[發(fā)明專利]克隆青蝦CHH基因的引物組及克隆青蝦CHH基因的方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110303794.5 | 申請日： | 2012-02-06 |
| 公開（公告）號： | CN102433329A | 公開（公告）日： | 2012-05-02 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 吳滟;王寧;傅洪拓;喬慧 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心 |
| 主分類號： | C12N15/11 | 分類號： | C12N15/11;C12N15/16;C12N15/10 |
| 代理公司： | 南京經(jīng)緯專利商標代理有限公司 32200 | 代理人： | 李紀昌 |
| 地址： | 214081*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 克隆 青蝦 chh 基因 引物 方法 | ||
1.克隆青蝦CHH基因的引物組，其特征在于，其由如下引物組成：
引物組1：
正向引物FS1的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示；
反向引物RS4的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:2所示；
引物組2：
正向外引物FC3-2的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:3所示；
正向內(nèi)引物FC3-3的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:4所示；
反向外引物3′?RACE?Outer?Primer的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:5所示；
反向內(nèi)引物3′?RACE?Inner?Primer的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:6所示；
引物組3：
正向外引物RC5-1的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:7所示；
正向內(nèi)引物RC5-3的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:8所示；
反向外引物5′?RACE?Outer?Primer的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:9所示；
反向內(nèi)引物5′?RACE?Inner?Primer的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:10所示。
2.一種克隆青蝦GHH基因的方法，其特征在于，包括如下步驟：
步驟1：從青蝦眼柄中提取總RNA；
步驟2：然后RT進行cDNA?第一鏈合成；
步驟3：用引物組1擴增獲得青蝦CHH基因才cDNA序列中間片段；所述引物組1由如下引物組成：
正向引物FS1的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示；
反向引物RS4的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:2所示；
步驟4：用引物組2擴增獲得青蝦CHH基因cDNA序列的3’端片段；所述引物組2由如下引物組成：
正向外引物FC3-2的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:3所示；
正向內(nèi)引物FC3-3的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:4所示；
反向外引物3′?RACE?Outer?Primer的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:5所示；
反向內(nèi)引物3′?RACE?Inner?Primer的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:6所示；
步驟5：用引物組3擴增獲得青蝦CHH基因cDNA序列的5’端片段；所述引物組3由如下引物組成:
正向外引物RC5-1的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:7所示；
正向內(nèi)引物RC5-3的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:8所示；
反向外引物5′?RACE?Outer?Primer的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:9所示；
反向內(nèi)引物5′?RACE?Inner?Primer的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:10所示；
步驟6：將所述CHH基因的3’端和5’端片段拼接，即得。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，步驟4和5所述擴增為套式兩輪PCR。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心，未經(jīng)中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201110303794.5/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
