如下方法制備:將胎牛血清、青霉素、鏈霉素和所述細(xì)胞培養(yǎng)液B混合得到,所述胎牛血清在所述細(xì)胞培養(yǎng)液A中的濃度為10%(體積百分含量),所述青霉素和鏈霉素在所述細(xì)胞培養(yǎng)液A中的濃度均為100U/ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一所述的方法,其特征在于:
所述方法為如下A)-D)中任一一種:
A)所示的方法包括如下步驟:
1)將海藻酸鈉、水、所述細(xì)胞培養(yǎng)液B混勻,得到復(fù)合物,
2)將步驟1)得到的所述復(fù)合物擠壓成絲狀并置于氯化鈣水溶液中交聯(lián),得到成形纖維絲,即得到水凝膠纖維絲;
B)所示的方法包括如下步驟:
1)將海藻酸鈉、水、所述離體細(xì)胞A、所述細(xì)胞培養(yǎng)液A混勻,得到復(fù)合物,
2)將步驟1)得到的所述復(fù)合物擠壓成絲狀并置于氯化鈣水溶液中交聯(lián),得到成形纖維絲,
3)將步驟2)得到的成形纖維絲浸泡在含有離體細(xì)胞B的懸浮液中,得到水凝膠纖維絲;
C)所示的方法包括如下步驟:
1)將海藻酸鈉、水、纖維蛋白原、所述細(xì)胞培養(yǎng)液B混勻,得到復(fù)合物,
2)將步驟1)得到的所述復(fù)合物擠壓成絲狀并置于氯化鈣水溶液中交聯(lián),得到成形纖維絲,
3)將步驟2)得到的成形纖維絲浸泡在含有凝血酶的溶液中,得到水凝膠纖維絲;
D)所示的方法包括如下步驟:
1)將海藻酸鈉、水、纖維蛋白原、離體細(xì)胞A、所述細(xì)胞培養(yǎng)液A混勻,得到復(fù)合物,
2)將步驟1)得到的所述復(fù)合物擠壓成絲狀并置于氯化鈣水溶液中交聯(lián),得到成形纖維絲,
3)將步驟2)得到的成形纖維絲浸泡在含有凝血酶的溶液中,得到再次交聯(lián)纖維絲;
4)將步驟3)得到的再次交聯(lián)纖維絲浸泡在含有離體細(xì)胞B的懸浮液中,得到水凝膠纖維絲。
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