[發(fā)明專利]一種桔黃假單胞菌菌劑及其制備方法和應(yīng)用

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110299609.X
• 申請(qǐng)日: 2011-09-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102505009A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-06-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 肖明;王婧
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海師范大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N11/14
• 分類號(hào): C12N11/14;C05G3/00;C05F11/08;C12R1/38
• 代理公司: 上海伯瑞杰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31227
• 代理人: 吳瑾瑜

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物和化學(xué)領(lǐng)域，公開(kāi)了一種農(nóng)用促生菌劑，具體地說(shuō)是一種植物根際促生菌桔黃假單胞菌菌劑的制備方法。

背景技術(shù)

我國(guó)是農(nóng)業(yè)大國(guó)，通過(guò)使用化肥以提高農(nóng)作物的產(chǎn)量，長(zhǎng)期和大量施用化肥會(huì)造成水體富營(yíng)養(yǎng)化、土壤物理性質(zhì)惡化，危害食品安全、甚至人類生命健康。

微生物肥料菌劑是由一種或數(shù)種有益活體微生物制備而成的肥料，借助其代謝過(guò)程或代謝產(chǎn)物，以改善植物生長(zhǎng)條件，尤其是營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，達(dá)到促進(jìn)植株生長(zhǎng)的作用。微生物肥料菌劑是一種保護(hù)生態(tài)環(huán)境、提高農(nóng)作物產(chǎn)量和品質(zhì)的好方法。假單胞菌是一種植物根際促生菌(Plant?Growth-promoting?Rhizobacteria，PGPR)，能夠通過(guò)多種方式促進(jìn)植物生長(zhǎng)，包括：抑制植物病原菌、分泌吲哚乙酸(IAA)、產(chǎn)生鐵載體等直接或間接的作用促生作用。

現(xiàn)有階段發(fā)現(xiàn)桔黃假單胞菌對(duì)多種植物致病菌有抑制作用(Rosas?BS等，Phyton-Revista?Internacionalde?Botanica?Experimental，2001，67：203-209)；Rosas和Rovera等人(Carlier?E，Rovera?M等World?J?Microbiol?Biotechnol，2008，24：2653-2658)研究發(fā)現(xiàn)，桔黃假單胞菌SR1通過(guò)產(chǎn)生鐵載體、拮抗蛋白、氫氰酸(HCN)、植物激素類似物等來(lái)抑制植物病原菌、促進(jìn)植物的生長(zhǎng)。Feklistova和Maksimova(Feklistova?IN等，Bulletin?of?BSU，chemistry，biology，Geography，2005，2：29-31)發(fā)現(xiàn)，桔黃假單胞菌還能合成吩嗪類物質(zhì)(phenazines)起到生物防治的作用。

現(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)一株桔黃假單胞菌JD37(菌種保藏號(hào)CGMCCNo.1.10967)對(duì)多種植物致病菌有抑制作用，并且能夠通過(guò)直接或者間接促生作用促進(jìn)玉米、小麥和番茄植株的生長(zhǎng)。所以發(fā)明一種對(duì)人畜無(wú)毒、生態(tài)環(huán)境友好、能促進(jìn)植物生長(zhǎng)的桔黃假單胞菌菌劑對(duì)于保護(hù)環(huán)境、促進(jìn)植物生長(zhǎng)和農(nóng)業(yè)發(fā)展有著重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是：提供一種既能對(duì)植物有促生作用，提高植株產(chǎn)量，又對(duì)環(huán)境無(wú)污染，同時(shí)制備簡(jiǎn)單、使用方便的桔黃假單胞菌菌劑的制備方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案為，一種桔黃假單胞菌菌劑的制備方法，包括以下步驟：

(1)將桔黃假單胞菌JD37菌株接種入液體培養(yǎng)基中，25～30℃下培養(yǎng)24～28小時(shí)；離心沉淀取桔黃假單胞菌JD37菌體，與滅菌的0.05wt％～0.2wt％助劑溶液懸浮，混合均勻，得到懸浮菌液；

液體培養(yǎng)基為KB培養(yǎng)基；

離心條件為-8～0℃，優(yōu)選-4℃，6000～10000rpm離心8～15分鐘；

助劑優(yōu)選為羧甲基纖維素鈉；助劑溶液濃度優(yōu)選為0.1wt％；

獲得菌體的液體培養(yǎng)基與助劑溶液體積比為200～300∶1，即：平均每200～300毫升菌液離心后得到的桔黃假單胞菌JD37菌體，與1毫升助劑溶液混合制備懸浮菌液。

(2)將懸浮菌液與滅菌的載體混合，載體與懸浮菌液的體積質(zhì)量比為3～6g/ml，優(yōu)選為5g/ml。載體可選用滑石粉或硅藻土，優(yōu)選為滑石粉。

通過(guò)上述方法制備的桔黃假單胞菌JD37菌劑可用作微生物肥料，菌體釋放能力高，可防治植物病害，促進(jìn)作物生長(zhǎng)。

桔黃假單胞菌JD37菌劑通過(guò)降低植株發(fā)病率，達(dá)到促進(jìn)作物生長(zhǎng)的效果。桔黃假單胞菌菌劑作為活體微生物肥料的應(yīng)用價(jià)值在于：

(1)桔黃假單胞菌菌劑的菌體釋放能力高。

(2)能通過(guò)直接或間接的促生方式，促進(jìn)作物生長(zhǎng)。

對(duì)作用施用桔黃假單胞菌活體微生物肥料，并在整個(gè)生長(zhǎng)過(guò)程中多次施用，可以顯著促進(jìn)植株根的生長(zhǎng)，進(jìn)而促進(jìn)整株作物的生長(zhǎng)。

(3)抑制植物病原真菌：通過(guò)離體葉片實(shí)驗(yàn)，桔黃假單胞菌活體微生物肥料能夠顯著抑制植物病原菌，增強(qiáng)植株抵抗植物病原的能力，起到預(yù)防和防治植物病原菌的效果。無(wú)毒、無(wú)副作用，人畜安全。

(4)農(nóng)藥開(kāi)發(fā)成本低：桔黃假單胞菌活體微生物菌劑的活性成分是桔黃假單胞菌，該菌具有易培養(yǎng)、易收集、對(duì)人體及動(dòng)植物無(wú)害的特點(diǎn)，加工促生菌劑選用的載體及助劑材料價(jià)格低廉，制備工藝簡(jiǎn)單易行。

(5)菌劑的使用方法操作簡(jiǎn)單：桔黃假單胞菌菌劑為干粉狀，使用前按一定比例加水稀釋，采用澆灌和噴曬的方式施用均可。

附圖說(shuō)明