[發明專利]甘氨酰-L-酪氨酸的制備工藝

有效

• 申請號: 201110272821.7
• 申請日: 2011-09-15
• 公開（公告）號: CN102993270A
• 公開（公告）日: 2013-03-27
• 發明（設計）人: 鄭家晴;劉淑桂;馮波;張建禮;崔美蘭;李潔;周海洋;劉明明;劉淑靜;劉杰;牛海崗
• 申請（專利權）人: 山東齊都藥業有限公司
• 主分類號: C07K5/062
• 分類號: C07K5/062;C07K1/14
• 代理公司: 青島發思特專利商標代理有限公司 37212
• 代理人: 耿霞

技術領域

本發明屬于藥物化學領域，涉及一種甘氨酰-L-酪氨酸的制備工藝。

背景技術

甘氨酰-L-酪氨酸是由酪氨酸和甘氨酸反應而成的人工合成二肽。目前制備甘氨酰-L-酪氨酸方法主要有兩種途徑：一是L-酪氨酸與氯乙酰氯縮合然后氨解的方法制備甘氨酰-L-酪氨酸，該合成路線所用的起始原料氯乙酰氯、L-酪氨酸和氨水皆為常見原料，價廉易得，且反應路線較短，可以大大降低終產品的成本，較適合于工業化生產；另一種是L-酪氨酸酯與N-保護的甘氨酸為起始原料進行縮合成肽反應制備甘氨酰-L-酪氨酸，此路線與第一種路線相比，合成路線較長，活性酯的合成以及保護基的脫掉步驟降低了氨酰-L-酪氨酸合成的總收率。

甘氨酰-L-酪氨酸的化學結構式如下：

2001年美國專利(US?Patent?6,197,998B1)報道了酰氯反應氨解的方法，首先由氯乙酰氯與L-酪氨酸在堿性條件下進行縮合反應制得N-氯乙酰-L-酪氨酸，N-氯乙酰-L-酪氨酸再在6eq的碳酸氫鈉催化下與氨水進行氨解反應制的甘氨酰-L-酪氨酸粗品，然后經過WA-30柱層析分離、水重結晶得到甘氨酰-L-酪氨酸。

Paul，R.et?al.，Journal?Organic?Chemistry?Vol27：2094～99(1962)，報道了以N，N′-碳酰二咪唑為縮合劑將芐氧羰基甘氨酸和酪氨酸乙酯，縮合成肽，然后水解掉保護基制備甘氨酰-L-酪氨酸的方法。

S.Rajappa，K?et?al.，Tetrahedron?Vol23：4805～9(1967)，報道了O-(N-芐氧羰基甘氨酰)新戊酰異羥肟酸為活性酯低溫下加入酪氨酸乙酯，先縮合成肽，然后水解掉保護基制備甘氨酰-L-酪氨酸的方法。

歐洲專利EP311057(1998)，報道了以二環己基碳酰亞胺為縮合劑，將N-羥基琥珀酰亞胺和芐氧羰基甘氨酸制成活性酯，然后與酪氨酸乙酯縮合成肽，繼而水解制備甘氨酰-L-酪氨酸的方法。

發明內容

本發明的目的是提供一種甘氨酰-L-酪氨酸的制備工藝，對氨解以及精制工藝進行了優化，從而降低了成本，并且提高了收率和純度，更適用于工業化生產。

所述的甘氨酰-L-酪氨酸的制備工藝，包括由氯乙酰氯與L-酪氨酸在堿性條件下發生縮合反應得到N-氯乙酰-L-酪氨酸，然后再進行氨解反應得到甘氨酰-L-酪氨酸，氨解反應由N-氯乙酰-L-酪氨酸與濃氨水在無任何催化劑催化的條件下直接進行，反應結束后，在40～50℃、-0.08～-0.10MPa下減壓蒸除過量的氨水，剩余物經水重結晶后過濾制得甘氨酰-L-酪氨酸粗品，再經精制工藝得到藥用級別的甘氨酰-L-酪氨酸精制品。

制得的甘氨酰-L-酪氨酸粗品的HPLC純度≥98.0％，收率為75％～85％；藥用級別的甘氨酰-L-酪氨酸精制品的HPLC純度≥99.5％，收率為80％～90％。

所述的氨解反應中N-氯乙酰-L-酪氨酸的質量與濃氨水體積比值為1∶5～20，N-氯乙酰-L-酪氨酸的質量以克計，濃氨水體積以毫升計。

所述的氨解反應溫度為30℃～50℃，氨解反應時間為7～10小時。

所述的氨解反應進程通過TLC監控，展開劑為氯仿和甲醇，兩者體積比為1∶3，TLC為薄層色譜。

所述的水重結晶過程中，水的加入體積與N-氯乙酰-L-酪氨酸質量比為1～3∶1，水的體積以毫升計，N-氯乙酰-L-酪氨酸的質量以克計。

制得的甘氨酰-L-酪氨酸粗品，可以在化工工業中直接應用。

所述的精制工藝包括如下步驟：

(1)溶解：將甘氨酰-L-酪氨酸粗品溶于純化水中，甘氨酰-L-酪氨酸粗品的質量和純化水體積比值為1∶5～15，攪拌狀態下加熱至30℃～50℃下至固體全部溶解，甘氨酰-L-酪氨酸粗品質量以克計，純化水的體積以毫升計；

(2)吸附過濾：加入活性炭，恒溫下攪拌40～60min后趁熱過濾，加入的活性炭與甘氨酰-L-酪氨酸粗品的質量比為2％，將所得濾液繼續加入活性炭，重復吸附過濾一次；

(3)析晶：濾液溫度降至25±2℃后，加入與純化水等體積的乙醇，然后放置于-5℃～0℃下析晶8～10小時，制得藥用級別的甘氨酰-L-酪氨酸精制品。

本發明采用如下的工藝路線：

本發明的有益效果如下：