[發(fā)明專利]檢測脂肪細胞、成骨細胞和軟骨細胞的檢測試劑盒及檢測方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110279228.5
• 申請日: 2011-09-20
• 公開（公告）號: CN102321726A
• 公開（公告）日: 2012-01-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳曉波;黃家學(xué);韓洪起;侯士芳;張宇光;韓俊領(lǐng);陳勇
• 申請（專利權(quán)）人: 協(xié)和干細胞基因工程有限公司
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04
• 代理公司: 天津才智專利商標代理有限公司 12108
• 代理人: 王曉紅

1.一種檢測脂肪細胞、成骨細胞和軟骨細胞的檢測試劑盒，其特征在于，包括A、B、C、D、E、F液，各溶液成分及質(zhì)量百分比如下：

溶液A：8％氯化鈉，2.16％磷酸氫二鈉，0.2％氯化鉀，0.2％磷酸二氫鉀，89.44％ddH₂O；

溶液B：4％多聚甲醛，96％ddH₂O；

溶液C：6％油紅O染料，94％無水乙醇；

溶液D：1％阿爾辛藍染料，99％冰醋酸；

溶液E：0.1％茜素紅染料，99％ddH₂O；

溶液F：0.3％蘇木精染料，25％冰醋酸，硫酸鋁鉀0.7％，17％甘油，30％ddH₂O，27％無水乙醇。

2.如權(quán)利要求1所述檢測脂肪細胞、成骨細胞和軟骨細胞的檢測試劑盒的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)檢測脂肪細胞染色：

a.使用溶液A清洗細胞3次，用量依培養(yǎng)器皿大小而定；

b.加入適量溶液B至完全覆蓋細胞，室溫下靜置10min；

c.以溶液A清洗細胞3次；

d.將溶液C與ddH₂O按照體積比7∶3混合后加入細胞培養(yǎng)板中，室溫靜置30min；

e.以溶液A清洗細胞至流出液無色；

f.加入適量溶液F，室溫靜置20min；

g.以溶液A清洗細胞至流出液無色，加入適量溶液A覆蓋細胞。

顯微鏡下觀察；

(2)檢測軟骨細胞染色：

a.使用溶液A清洗細胞3次，用量依培養(yǎng)器皿大小而定；

b.加入適量溶液B至完全覆蓋細胞，室溫下靜置10min；

c.以溶液A清洗細胞3次；

d.加入適量溶液D覆蓋細胞，室溫靜置15min；

e.以溶液A清洗細胞至流出液無色；

f.加入適量溶液F，室溫靜置20min；

g.以溶液A清洗細胞至流出液無色，加入適量溶液A覆蓋細胞。

顯微鏡下觀察；

(3)成骨細胞染色：

a.使用溶液A清洗細胞3次，用量依培養(yǎng)器皿大小而定；

b.加入適量溶液B至完全覆蓋細胞，室溫下靜置10min；

c.以溶液A清洗細胞3次；

d.加入適量溶液E覆蓋細胞，室溫靜置10min；

e.以溶液A清洗細胞至流出液無色；

f.加入適量溶液F，室溫靜置20min；

g.以溶液A清洗細胞至流出液無色，加入適量溶液A覆蓋細胞。

顯微鏡下觀察。