[發明專利]一株對抗Bt小菜蛾有活性的蘇云金芽孢桿菌

有效

• 申請號: 201110286354.3
• 申請日: 2011-09-23
• 公開（公告）號: CN102329752A
• 公開（公告）日: 2012-01-25
• 發明（設計）人: 楊峰山;朱勛;張友軍;李云龍;劉春光;楊晶;鄭曉旭;薛原;滕淼
• 申請（專利權）人: 黑龍江大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P7/04;C12R1/07
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109
• 代理人: 金永煥

技術領域

本發明涉及一株蘇云金芽孢桿菌。

背景技術

蘇云金芽孢桿菌(Bacillus?thuringiensis，簡稱Bt)是一種從土壤或死亡昆蟲體內分離出來的革蘭氏陽性細菌。此類菌在芽孢形成時期產生一種或多種殺蟲晶體蛋白(Insecticidal?Crystal?Proteins，ICPs，又被稱為δ-內毒素)，可對鱗翅目、鞘翅目、半翅目、雙翅目、同翅目、膜翅目、直翅目、等翅目、毛翅目、脈翅目、蚤目、纓翅目、食毛目、蜚蠊目、螨類、虱目、吸蟲、絳蟲、鞭毛蟲、變形蟲和草履蟲等多種昆蟲及原生生物產生毒素活性，但對人畜等非靶標生物沒有效果，對環境友好安全。因此蘇云金芽孢桿菌作為主要的生物農藥被廣泛應用。該菌菌劑作為噴灑型殺蟲劑主要成分的使用時間已經超過50年，是目前世界上用途最廣、產量最大的微生物殺蟲劑，占微生物殺蟲劑總量的90％-95％。

蘇云金芽孢桿菌的不同殺蟲毒素由不同種類的cry基因控制，各種cry基因已經被成功克隆，并根據不同需要，利用轉基因技術轉入到不同作物中，用于害蟲等有害生物的防治。自1996年轉Bt?cry基因作物的種植開始，轉Bt基因作物在世界范圍內被廣泛種植，種植面積逐年增長。據2008年的統計顯示，轉Bt基因作物的種植面積已增長至4,600萬公頃。

蘇云金芽孢桿菌菌劑的應用及轉Bt?cry基因作物的種植，在控制田間害蟲方面效果顯著，有利于作物的產量和質量的提高，同時減少了化學農藥的使用，對農林業生產和環境保護發揮了積極的作用。

然而蘇云金芽孢桿菌制劑和轉Bt基因作物廣泛應用，也使得部分害蟲對Bt產生了一定抗性，小菜蛾是至今唯一在田間發現對Bt產生抗性的害蟲。同時，在實驗室內已經篩選出許多昆蟲的不同抗性品系。而且其抗性水平有發展的勢頭。

Tabashnik等于1989年檢測到田間種群對Bt制劑(kurstaki亞種)產生了25倍的抗藥性，首次報道了田間小菜蛾對Bt殺蟲劑產生了抗藥性。Tang等測定弗羅里達州田間小菜蛾對Bt制劑(BtK?NRD12)的抗藥性大于1500倍。Wright等報道馬來西亞田間小菜蛾種群在室內篩選飼養7代后對BtA和BtK制劑的抗藥性分別為330倍和160倍。此外，日本、中美洲、墨西哥和印度等國家和地區也有抗Bt小菜蛾的報道。2000年Zhao等報道從美國南卡羅尼那州田間采集的對Cry1C有31倍抗性的小菜蛾抗性品系，在實驗室先用Cry1C原毒素繼續汰選，然后用表達高劑量的Cry1C毒素的轉基因花椰菜汰選，26代后，該品系對Cry1C毒素抗性高達63100倍(2齡幼蟲)。

國內，馮夏等報道深圳、東莞地區等供港菜區小菜蛾對Bt的抗藥性為17.2-30.2倍。李建洪等通過對深圳、東莞和廣州菜區的田間小菜蛾種群檢測，發現小菜蛾對蘇云金芽孢桿菌標準品Cs3ab-1991的抗藥性倍數分別為8.9、6.5、2.1倍。周程愛等報道長沙地區的小菜蛾對Bt的抗藥性由1997-1999年的敏感性由11-4.1倍發展到2000年的6.2倍的低水平抗藥性。余德億等報道福建地區田間種群的小菜蛾對湖北Bt和福建Bt的抗藥性分別由1997年的2.1倍和3.1倍上升到1999年的8.2倍和10.1倍。郭世儉等報道浙江省杭州、蕭山、金華、溫州四地的小菜蛾對Bt制劑還沒有產生抗藥性。王崇利等報道廣東惠州田間小菜蛾種群對Cry1Ab和Cry1Ac的抗性達到了高抗水平；對Btk制劑的抗性達到了中抗水平；對Cry1Aa和Cry2Aa具有低水平抗性；福建福州、浙江杭州和江蘇南京田間小菜蛾種群對Cry1Ab、Cry1Ac具有低至中等水平抗性(8-28倍)，對Btk制劑具有低水平抗性(3.5-7倍)。

以上可以看出，小菜蛾對Bt產生的抗性問題已經十分突出，因此篩選到對抗Bt小菜蛾高活性的菌株，用于防治抗Bt害蟲已迫在眉睫。

發明內容

本發明提供了一株對抗Bt小菜蛾有活性的蘇云金芽孢桿菌。