[發(fā)明專利]一種豬用免疫增強劑IL-12B(P40)及其制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110223294.0
• 申請日: 2011-08-04
• 公開（公告）號: CN102908613A
• 公開（公告）日: 2013-02-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李帥偉;于賓賓
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州格拉姆生物科技有限公司
• 主分類號: A61K38/20
• 分類號: A61K38/20;A61K39/187;A61K39/39;C12N15/62;A61P37/04;A61P31/14
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1.一種豬用免疫增強劑IL-12B(P40)，其特征在于，其含有豬IL-12的P40亞基的主要氨基酸序列，該氨基酸序列為：MHLQQLVVSWFSLVWLASPIVAIWELEKNVYVVELDWYPNAPGEMVVLTCNTPEEDGITWTSDQSSEVLGTGKTLTIHVKEFGDAGQYTCRKGGAVLSQSLLLLHKKEDGIWSTDILKDQKEPKNKSFLKCEAKNYSGRFTCWWLTAISTDLKFSVKSSRGSTDPRGVTCGTATLSEDLGEYKKYRVECQEGSACPAAEESLPIEVVLEAVHKLKYENYTSSFFIRDIIKPDPPKNLQLNPLKNSRHVEISWEYPDTWSTPHSYFSLMFGVQVQGKNKREKKDKLFTDQISAKVTCHKDANIRVQARDRYYSSSWSEWASVSCN。

2.權(quán)利要求1所述的豬用免疫增強劑IL-12B(P40)的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)以IL-12B(P40)特異性的上下游引物，通過RT-PCR合成包含EcoRI和XhoI兩個酶切位點的IL-12B(P40)cDNA，經(jīng)過純化酶切，重組至原核表達載體pGEX-6p-1；

2)該重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌表達菌株BL21(DE3)，經(jīng)IPTG誘導(dǎo)的表達產(chǎn)物為GST-IL-12B(P40)融合蛋白；

3)將純化的GST-IL-12B(P40)融合蛋白與化學(xué)合成的豬瘟病毒T細胞表位E290多肽(KHKVRNEVMVHWFDD)混勻。