[發明專利]喹乙醇流動注射分子印跡-化學發光在線聯用檢測方法

無效

• 申請號: 201110265788.5
• 申請日: 2011-09-08
• 公開（公告）號: CN102419324A
• 公開（公告）日: 2012-04-18
• 發明（設計）人: 徐志祥;宋佳明;徐龍華
• 申請（專利權）人: 山東農業大學
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種喹乙醇流動注射分子印跡-化學發光在線聯用檢測方法，屬于食品安全檢測術領域，特別是一種喹乙醇的快速檢測方法。

背景技術

喹乙醇（Olaquindox，2-[N-(2-羥基-乙基)-氨基甲酰]-3-甲基-喹惡啉-1,4-二氧化物）因其具有良好的廣譜抗菌效果并且有促進畜禽對飼料的消化利用，提高生長速度；是一種低毒、高效、用量少的抗菌促生長劑，被廣泛用于多種獸藥及飼料添加劑中。

目前國內外食品中喹乙醇的檢測大都采用液相色譜及液相色譜質譜聯聯用的方法進行定性和定量檢測，但上述幾種檢測方法所使用的設備價格昂貴且在喹乙醇含量較低時很難檢出，需要復雜樣品前處理技術。分子印跡-化學發光聯用檢測方法將分子印跡技術的高特異性識別作用與化學發光的高靈敏度相結合，避免了傳統檢測中復雜的樣品前處理過程，使檢測過程簡單、快速且具有高的靈敏度，對保證我國食品中喹乙醇的有效檢測和監控監管，盡快提升我國的食品安全性和食品安全的控制能力將發揮重要作用，具有十分重要意義。

發明內容?????

本發明的目的在于克服傳統的喹乙醇檢測方法存在的檢測時間長、儀器價格昂貴、準確度差、前處理煩瑣等缺陷，提供一種喹乙醇流動注射分子印跡-化學發光在線聯用檢測方法。

一種喹乙醇流動注射分子印跡-化學發光在線聯用檢測方法，是按以下步驟完成的：

1）分子印跡聚合物的制備：在甲醇溶液中，將喹乙醇、功能單體3-氨基丙基三乙氧基硅烷、交聯劑四乙氧基硅烷以1:3:8的摩爾比例混合均勻，然后加入活化硅球作為支持載體，0.1?mol?L^-1醋酸作為催化劑進行聚合反應；用1:3（v/v）冰乙酸-甲醇溶液連續洗脫8h以除去喹乙醇，再用100%甲醇洗至中性，干燥后得分子印跡聚合物（MIP）；

2）?流動注射分子印跡-化學發光在線聯用體系的建立

向一根6?mm?×5?cm?的玻璃管內填充步驟1制備的100?mg分子印跡聚合物，兩端塞少許玻璃棉制成MIP柱；將MIP柱放在化學發光儀的檢測光窗上，建立流動注射分子印跡-化學發光在線聯用體系；將化學發光體系溶液（3.0×10^?4?mol?L^?1高錳酸鉀溶液、1.5?mol?L^?1硫酸溶液和5.0×10^?4?mol?L^?1硫代硫酸鈉）分別通過三條流路同時流動注射流過MIP柱，除去MIP柱上的雜質直至基線平穩；

3）流動注射分子印跡-化學發光在線聯用檢測流程（圖1）：

a??富集喹乙醇：

把喹乙醇標準溶液流動注射入分子印跡-化學發光在線聯用體系4?min，當喹乙醇標準溶液流經MIP柱時，溶液中的喹乙醇被MIP柱選擇性吸附；

b???清洗除去雜質：

把蒸餾水注入體系2?min，清洗并除去MIP柱上除喹乙醇以外的雜質；

c???化學發光信號產生：

將化學發光體系溶液（3.0×10^?4?mol?L^?1高錳酸鉀溶液、1.5?mol?L^?1硫酸溶液和5.0×10^?4?mol?L^?1硫代硫酸鈉）分別通過三條流路同時流動注射入體系與MIP柱上吸附的喹乙醇反應產生光信號，記錄光信號響應值；

d???清洗MIP小柱：

把蒸餾水注入體系2?min，清洗并除去MIP柱上喹乙醇反應后殘留的雜質，進行下一次實驗；

4)?以步驟3）中喹乙醇標準溶液濃度為橫坐標，以對應濃度產生的光信號響應值為縱坐標，繪制標準曲線；

5)將含喹乙醇的分析物粉碎，按重量體積比（g/mL）1:5加入乙腈溶液超聲提取三次，合并提取液，定容；3000?r?min^-1?離心30min，得樣品提取液；

6)將步驟5）中得到的樣品提取液代替喹乙醇標準溶液，重復步驟3）操作，根據化學發光信號響應值由標準曲線計算出分析物中喹乙醇含量。

本發明的優點和積極效果是：

1.?本發明以制備的對喹乙醇具有高選擇性的分子印跡聚合物作為吸附劑，避免了傳統吸附劑選擇性差等缺點，避免了樣品繁瑣的前處理過程。?

2.?本發明將分子印跡技術與化學技術聯用建立對喹乙醇具有高靈敏度的檢測方法，實現了對喹乙醇的在線富集檢測，大大縮短了分析時間，適用于快速檢測。