[發明專利]老年斑磁共振納米診斷試劑及其優化方法

在審

• 申請號: 201110231428.3
• 申請日: 2011-08-11
• 公開（公告）號: CN102284068A
• 公開（公告）日: 2011-12-21
• 發明（設計）人: 張蘇明;劉祖黎;褚倩;杜桂煥;張旻;夏星;李震;馬銘;楊華靜;王東;湛彥強;吳軍;熊永潔;閔喆;李慧
• 申請（專利權）人: 華中科技大學同濟醫學院附屬同濟醫院
• 主分類號: A61K49/14
• 分類號: A61K49/14;A61K49/18
• 代理公司: 華中科技大學專利中心 42201
• 代理人: 夏惠忠

1.一種老年斑磁共振納米診斷試劑，其特征在于，它是結合有人體免疫缺陷病毒(HIV-1)的轉錄活化因子肽段(簡稱：HIV-1?Tat肽段)和Aβ_16-20肽段的超順磁性納米氧化鐵顆粒(USPIO)(簡稱為：Tat-USPIO-Aβ_16-20)。

2.根據權利要求1所述的老年斑磁共振納米診斷試劑，其特征在于含有生理可接受的稀釋劑。

3.根據權利要求2所述的老年斑磁共振納米診斷試劑，其特征在于所述的稀釋劑可以是PBS緩沖液或生理鹽水。

4.根據權利要求2或3所述的老年斑磁共振納米診斷試劑，其特征在于，以鐵元素含量計量該診斷試劑中Tat-USPIO-Aβ_16-20的濃度為：其鐵元素含量為0.01-20摩爾/升。

5.據權利要求1所述的老年斑磁共振納米診斷試劑，其特征在于，所用的超順磁性納米氧化鐵顆粒的粒徑大小為6-10納米。

6.結合有人體免疫缺陷病毒(HIV-1)的轉錄活化因子肽段(HIV-1?Tat肽段)和Aβ_16-20肽段的超順磁性納米氧化鐵顆粒在制備老年斑磁共振納米診斷試劑中的應用。

7.一種老年斑磁共振納米診斷試劑的制備方法，包括以下步驟：

步驟一、在超順磁性納米氧化鐵顆粒表面連上氨基官能團，得到表面官能化的超順磁性納米氧化鐵顆粒；

步驟二、將5-10重量份的3-(2-吡啶二巰基)丙酸N-羥基琥珀酰亞胺酯(SPDP)溶于1-2體積份的二甲基亞砜中，得交聯劑溶液，再將該交聯劑溶液與濃度為0.1-0.2mol/L、PH＝7.4-8的磷酸鹽緩沖溶液(如：PBS溶液、D-Hanks溶液等)混合，得到交聯劑溶液與磷酸鹽溶液的混合液，交聯劑溶液與磷酸鹽溶液的體積用量比為l∶1-2；

步驟三、將表面官能化的超順磁性納米氧化鐵顆粒加入到步驟二得到的混合液中，表面官能化的超順磁性納米氧化鐵顆粒與該混合液的重量/體積用量比為3-5∶2-3，在室溫下放置60～120分鐘，置于超濾管中，6000-8000轉/分離心50-60分鐘，過濾去除雜質和未反應的交聯劑溶液，得到經交聯溶液處理過的表面官能化的超順磁性納米氧化鐵顆粒(USPIO)磷酸鹽溶液；

步驟四、取經交聯溶液處理過的表面官能化的超順磁性納米氧化鐵顆粒(USPIO)溶液3-5體積份，向其中加入1-2體積份的濃度為0.02mol/L的N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)溶液和1-2體積份的濃度為0.2mol/L的3-二甲胺基丙基碳二亞胺(EDC)溶液，于37℃下放置30-90分鐘，然后再加入3-5重量份的人體免疫缺陷病毒HIV-1的轉錄活化因子肽段(HIV-1?Tat肽段)和3-5重量的份Aβ_16-20肽段，混合后室溫下放置10-12小時；置于超濾管中，6000-8000轉/分離心40-60分鐘，過濾去除雜質和未反應的溶液，得到結合有人體免疫缺陷病毒(HIV-1)的轉錄活化因子肽段(簡稱：HIV-1?Tat肽段)和Aβ_16-20肽段的超順磁性納米氧化鐵顆粒，即老年斑磁共振納米診斷試劑。