[發明專利]富硒北冬蟲夏草母種培育法

無效

• 申請號: 201110279521.1
• 申請日: 2011-09-20
• 公開（公告）號: CN102428834A
• 公開（公告）日: 2012-05-02
• 發明（設計）人: 駱新春
• 申請（專利權）人: 駱新春
• 主分類號: A01G1/04
• 分類號: A01G1/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于冬蟲夏草培育技術領域，尤其涉及一種富硒北冬蟲夏草母種培育法。

背景技術

硒是人體必需的微量元素之一，它具有防癌、抗癌、抗氧化，保護機體免受活性氧自由基的損害，保護心臟，抗肝壞死，提高免疫力，延緩衰老等多種藥理作用，被譽為“抗癌之王”。現代醫學研究表明，人體多種疾病如癌癥、心腦血管疾病、糖尿病、高血壓等都與缺硒有關。硒在自然環境中的分布極不均勻，我國三分之二的地區處于缺硒狀態，為了增進人體健康，眾多科研機構和生物工程企業將無機硒通過微生物、植物、動物轉化為有機硒生產出安全、無毒、便于人體吸收利用的富硒保健食品。隨著人們對硒與免疫功能，心腦血管病以及防癌抗癌認識的普及，富硒保健食品的需求日益增多，為富硒保健食品的開發提供了廣闊的市場。富硒北冬蟲夏草是在培養基中添加微量元素硒，通過對菌絲在生長過程中的吸收，轉化，結合將無機硒轉化為有機硒富集在子實體中，生產出富硒北冬蟲夏草。現有技術都是在培養基中添加無機亞硒酸或亞硒酸鈉，微量的亞硒酸或亞硒酸鈉對北冬蟲夏草菌絲的生長有促進作用，但當無機硒在培養基中達到20mg/L時菌絲生長即受到抑制，超過30mg/L菌絲不能生長，因而限制了無機硒在培養基中的添加量，使培育的北冬蟲夏草含硒量一股在10-20mg/L內，未能充分體現富硒北冬蟲夏草在防癌、抗癌、增強免疫力、抗衰老、防治克山病、糖尿病等的作用。

發明內容

本發明的目的是提供一種富硒北冬蟲夏草母種培育法，是采用有機硒酵母，避免無機亞硒酸、亞硒酸鈉對菌絲生長的毒害，使培養基的含硒量達到50mg/L，從而培育出的富硒北冬蟲夏草母種。

本發明包括如下步驟：

一、試管斜面富硒菌種的培養

1、培養基成份：馬鈴薯200克，葡萄糖10-30克，蛋白陳10-20克，瓊脂15-30克，磷酸二氫鉀卜3克，含硒量2000mg/kg的硒酵母10-50克。

配制方法：稱取洗凈去皮馬鈴薯簿片200克，加入1000毫升煮沸20分鐘，過濾，取馬鈴薯汁放入1000毫升燒杯中，加入葡萄糖20克，瓊脂20克，蛋白陳10克，磷酸二氫鉀05克，硒酵母15克，水浴加熱至瓊脂完全溶化，加水補足1000毫升，分裝在傘20～200m.rn試管內，每支試管裝12毫升，用棉塞塞緊，在高壓滅菌鍋120℃保持滅菌40分鐘，出鍋后趁熱將試管擺成培養基離棉塞5-6cm的斜面，冷卻后斜面成固體狀備用。

2、菌種分離、接斜面菌種：選生長粗壯圓形、色澤桔紅的野生北冬蟲夏草子實體或人工培育的北冬蟲夏草子實體，用75％酒精滅菌1分鐘，用滅菌水洗去酒精，在接種箱中將子實體切成2mm簿片接入試管培養基中間，切口向上，在20℃恒溫箱中培養15天取出見光，散射光照3天轉色，選出菌絲生長平整，色澤桔紅，無雜菌的富硒北冬蟲夏草母種，放入5℃恒溫箱內保存備用。

二、富硒北冬蟲夏草液體菌種的培養

營養液的配方：葡萄糖20克，蛋白陳10克，磷酸二氫鉀1克，硫酸鎂1克，硒酵母15克，水1000毫升。

操作方法：稱取配方所列的原料放入1000毫升水中煮沸10分鐘，冷卻至室溫后用多層紗布過濾，將清液裝入500毫升鹽水瓶中，每瓶裝250毫升，用棉塞塞緊，放入高壓滅菌鍋，120℃保持滅菌30分鐘，冷卻至室溫后連同母種放入接種箱中，用接種刀切母種一片約0.5平方厘米接入浮在液面上，放入暗室，控制溫度20-22℃靜置培養3天，母種長出白色菌絲，放在搖床中5天即成富硒北冬蟲夏草液體菌種。

三、富硒北冬蟲夏草的培育

1、固體培養基營養液的配制：稱取葡萄糖20克，蛋白陳10克，磷酸二氫鉀1克，硫酸鎂1克，維生素B，100毫克，硒蛋白35克，放入1000毫升70-80℃熱水中，攪拌至物料溶解。

2、固體培養基的配制：在600毫升大口玻璃瓶中，每瓶裝入大米40克，營養液60毫升，用聚丙烯簿膜封瓶口，放入高壓滅鍋內，在120℃溫度下保持滅菌60分鐘，緩慢排放壓力后出鍋，冷卻待用。

3、接種、培育：在超凈臺上用帶噴咀的接種槍每瓶接入富硒北冬蟲夏草液體菌種3毫升，移入暗室控制溫度20-22℃發菌，經過8天避光發菌，培養基表面全部長滿白色菌絲即可見光，在散射光照下3-5天菌絲轉為桔黃至桔紅色，控制溫度20-22℃，相對濕度80-85％，10一天出現子實體原基，再經30一天的生長，子實體長到4-8厘米，形成孢子時子實體成熟即可采收，及時干燥至水份不超過5％，用塑料袋密封包裝。